关于MaxamGilbert法的简介
Maxam-Gilbert的化学断裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既适用于双链DNA,也适用于单链DNA。它的基本原理是利用几个具有碱基专一性的化学切断反应将单个末端被32P标记的DNA分子进行部分切断,产生几组从标记末端到与碱基专一性反应相应的那种碱基在DNA中每个位点的长短不同的片段,这几组片段在凝胶电泳中并排着按链长被分开,对凝胶进行放射自显影后就可以得到代表每个碱基位置的带谱,从这个带谱可以直接读出从标记末端向另一个末端方向的碱基序列。......阅读全文
关于MaxamGilbert法的简介
Maxam-Gilbert的化学断裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既适用于双链DNA,也适用于单链DNA。它的基本原理是利用几个具有碱基专一性的化学切断反应将单个末端被32P标记的DNA分子进行部分切断,产生几组从标记末端到与碱基专一性反应相应的那种碱基在DNA中每个位点的长短不同的片段
关于MaxamGilbert法的基本介绍
Maxam-Gilbert的化学断裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既适用于双链DNA,也适用于单链DNA。它的基本原理是利用几个具有碱基专一性的化学切断反应将单个末端被32P标记的DNA分子进行部分切断,产生几组从标记末端到与碱基专一性反应相应的那种碱基在DNA中每个位点的长短不同的片段
关于MaxamGilbert法研究进展介绍
核酸的一级结构的阐明,对于了解基因的结构、调控和表达有着重要的意义。sanger和Coulson建立的加减法和Maxam和Gilbert建立的化学断裂法使DNA序列分析技术有了革命性的突破。以后sanger等人又发展了双脱氧核苷酸末端终止法,M13单链噬菌体克隆技术的建立使利用该法测定DNa序列
DNA测序——MaxamGilbert化学修饰法
实验方法原理用化学试剂 处理具有末端放射性标记的DNA片段 ,造成碱基的特异性切割并产生一组具有不同长度的DNA链降解产物,经凝胶电泳分离和放射自显影后,可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。实验材料DNA试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材电泳仪实验步骤一、取待测DNA片段,既可以是单链也可以是双链。 此
DNA序列测定技术(Sanger双脱氧链终止法与Maxam-Gilbert-...
选择随机定向测定策略的影响因素(1)计算设备 任何大规模的测序计划将在很大程度上依赖计算机程序对原始序列资料进行分类、整理和排列(Staden,1986)。在权衡随机法的利与弊之时,必须将与适当的计算机设备进行联机的问题放到压倒一切的位置上来考虑。如果这些设备尚无从适当的计算机设备进行联机的问题
概述MaxamGilbert的操作方法
由于凝胶电泳分辨率的限制,必须将DNA分子用限制性内切酶切割成数百个核苷酸长的片段,从这些片段的序列组建成整个DNA分子的序列。为此必须先建立DNA的限制性内切酶图谱。 在进行酶图分析时,通常先测定切点较少的酶的位点,然后再测定切点较多的酶的位点。内切酶切点出现的频率一般可根据内切酶识别序列的
关于水热法的简介
水热法是19 世纪中叶地质学家模拟自然界成矿作用而开始研究的。1900 年后科学家们建立了水热合成理论,以后又开始转向功能材料的研究。目前用水热法已制备出百余种晶体。水热法又称热液法,属液相化学法的范畴。是指在密封的压力容器中,以水为溶剂,在高温高压的条件下进行的化学反应。水热反应依据反应类型的
关于溶胶凝胶法的简介
