关于MaxamGilbert法的基本介绍
Maxam-Gilbert的化学断裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既适用于双链DNA,也适用于单链DNA。它的基本原理是利用几个具有碱基专一性的化学切断反应将单个末端被32P标记的DNA分子进行部分切断,产生几组从标记末端到与碱基专一性反应相应的那种碱基在DNA中每个位点的长短不同的片段,这几组片段在凝胶电泳中并排着按链长被分开,对凝胶进行放射自显影后就可以得到代表每个碱基位置的带谱,从这个带谱可以直接读出从标记末端向另一个末端方向的碱基序列。......阅读全文
关于MaxamGilbert法的基本介绍
Maxam-Gilbert的化学断裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既适用于双链DNA,也适用于单链DNA。它的基本原理是利用几个具有碱基专一性的化学切断反应将单个末端被32P标记的DNA分子进行部分切断,产生几组从标记末端到与碱基专一性反应相应的那种碱基在DNA中每个位点的长短不同的片段
关于MaxamGilbert法的简介
Maxam-Gilbert的化学断裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既适用于双链DNA,也适用于单链DNA。它的基本原理是利用几个具有碱基专一性的化学切断反应将单个末端被32P标记的DNA分子进行部分切断,产生几组从标记末端到与碱基专一性反应相应的那种碱基在DNA中每个位点的长短不同的片段
关于MaxamGilbert法研究进展介绍
核酸的一级结构的阐明,对于了解基因的结构、调控和表达有着重要的意义。sanger和Coulson建立的加减法和Maxam和Gilbert建立的化学断裂法使DNA序列分析技术有了革命性的突破。以后sanger等人又发展了双脱氧核苷酸末端终止法,M13单链噬菌体克隆技术的建立使利用该法测定DNa序列
DNA测序——MaxamGilbert化学修饰法
实验方法原理用化学试剂 处理具有末端放射性标记的DNA片段 ,造成碱基的特异性切割并产生一组具有不同长度的DNA链降解产物,经凝胶电泳分离和放射自显影后,可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。实验材料DNA试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材电泳仪实验步骤一、取待测DNA片段,既可以是单链也可以是双链。 此
关于过滤法的基本介绍
过滤,实质上是使废水通过具有微细孔道的过滤介质,在过滤介质的两侧压强不同,此压差即为过滤的推动力。废水在推动力作用下通过微细孔道,而微粒物质及胶状物质则被介质阻截而不能通过。介质截留的颗粒物质本身同样起过滤介质的作用,将此称为滤层或滤饼。随着过程进行,滤层逐渐增厚,水流的阻力也将增加,使水流量下
关于沉淀重量法的基本介绍
沉淀法是重量分析法中应用最广泛的一种方法,这种方法是以沉淀反应为基础,将被测组分转化成难溶化合物沉淀下来,再将沉淀过滤、洗涤、烘干或灼烧,最后称量沉淀的重量。根据沉淀的重量算出待测组分的含量。气化法是通过加热或在试样中加入一种适当的试剂与试样反应,使待测组分转化成挥发性产物,以气体形式排出,然后
关于溶胶凝胶法的基本介绍
1846年,法国化学家J.J.Ebelmen发现正硅酸酯在空气中水解时会形成凝胶,从而开创了溶胶-凝胶(Sol-Gel)化学的新纪元。所谓溶胶-凝胶法是以金属烷氧化物为先驱体,通过这种先驱体的水解与缩醇化反应形成溶胶,最后通过缩聚反应形成凝胶制品的一种方法。这是一种制备金属氧化物材料的湿化学方法
关于电解重量法的基本介绍
