关于抗过氧化物复合物制备技术的简介
Stemberger(1970)等,首先报道了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(peroxidase-antiperoxidase,PAP)法,此法也称为非标记抗体酶法(unlabelled antibody enzymemethod)。PAP法不需用任何化学交联剂处理酶和抗体,二者活性不受化学反应的影响,可大大提高免疫酶法的灵敏度。......阅读全文
关于抗甲状腺过氧化物酶自身抗体的临床意义介绍
桥本(Hashimoto)甲状腺炎患者血清中ATG检出率可达90%-95%;甲状腺功能亢进患者检出率40%-90%不等,检出率高的可能与部分病例属于桥本甲亢有关;原发性甲状腺功能低下症患者检出率65%左右。亚急性甲状腺炎、甲状腺癌、甲状腺腺瘤等检出率都很低。SLE等结缔组织病患者血清ATG检出率
关于DNA测序技术的凝胶的制备
(1)玻璃板经粘合硅胶和Sigmacote处理后,即可固定玻璃板。该方法是用0.2mm或0.4mm厚的边条置于玻璃板左右两侧,将另一块玻璃板压于其上。在长玻璃板的一侧插入鲨鱼齿梳平的一面边缘,用夹子固定住。 (2)根据所需要的凝胶浓度,按下表制备测序凝胶,一般6%-8%的胶浓度可获得较好的结果
关于偶氮化合物制备的简介
偶氮化合物具有顺、反几何异构体(见几何异构)。反式比顺式稳定。两种异构体在光照或加热条件下可相互转换: 偶氮化合物主要通过重氮盐的偶联反应制得,例如: 氢化偶氮化合物和芳香胺在氧化剂存在下,可被氧化为相应的偶氮化合物;氧化偶氮化合物和硝基化合物在还原剂存在下,也可被还原为偶氮化合物。
过氧化物酶的简介
过氧化物酶是氧化还原酶的一种。分布在乳汁、白细胞、血小板等体液或细胞中,该酶的辅基亦为血红素,以H2O2为电子受体催化底物氧化的酶,它催化H2O2直接氧化酚类或胺类化合物,如谷胱甘肽过氧化物酶、嗜酸性粒细胞过氧化物酶和甲状腺过氧化物酶等,具有消除过氧化氢和酚类胺类毒性的双重作用,反应如下:R+H
抗髓过氧化物酶抗体的概述
抗髓过氧化物酶抗体属于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的一种,针对中性粒细胞和单核粒细胞的细胞浆成分。间接免疫荧光法检测用乙醇固定的中性粒细胞是ANCA检测的基本方法,ANCA产生的荧光模式包括胞浆型(cANCA)、核周型(pANCA)。两种荧光模式都可以针对多种特异性的靶抗原,所以对于血管炎的
抗髓过氧化物酶抗体的概述
抗髓过氧化物酶抗体属于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的一种,针对中性粒细胞和单核粒细胞的细胞浆成分。间接免疫荧光法检测用乙醇固定的中性粒细胞是ANCA检测的基本方法,ANCA产生的荧光模式包括胞浆型(cANCA)、核周型(pANCA)。两种荧光模式都可以针对多种特异性的靶抗原,所以对于血管炎的
抗髓过氧化物酶抗体的介绍
抗髓过氧化物酶抗体属于抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的一种,针对中性粒细胞和单核粒细胞的细胞浆成分。间接免疫荧光法检测用乙醇固定的中性粒细胞是ANCA检测的基本方法,ANCA产生的荧光模式包括胞浆型(cANCA)、核周型(pANCA)。两种荧光模式都可以针对多种特异性的靶抗原,所以对于血管炎的
免疫酶标技术—ABC法卵白素生物素过氧化物酶复合物法
实验方法原理由于卵白素与生物素具有高度亲和力,可形成卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC复合物),ABC 复合物与生物素化二抗结合,最后形成抗原-抗体-生物素体二抗-ABC复合物。该方法比单PAP法灵敏,背景染色低,受到广大研究工作者的观迎。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清DAB苏木精
免疫细胞化学法的技术分类
①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标记物
免疫细胞化学法
①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标记物
免疫细胞化学法的分类
①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标
辣根过氧化物酶的制备方法
实验原理过氧化物酶催化以下反应:2 H2O2 →O2+2H2O这一类酶以铁卟啉为辅基,所以属血红素蛋白质类(hemeProteins)。过氧化物酶在生物界分布极广,在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。本实验是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冷冻干燥,最
关于DNA分子量标准的制备的简介
采用EcoRⅠ或HindⅢ酶解所得的λDNA片段来作为电泳时的分子量标准。λDNA为长度约50kb的双链DNA分子,其商品溶液浓度为0.5mg/ml,酶解反应操作如上述。HindIII切割 DNA后得到8个片段,长度分别为23.1, 9.4, 6.6, 4.4, 2.3, 2.0, 0.56和0
不均一核糖核蛋白复合物的制备实验
实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 结合形成 hnRNP 复
不均一核糖核蛋白复合物的制备实验
实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 结合形成 hnRNP 复合物。实验材料 HeLa S3 细胞抗体试剂、试剂盒 免疫