溶胶-凝胶法就是用含高化学活性组分的化合物作前驱体,在液相下将这些原料均匀混合,并进行水解、缩合化学反应,在溶液中形成稳定的透明溶胶体系,溶胶经陈化胶粒间缓慢聚合,形成三维网络结构的凝胶,凝胶网络间充满了失去流动性的溶剂,形成凝胶。凝胶经过干燥、烧结固化制备出分子乃至纳米亚结构的材料。
关于荧光分析法的简介
荧光分析法是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态,激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的
关于快速测试片法的简介
随着国内市场和进出口贸易对食品安全的重视,食品的微生物检测技术也面临着更大的压力。传统检测方法非常繁琐,需要耗费大量的人力物力,而且检测周期长、灵敏度相对较低,难以满足国内外对食品安全检测的要求。为此,人们相继提出了一系列简便、快捷、敏感、准确的检测新思路,快速测试片法是近年来不断取得进展的一种
关于吸附色谱法的简介
吸附色谱法的固定相为吸附剂,色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的,不进入固定相的内部。与气相色谱不同,流动相(即溶剂)分子也与吸附剂表面发生吸附作用。在吸附剂表面,样品分子与流动相分子进行吸附竞争,因此流动相的选择对分离效果有很大的影响,一般可采用梯度淋洗法来提高色谱分离效率。 在聚合物的分析中
关于滴定分析法的简介
滴定分析法,是化学分析法的一种,将一种已知其准确浓度的试剂溶液(称为标准溶液)滴加到被测物质的溶液中,直到化学反应完全时为止,然后根据所用试剂溶液的浓度和体积可以求得被测组分的含量,这种方法称为滴定分析法(或称容量分析法)。
关于放射色谱法的简介
色谱法过去称色层法或层析法,最早是于1903年由俄国植物学家M.S.Tswett发现的。 色谱法是利用混合物中各组分在固定相和流动相中亲和力的差异使各组分在两相之间分配不同来实现彼此分离的一种方法。 色谱法的分类 按流动相物态的不同,可分为气相色谱法和液相色谱法(流动相为液体)。 按分离
关于液相色谱法的简介
液相色谱法就是用液体作为流动相的色谱法。1906 年俄国植物学家茨维特(M.S.Tswett)将植物色素提取液加到装有碳酸钙微粒的玻璃柱子上部,继而以石油醚淋洗柱子,结果使不同的色素在柱中得到分离而形成不同颜色的谱带,每个色带代表不同的色素。从此,这类方法均称为色谱法。随着色谱技术的发展,色谱法
关于浓缩采样法的简介
室内空气中的污染物质浓度一般都比较低,虽然测试技术有很大的进展,出现了许多高灵敏度的自动测定仪器,但是对许多污染物质来说,直接采样法远远不能满足分析的要求,故需要用浓缩采样法对室内空气中的污染物进行浓缩,使之满足分析方法灵敏度的要求。另一方面,浓缩采样法时间一般比较长,测得结果代表采样时段的平均
关于盐水配血法的简介
盐水配血法是临床上常用的一种交叉配血方法。优点:简单快捷。缺点:只能检出不配合的完全抗体,不能检出不配合的不完全抗体,且安全性较低 盐水配血法是临床上常用的一种交叉配血方法。 优点:简单快捷。 缺点:只能检出不配合的完全抗体,不能检出不配合的不完全抗体,且安全性较低 [1]。
关于交流极谱法的简介
将一个小振幅(几到几十毫伏)的低频正弦电压叠加在直流极谱的直流电压上面,通过测量电解池的支流电流得到交流极谱波 ,峰电位等于直流极谱的半波电位E1/2,峰电流 ip与被测物质浓度成正比。该法的特点是: ①交流极谱波呈峰形 ,灵敏度比直流极谱高 ,检测下限可达到10-7mol/L。 ②分辨率高
关于生物膜法的简介
生物膜法,是与活性污泥法并列的一类废水好氧生物处理技术,是一种固定膜法,是污水土壤自净过程的人工化和强化,主要去除废水中溶解性的和胶体状的有机污染物。处理技术有生物滤池(普通生物滤池、高负荷生物滤池、塔式生物滤池)、生物转盘、生物接触氧化没备和生物流化床等。
关于水蒸气蒸馏法的简介