电解法又称电重量法。重量分析法的全部数据都是由分析天平称量获得的,不需要基准物质或标准溶液进行比较。由于称量误差一般很小,如果分析方法可靠,操作细心,对常量组分的测定,通常能得到准确的分析结果,测定的相对误差一般不大于0.1%。但重量法操作繁琐,分析周期长,且不适用于微量分析和痕量组分的测定,因
关于吸附层析法的基本介绍
吸附层析法是运用较多的一种层析方法,是化学实验中常用的分离方法。特别适用于很多中等分子量的样品(分子量小于1,000的低挥发性样品)的分离,尤其是脂溶性成分一一般不适用于高分子量样品如蛋白质、多糖或离子型亲水住化合物等的分离。吸附层析的分离效果,决定于吸附剂、溶剂和被分离化合物的性质这三个因素。
关于物理转染法的基本介绍
①显微注射 ②电穿孔 ③基因枪 显微注射虽然费力,但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物,但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲
关于液体发酵法的基本介绍
液体发酵法是借助于液体介质来完成面团的发酵,即先将酵母置于液体介质中,在液体中经几个小时的繁殖,制成发酵液,然后用发酵液与其他原辅料搅拌成面团。 工艺流程:原料混合→液体发酵→热交换器→冷藏贮存→搅拌→延续发酵→整形→醒发→烘烤→冷却→包装。液体发酵有两种形式:无面粉发酵液和含面粉发酵液。无面
关于气化重量法的基本介绍
气化重量法是用适当的方法使待测组分从试样中挥发逸出后。再根据试样质量的减少值或吸收待测组分的吸收剂质量的增加值来计算该组分含量的方法。例如,测定某纯净化合物结晶水的含量,可以加热烘干试样至恒重,使结晶水全部气化逸出,试样所减少的质量就等于所含结晶水的质量。又如.测定某试样中CO2的含量,可以设法
关于纸层析法的基本介绍
纸层析法又称纸色谱法,是用纸作为载体的一种色谱法,其应用的原理是相似相溶原理,是通过分裂系的在同一介质中分散速度不同来分析的。 通常可用于叶绿素的色素成分检验,氨基酸的鉴定及测定,橘皮精油成分检验及一些特定细胞筛查等实验。
关于DNA印迹法的基本介绍
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤
关于吸附色谱法的基本介绍
吸附色谱法是指利用吸附性的不同而进行的色谱分离和分析的方法,它是基于在溶质和用作固定固体吸附剂上的固定活性位点之间的相互作用来达到提取和分离的目的的。 液固色谱的固定相是固体吸附剂。吸附剂是一些多孔的固体颗粒物质,位于其表面的原子、离子或分子的性质是不同于在内部的原子、离子或分子的性质的。表层
关于巩膜检查法的基本介绍
巩膜检查法是眼检查中的一小部分,通过观察巩膜颜色来诊断眼睛疾病,这对临床有非常大的意义。 一般表层巩膜炎极少侵犯巩膜组织,巩膜炎则侵犯巩膜本身。巩膜炎多好发于血管穿过巩膜的前部巩膜,而伴于赤道后部的巩膜炎,因不能直接见到及血管少,发病亦少,容易被忽略。巩膜炎依部位可分为前巩膜炎及后巩膜炎。前巩
关于电泳法的基本信息介绍
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。
关于电阻测量法的基本介绍
利用仪表测量控制电路上某点或某个元器件的通、断情况,来确定电气故障断的方法,主要利用万用表的电阻档对控制电路的好坏进行判断,可分为电阻分阶测量法和电阻分段测量法。 一、电阻测量法的分阶测量法 电阻分阶测量法就是将万用表的一支表笔固定接触在控制电路的一端(一般为0号线端),另一支表笔逐阶测量其
关于糖类分类法的基本介绍
糖类的另一个名称“碳水化合物”的由来是生物化学家在先前发现某些糖类的分子式可写成Cn(H2O)m,故以为糖类是碳和水的化合物,但是后来的发现证明了许多糖类并不合乎其上述分子式,如:鼠李糖(C6H12O5)。而有些物质符合上述分子式但不是糖类,如甲醛(CH2O)等。碳水化合物只是糖类的大多数形式。
关于稀释法药敏试验的基本介绍
