酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术
酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术（APAAP法）【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法)，是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用，其中一个Fab段连接McAb ，另一个Fab段连接APAAP复合物，再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断抗原分子的存在。该方法由于使用免疫桥联技术，故其敏感性高，结果易于判断，同时又减少了内源性酶的影响，特异性强。目前已广泛用于淋巴细胞分化抗原、活化抗原、MHC-I、II类抗原表达的检测等。 【试剂及材料】 ① APAAP试剂盒 ② T缓冲液(pH7.6 0.05mol/L Tris-HCl)： Tris 30.25g，NaCl 40.0g，HCl 11ml，加蒸馏水溶解至500ml，调pH值至7.4～7.6。抗体稀释用含1％牛血清白蛋白的T。 ③ Mayer苏木精复染液：苏木精0.1g，钾明矾5g，柠檬酸0.1g，......阅读全文
ALKALINE－PHOSPHATASE－(APAAP)－TECHNIQUE
Preparation: Cytological PreparationsFixation: Air dry films or cytospin preparations overnight at room temperature. For frozen and paraffin sections
免疫碱性磷酸酶组织化学实验——APAAP－法
实验方法原理APAAP 法的原理与 PAP 法类似，都属于未标记抗体桥联法，所不同的是用 AKP 取代了 HRP。该方法较 IAP 法敏感性髙，特别是用于标记固定过的组织。APAAP 法的主要优点是非特异性背景染色较浅，因为其不受内源性过氧化物酶的干扰，APAAP 复合物所用的 AKP 是从小牛肠组
应用－APAAP－免疫染色和原位杂交进行序列的－MAC－分析实验
实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜
细胞表面标记的检测技术
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶（APAAP）免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术－流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP（Al
细胞表面标记的检测技术
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶（APAAP）免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术－流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP（Al
碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（APAAP）免疫组化染色技术
实验方法原理APAAP（Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique）技术的基本原理为：抗鼠IgG抗体作为桥梁，将鼠源性识别细胞抗原的第一抗体与鼠源性的抗碱性磷酸酶单克隆抗体-碱性磷酸酶复合物相连接，使之成为Ag，-Ab1－Ab2-
关于抗碱性磷酸酶复合物制备技术的简介
Mason等（1978），用碱性磷酸酶代替过氧化物酶，建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物（APAAP）桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清，很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求，在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等（1989）利用抗AP的McAb建立了一种制备
关于细胞组织化学染色的检查过程介绍
1、检查过程 PAP法抗原、抗体反应及酶标原理与APAAP法完全相同，都属于免疫组织化学反应，只是所标记的酶不同。PAP法酶化学反应原理与ABC-AP法完全相同，但ABC-AP法为亲合免疫组织化学反应。在染色步骤及方法上PAP法和ABC-AP法完全相同。 2、相关疾病 混合性厌氧菌感染，
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术
酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术（APAAP法）【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法)，是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用，其中一个Fab段连接McAb ，另一个Fab段连接APAAP复合物，再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断
关于呼吸道合胞病毒的病原检验介绍
常用免疫荧光试验等直接检查咽部脱落上皮细胞内的RSV抗原，以及RT-PCR检测病毒核酸等进行辅助诊断。 因RSV所致疾病在临床上与其他病毒或细菌所致类似疾病难以区别，故进行病毒分离和抗体检测是必要的，即使操作复杂、费时。 近年来利用鼻咽分泌物脱落细胞及血清中IgM抗体的间接法免疫荧光技术，E
呼吸道合胞病毒的病原检验
常用免疫荧光试验等直接检查咽部脱落上皮细胞内的RSV抗原，以及RT-PCR检测病毒核酸等进行辅助诊断。 因RSV所致疾病在临床上与其他病毒或细菌所致类似疾病难以区别，故进行病毒分离和抗体检测是必要的，即使操作复杂、费时。 近年来利用鼻咽分泌物脱落细胞及血清中IgM抗体的间接法免疫荧光技术，E
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...2