不均一核糖核蛋白复合物的制备实验
在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP) 结合形成 hnRNP 复合物。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理在核内
过氧化物酶简介
过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶,它们能催化很多反应。过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于载体的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢,氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用。
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术
酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连接APAAP复合物,再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断
关于异位抗利激素综合征的简介
癌除了由于肿瘤本身及转移灶的侵害引起症状外,还可通过产生激素性或体液性物质分布至全身而导致多种临床表现的出现,有时后者的严重性较本身的危害更大。上述情况曾被称为“异位激素分泌综合症”,指某一起源于非内分泌组织的肿瘤产生了某种激素,或是起源于内分泌腺的肿瘤(如甲状腺髓样癌),除产生此内分泌腺正常时
关于抗风疹病毒抗体检查的简介
风疹又称德国麻疹,多发于学龄儿童和青少年。80%以上人群此病毒抗体阳性。感染病毒后2~3周抗体滴度明显升高,以后逐渐下降至一定水平,并维持很长时期,甚至终身。风疹患者临床表现较轻,一般不产生严重后果,但孕妇感染后病毒随血流传给胎儿,可使胎儿发育不良或宫内死亡。
关于抗肾小球基底膜抗体的简介
抗肾小球基底膜(GBM)抗体相关疾病是一组自身免疫性疾病,该病的致病因素为血浆存在抗GBM抗体。由于肺和肾小球的基底膜具有共同的抗原,因此主要的受累脏器是肺和肾脏。肾脏受累多为新月体性肾炎,肾功能损害进展迅速;少数为轻度系膜增生性肾炎,可保持肾功能正常。肺受累表现为肺出血,大咯血可引起窒息而危及
关于抗透明质酸酶的简介
A组乙型溶血性链球菌可产生透明质酸酶,此酶具有抗原性,可刺激机体产生抗体,即抗透明质酸酶(antihyalumnidase,AH),测定血清中的AH有助于确定链球菌感染是否存在。
关于抗中性粒细胞胞浆抗体的简介
抗中性粒细胞胞浆抗体,指与中性粒细胞及单核细胞胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。当中性粒细胞受抗原刺激后,胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成,刺激机体而产生ANCA。
关于抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)的简介
抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)与抗甲状腺球蛋白抗体的临床意义大致相同,都是检测其自身抗体。
关于抗人球蛋白试验(间接法)的简介
抗人球蛋白试验又称Coombs试验,是检查不完全抗体的常用方法,是诊断自身免疫性溶血性贫血的最重要的试验。一般分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)。抗人球蛋白试验(直接法)的目的是检查红细胞表面的不完全抗体,抗人球蛋白试验(间接法)的目的是检查血清中是否存在游离的不完全抗体。间接法是先
关于抗肝细胞膜抗原抗体的简介
抗肝细胞膜抗原抗体(LMA)最初由Hopf等,于HBsAg阴性的慢性活动性肝炎与肝硬化病人血清中发现,其靶抗原是一种与LSP不同的肝细胞膜可溶性蛋白,可自肝匀浆离心后的上清液中分离纯化而得,亦具有肝细胞特异性而无严格的种属特异性,免疫电泳时LM-Ag在前白蛋白区带(而LSP在γ区带)。LMA自身
关于抗核糖体P蛋白抗体的简介
抗核糖体P蛋白抗体,即anti-P抗体,其是系统性红斑狼疮的特异性抗体,通常使用酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫双扩散法(ID)和免疫印迹法(IBT)对血清进行检测抗核糖体P蛋白抗体,在其他疾病和正常人中很少见。近来有研究表明,抗核糖体P蛋白抗体与红斑狼疮的神经精神损害有很大的相关性,认为其与
关于抗线粒体2型抗体检测的简介
抗线粒体抗体(AMA)是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,其靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白,成分复杂,现知有M1~M99种亚型。M2是原发性胆汁性肝硬化患者血清中抗线粒体抗体反应的主要成分,本质是线粒体内膜上的丙酮酸脱氢酶和α-酮酸脱氢酶的复合体。
关于抗戊型肝炎病毒IgM抗体的简介
戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)为经肠道传播引起戊型肝炎的病原体,呈球形,表面无囊膜,二十面体立体对称,表面有突起结构,内部核酸为单股RNA,属嵌杯状病毒科的嗜肝RNA病毒属。HEV有表面抗原HEVAg,可刺激机体产生抗体。HEV的实验室检测主要是检测抗体,有IgA、I