稀释法药敏试验是指将一定浓度的抗菌药物按照指南进行稀释后与肉汤或琼脂混合制成培养基,再接种受试菌株,经孵育培养后观察细菌生长情况,进行药敏结果分析。此法较少应用于临床检测,多用于罕见耐药的调查。在肉汤或琼脂中将抗菌药物进行一系列(对倍)稀释后,定量接种待检菌,35摄氏度孵育24小时后观察。抑制待
关于放射色谱法的基本介绍
放射色谱法是指通过吸附或分配色谱过程进行分离放射性物质的方法。分离后的组分用放射性检测器测其在衰变过程中放射出的正电子(β+)、电子(β-)或γ射线来鉴定其元素组成。放射色谱法按固定相使用方式的不同,可分为柱色谱法、纸色谱法和薄层色谱法等。词条详细介绍了各种色谱法的原理、操作、应用等详情。
关于伏安法的基本信息介绍
伏安法是一种电化学分析方法,根据指示电极电位与通过电解池的电流之间的关系,而获得分析结果。是一种较为普遍的测量电阻的方法。因为是用电压除以电流,所以叫伏安法。 伏安法(又称伏特测量法、安培测量法)是一种较为普遍的测量电阻的方法,通过利用:R=U/I来测出电阻值。因为是用电压除以电流,所以叫伏安
关于交流极谱法的基本介绍
古典极谱法的特点之一就是极谱池上的电压是恒定的(或变化极慢)。我们可称之为直流极谱法(简写DCP)。另一类方法是研究当电压或电流随时间而变化,极谱池上电压、电流和时间的关系,称为交流极谱法(alternating current polarography,简写ACP)。 说明:一种控制电位 极
关于硅胶柱层析法的基本介绍
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
关于压榨法的基本信息介绍
压榨法是利用螺旋压榨机依靠旋转的螺旋体在榨笼中的推进作用,使果皮不断被压缩,果皮细胞中的精、油被压榨出来,再经淋洗和油水分离、去除杂质。 压榨取油为借助机械力的作用,将油脂从油料中挤压出来的取油方法。按压榨取油的深度以及压榨时榨料所受压力的大小,压榨油可分为一次压榨和浸出取油配合的预榨。压榨取
关于角膜照影法的基本介绍
角膜照影法是针对暴露性角膜炎治疗的其中一种方法,暴露性角膜炎(exposure keratitis)常见于睑裂闭合不全的各种病变,致角膜暴露及瞬目运动障碍,泪液不能正常湿润角膜而发生角膜上皮损伤。 1、正常值 : 病变范围多位于下1/3的角膜。初期角膜及结膜上皮干燥、粗糙,暴露部位的结膜充血
关于法布里病的基本介绍
法布里病是α-半乳糖苷酶A(α-Gal A)的基因突变导致的X染色体遗传性多系统溶酶体贮积病。男性新生儿发病率为1/110000~1/40000。男女均受累,多在儿童至青少年时期发病,女性症状通常较男性轻。 法布里病是由于编码α-半乳糖苷酶A的基因突变,导致其编码的α-半乳糖苷酶A功能部分或全
关于吸附法的基本内容介绍
吸附就是固体或液体表面对气体或溶质的吸着现象。由于化学键的作用而产生的吸附为化学吸附。如镍催化剂吸附氢气,化学吸附过程有化学键的生成与破坏,吸收或放出的吸附热比较大,所需活化能也较大,需在高热下进行并有选择性。物理吸附是由分子间作用力相互作用而产生的吸附。如活性炭对气体的吸附,物理吸附一般是在低
关于溶剂法的基本内容介绍
溶剂法亦称共沉淀法。将药物与载体材料共同溶解于有机溶剂中,蒸去有机溶剂后使药物与载体材料同时析出,即可得到药物与载体材料混合而成的共沉淀物,经干燥即得。常用的有机溶剂有氯仿、无水乙醇、95%乙醇、丙酮等。本法的优点为避免高热,适用于对热不稳定或挥发性药物。可选用能溶于水或多种有机溶剂、熔点高、对
关于溶出伏安法的基本介绍
溶出伏安法又称反向溶出极谱法,这种方法是使被测的物质,在待测离子极谱分析产生极限电流的电位下电解一定的时间,然后改变电极的电位,使富集在该电极上的物质重新溶出,根据溶出过程中所得到的伏安曲线来进行定量分析。 若应用阴极溶出反应,成为阴极溶出伏安法(cathodic stripping volt