关于抗碱性磷酸酶复合物制备技术的简介

Mason等(1978),用碱性磷酸酶代替过氧化物酶,建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(APAAP)桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清,很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求,在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等(1989)利用抗AP的McAb建立了一种制备APAAP复合物的简便方法。只需将AP和抗AP的McAb以适当比例混合,4℃结合过夜即可使用。采用改良的ELISA方法检测APAAP复合中AP的最适含量。具体方法是:用羊抗鼠Ig包被微量滴定板;加入一定量的抗APMcAb;分别加入不同量的AP作用后经过洗涤;加底物显色,测定光密度值(OD)。在一定范围内,APAAP复合物溶液中AP含量增加的同时,相应的OD值也随之增大;当AP增加到一定量时(约6~8mg/mL)、OD值保持稳定。......阅读全文

关于DNA分子量标准的制备的简介

  采用EcoRⅠ或HindⅢ酶解所得的λDNA片段来作为电泳时的分子量标准。λDNA为长度约50kb的双链DNA分子,其商品溶液浓度为0.5mg/ml,酶解反应操作如上述。HindIII切割 DNA后得到8个片段,长度分别为23.1, 9.4, 6.6, 4.4, 2.3, 2.0, 0.56和0

关于抗风疹病毒抗体检查的简介

  风疹又称德国麻疹,多发于学龄儿童和青少年。80%以上人群此病毒抗体阳性。感染病毒后2~3周抗体滴度明显升高,以后逐渐下降至一定水平,并维持很长时期,甚至终身。风疹患者临床表现较轻,一般不产生严重后果,但孕妇感染后病毒随血流传给胎儿,可使胎儿发育不良或宫内死亡。

关于异位抗利激素综合征的简介

  癌除了由于肿瘤本身及转移灶的侵害引起症状外,还可通过产生激素性或体液性物质分布至全身而导致多种临床表现的出现,有时后者的严重性较本身的危害更大。上述情况曾被称为“异位激素分泌综合症”,指某一起源于非内分泌组织的肿瘤产生了某种激素,或是起源于内分泌腺的肿瘤(如甲状腺髓样癌),除产生此内分泌腺正常时

关于抗肾小球基底膜抗体的简介

  抗肾小球基底膜(GBM)抗体相关疾病是一组自身免疫性疾病,该病的致病因素为血浆存在抗GBM抗体。由于肺和肾小球的基底膜具有共同的抗原,因此主要的受累脏器是肺和肾脏。肾脏受累多为新月体性肾炎,肾功能损害进展迅速;少数为轻度系膜增生性肾炎,可保持肾功能正常。肺受累表现为肺出血,大咯血可引起窒息而危及

关于抗中性粒细胞胞浆抗体的简介

  抗中性粒细胞胞浆抗体,指与中性粒细胞及单核细胞胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。当中性粒细胞受抗原刺激后,胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成,刺激机体而产生ANCA。

关于抗透明质酸酶的简介

  A组乙型溶血性链球菌可产生透明质酸酶,此酶具有抗原性,可刺激机体产生抗体,即抗透明质酸酶(antihyalumnidase,AH),测定血清中的AH有助于确定链球菌感染是否存在。

关于抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)的简介

  抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)与抗甲状腺球蛋白抗体的临床意义大致相同,都是检测其自身抗体。

关于抗线粒体2型抗体检测的简介

  抗线粒体抗体(AMA)是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,其靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白,成分复杂,现知有M1~M99种亚型。M2是原发性胆汁性肝硬化患者血清中抗线粒体抗体反应的主要成分,本质是线粒体内膜上的丙酮酸脱氢酶和α-酮酸脱氢酶的复合体。

关于抗人球蛋白试验(间接法)的简介

  抗人球蛋白试验又称Coombs试验,是检查不完全抗体的常用方法,是诊断自身免疫性溶血性贫血的最重要的试验。一般分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)。抗人球蛋白试验(直接法)的目的是检查红细胞表面的不完全抗体,抗人球蛋白试验(间接法)的目的是检查血清中是否存在游离的不完全抗体。间接法是先

关于抗肝细胞膜抗原抗体的简介

  抗肝细胞膜抗原抗体(LMA)最初由Hopf等,于HBsAg阴性的慢性活动性肝炎与肝硬化病人血清中发现,其靶抗原是一种与LSP不同的肝细胞膜可溶性蛋白,可自肝匀浆离心后的上清液中分离纯化而得,亦具有肝细胞特异性而无严格的种属特异性,免疫电泳时LM-Ag在前白蛋白区带(而LSP在γ区带)。LMA自身

关于抗可溶性肝抗原抗体的简介

  抗可溶性肝抗原抗体(抗-SLA抗体)是自身免疫性肝炎(AIH)的自身抗体,其靶抗原是相对分子量为50 000的一种细胞溶质分子,被称为UGA抑制物tRNA相关蛋白。抗-SLA抗体仅在AIH及AIH与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的重叠综合征患者检测阳性,在病毒性肝炎和其他肝病检测阴性,故对AIH具

关于乙型肝炎表面抗体(抗HBs)的简介

  乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)一般简称表面抗体。当乙型肝炎病毒侵入人体后,刺激人的免疫系统产生免疫反应,人体免疫系统中的B淋巴细胞分泌出一种特异的免疫球蛋白G,就是表面抗体,它可以和表面抗原特异地结合,然后在体内与人体的其他免疫功能共同作用下,可以把病毒清除掉,保护人体不再受乙肝病毒的感染,故称