水蒸气蒸馏法是指将含挥发性成分药材的粗粉或碎片,浸泡湿润后,直火加热蒸馏或通入水蒸汽蒸馏,也可在多能式中药提取罐中对药材边煎煮边蒸馏,药材中的挥发性成分随水蒸气蒸馏而带出,经冷凝后收集馏出液,一般需再蒸馏1次,以提高馏出液的纯度和浓度,最后收集一定体积的蒸馏液;但蒸馏次数不宜过多,以免挥发油中某
关于比浊法的应用简介
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。 这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光
关于伏安法测电阻的简介
伏安法测电阻是使用电流表和电压表直接测量导体电阻的常见方法,大致分为两种,电流表内接和电流表外接。 一、伏安法测电阻的实验原理: 欧姆定理或由I=U/R,得R=U/I 电阻=电压除以电流 R为导体的电阻(单位欧姆Ω) U为导体两端的电压(单位伏特V) I为通过导体的电流(单位安培A)
关于旋光法的原理简介
利用物质的旋光性质测定溶液浓度的方法。许多物质具有旋光性(又称光学活性),如含有手征性碳原子的有机化合物。当平面偏振光通过这些物质(液体或溶液)时,偏振光的振动平面向左或向右旋转,这种现象称为旋光。偏振光旋转的角度称为旋光度,旋转的方向与时针转动方向相同时称为右旋,以“+”号表示;如与之相反,则
关于文拉法辛的简介
文拉法辛(Venlafaxine)为苯乙胺衍生物,是二环类非典型抗抑郁药。本品及其活性代谢物O-去甲基文法拉辛(ODV)能有效低拮抗5-HT和NA的再摄取,对DA的再摄取也有一定的作用,具有抗抑郁作用。镇静作用较弱。口服吸收良好,进食不影响药物的吸收。在肝脏内广泛代谢,主要代谢产物是ODV,并主
关于液态深层发酵法的简介
液态深层发酵法制醋是较为先进的技术,其特点是发酵周期短、劳动生产率高、劳动强度低、占地面积少、不用填充料等。它使我国古老的酿醋工业朝着机械化、管道化生产方向前进了一大步,为实现食醋生产自动化创造了条件,也使我国发酵醋酸技术跟上了国际先进水平。但由于酿醋周期短,风味欠佳,作为调味品食醋尚有不足。
关于平板菌落计数法的方法简介
但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果准确度往往偏低。为了清楚地阐述平板菌落计数的结果,已倾向使用菌落形成单位(cfu :colony-forming units),而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
关于高效液相色谱法的简介
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混
关于示波极谱法的简介
示波极谱法是一种快速加入电解电压的极谱法。常在滴汞电极每一汞滴成长后期,在电解池的两极上,迅速加入一锯齿形脉冲电压,在几秒钟内得出一次极谱图,为了快速记录极谱图,通常用示波管的荧光屏作显示工具,因此称为示波极谱法。
关于体液免疫检测法的简介
体液免疫检测法是检测体液免疫功能的技术。分为体外检测和体内检测。体外体液免疫检测法包括抗原抗体反应、体液中各种可溶性免疫因素测定,体内检测为体液免疫测定技术。
关于层析分离法的简介
层析分离法,简称层析法,亦称色谱层析法、色谱法、色层法。是利用样品中各组分的物理、化学性质的质的差别,使各组分以不同程度分布在两个相中,其中一个相为固定的(称为固定相),另一个相则流过此固定相(称为流动相)并使各组分以不同速度移动,从而达到分离的方法。层析法和其他分离方法比较,具有分离效率高,操
关于方波极谱法的简介
在通常的、缓慢改变的直流电压上面,叠加上一个低频率、小振幅(≤50毫伏)的方形波电压,并在方波电压改变方向前的一瞬间记录通过电解池的交流电流成分的极谱法和伏安法,是电化学分析法之一,也是极谱法中灵敏度较高者。在合适的情况下,测定的最低浓度可达10-7Μ,个别离子的检出限可达10-3Μ。 195