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液中，4℃透析过夜，更换三次缓冲液，注意避光。 （4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸盐缓冲液1ml，室温轻搅2-3小时，避光；加入5m
免疫碱性磷酸酶组织化学实验——间接免疫碱性磷酸酶法
免疫碱性磷酸酶组织化学技术是以碱性磷酸酶（AKP 或 AP）取代 HRP 来显示结果的免疫酶组织化学技术。最早出现的是间接免疫碱性磷酸酶法（IAP），1983 年 Mason 及 Moir 等建立了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（APAAP）复合物法。随后，人们建立了更为敏感的生物素-亲和素-碱性磷酸酶复合
常用单抗的标记技术
目前动物用单抗，在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用，大多以诊断试剂(盒)的形式提供，其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。1．酶标记(1)辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用
关于Th细胞检测的酶联免疫点法介绍
Schauer等对胞内细胞因子的测定作出综合评价，标本来源包括末梢血单个核细胞、肿瘤细胞、组织细胞等，检测方法常用免疫组化法，主要为碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（APAAP）技术[6] 和测定mRNA的荧光原位杂交技术（FISH），此外还有显微荧光法，将单个细胞用多聚甲醛固定，皂素渗透后，行间接免疫荧
临床化学检查方法介绍细胞组织化学染色介绍
细胞组织化学染色介绍： 免疫细胞组织化学染色是利用已知的抗体与细胞抗原特异性相结合的特性，通过化学反应使标记在抗体上的显示剂显示一定的颜色，并借助显微镜、荧光显微镜或电镜进行观察，以达到对组织、细胞结构中化学成分进行定量、定位分析的目的。细胞组织化学染色正常值： 检测结果呈阴性。细胞组织化学染色
免疫学实验细胞组织化学染色介绍
细胞组织化学染色介绍： 免疫细胞组织化学染色是利用已知的抗体与细胞抗原特异性相结合的特性，通过化学反应使标记在抗体上的显示剂显示一定的颜色，并借助显微镜、荧光显微镜或电镜进行观察，以达到对组织、细胞结构中化学成分进行定量、定位分析的目的。 细胞组织化学染色正常值： 检测结果呈阴
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法，也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法，也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在
免疫酶组织化学技术
免疫酶组织化学技术 1．酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上，创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2．PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上，建立了非标记抗体法，先将HRP免
沉淀法、过滤法、蒸馏法的区别
一沉淀法：固液分离。有时为了加速沉淀，可以加入一些凝聚剂，如明矾、活性炭等。二过滤法：固液分离。但是固体必须是不溶于水的才行。三蒸馏法：液液分离。利用沸点不同，沸点低的先蒸馏出来，沸点高的后蒸馏出来。
内标法与外标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被
外标法与内标法
一、内标法 什么叫内标法？怎样选择内标物？ 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质
Folin—酚试剂法（Lowry法）
实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Fol
标记抗体的应用技术——免疫斑点试验
实验方法原理硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力，在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。因而，将抗原吸附于纤维素膜后，就可利用纤维素膜作为固相进行抗原抗体反应。当加入抗体后（即可与膜上的抗原结合），然后再加入带有标记物的抗体，使标记通过抗抗体和相应抗体的结合间接地交联于纤维素膜上。
可见异物检查法第一法(灯检法)
取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检
峰面积归一法、内标法、外标法区别
色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候，通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析，从而确定待测组分的校正因子；实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样，虽然看上去是二次进样，但实际上未知样
气相法液相法固相法优缺点
气相法液相法固相法优点：分离效率高，分析速度快，样品用量少和检测灵敏度高。选择性好，可分离、分析恒沸混合物，沸点相近的物质，某些同位素，顺式与反式异构体邻、间、对位异构体，旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使
色谱定量方法：标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是：组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例，选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组
各显神通！浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法，用哪一种呢？每一种的适用范围是什么呢？其优缺点又是什么？其标准物又有什么要求呢？看完你就都知道了。 1、归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法，各成分校正因子一致时可用该法。 归一化法的优点： 该法简便