关于抗戊型肝炎病毒IgM抗体的简介

  戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)为经肠道传播引起戊型肝炎的病原体,呈球形,表面无囊膜,二十面体立体对称,表面有突起结构,内部核酸为单股RNA,属嵌杯状病毒科的嗜肝RNA病毒属。HEV有表面抗原HEVAg,可刺激机体产生抗体。HEV的实验室检测主要是检测抗体,有IgA、I

关于移植物抗白血病效应的简介

  是指与异基因造血干、祖细胞移植密切相关的移植物抗白血病功能,它的产生与移植前进行的化、放疗等预处理方案并无关联。许多研究者发现:发生过急性或慢性移植物抗宿主的患者其白血病的复发率要比未发生过移植物抗宿主的患者低2.5倍。另外还发现同基因骨髓移植患者其白血病的复发率要比异基因骨髓移植者为高。因此人

关于抗核糖体P蛋白抗体的简介

  抗核糖体P蛋白抗体,即anti-P抗体,其是系统性红斑狼疮的特异性抗体,通常使用酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫双扩散法(ID)和免疫印迹法(IBT)对血清进行检测抗核糖体P蛋白抗体,在其他疾病和正常人中很少见。近来有研究表明,抗核糖体P蛋白抗体与红斑狼疮的神经精神损害有很大的相关性,认为其与

关于抗人球蛋白试验(直接法)的简介

  抗人球蛋白试验又称Coombs’试验,是检查不完全抗体的常用方法,是诊断自身免疫性溶血性贫血的最重要的试验。一般分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)。抗人球蛋白试验(直接法)的目的是检查红细胞表面的不完全抗体,抗人球蛋白试验(间接法)的目的是检查血清中是否存在游离的不完全抗体。表面附有

关于抗巨细胞病毒IgM抗体的简介

  巨细胞病毒是一种疱疹病毒,传播方式为胎盘或生殖道上行感染、输血等。人体感染后大多数呈亚临床期或潜伏感染,可侵犯全身各器官,成人感染巨细胞病毒可引起肝炎、肺炎,孕妇感染可造成胎儿受损、引起胎儿发育不健全,先天性免疫缺陷、智能低下,丧失听力、视力损害等,出现早产、流产、死胎。巨细胞病毒是引起先天性畸

关于抗中性粒细胞胞质抗体的简介

  抗中性粒细胞胞浆抗体是一种与中性粒细胞及单核细胞的胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体,是一组以人中性粒细胞胞质成分为靶抗原,与临床多种小血管炎性疾病密切相关的自身抗体。ANCA最早于1982年在坏死性肾小球肾炎患者血清中发现。间接免疫荧光试验研究显示,中性粒细胞胞浆抗体荧光染色模型有两种,胞浆型(cA

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

            实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复合物。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理在核内

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复合物。实验材料 HeLa S3 细胞抗体试剂、试剂盒 免疫

酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连接APAAP复合物,再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断

抗肽抗体的制备实验1

实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1.  将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中,置于一个2 ml 的玻璃试管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室温下温和搅拌30 min。 2.  加

抗肽抗体的制备实验2

实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1.  将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中,置于15 ml 的玻璃试管中,温和振摇。2.  加10 μmol 的合成肽。3.  缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液,于室温

制备色谱的简介

  很多初接触 色谱领域的朋友对制备色谱这个名词比较陌生。其实,在化学化工医药等广泛采用的层析法以及 薄层色谱就是最为典型的制备色谱,换句话说,将分析色谱的进样量增大,同时得出大量的所需物质(馏分)的过程就可以称为制备色谱。分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的

关于免疫酶技术的简介

  免疫酶技术(immunoenzymatic technique) 最早应用的免疫酶技术是免疫酶组织化学染色,即用标记的抗体与标本中的抗原发生特异性结合,当加入酶的底物时,在酶的作用下经一系列生化反应产生有色物质,借助光镜作出定位判断。目前,应用最广泛的是酶联免疫吸附试验(enzyme linke

关于冻干技术的简介

  干燥是保持物质不致腐败变质的方法之一。干燥的方法许多,如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等。但这些干燥方法都是在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品,一般是体积缩小、质地变硬,有些物质发生了氧化,一些易挥发的成分大部分会损失掉,有些热敏性的物质,如蛋白质、维生素会发生变性。微生物会失去

关于基因转染技术的简介

  基因转染技术将特定的遗传信息传递到真核细胞 中,这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究,也推动了诊断和治疗方面的分子技术 发展,并使基因治疗 成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。

关于图像分析技术的简介

  病理形态学的观察基本上是定性的,缺乏精确而更为客观的定量标准。图像分析技术(image analysis)的出现弥补了这个缺点。随着电子计算机技术的发展,形态定量技术已从二维空间向三维空间发展。在肿瘤病理方面图像分析主要应用于核形态参数的测定(区别癌前病变和癌;区别肿瘤的良恶性;肿瘤的组织病理分

关于干燥技术的历史简介

  二次世界大战以后,军队和政府开始广泛地进行有关脱水食品的实验。当时,人们对于脱水食品的味道和营养就有了更大的期望,大家都指望有一种更好的方法,使食品保存得更长久一些,同时,人们对食用方便性也有了更高的要求,既要保存原味、质地,又要保留营养成份,但是,人们的要求又与科学技术所能达到的水平有一定的距