一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。 5%脱脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或者RT封闭）封闭1小时。弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。 3. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。4. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。5. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。6. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。7. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色......阅读全文
一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求
一抗孵育温度有几种：4度、室温、37度，其中4度效果最佳；孵育时间与温度、抗体浓度有关，一般37度1-2h，4度过夜（从冰箱拿出后37度复温45min）。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h，浓度一般有工作液，若是浓缩液还要摸索浓度。
免疫组化中，一抗、二抗的制备方法
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以
western－blot－二抗时间要多久
37度1h，二抗浓度不要过高，否则，背景颜色太深，还可能出现非特异条带。
荧光二抗488用什么稀释
含2.5％BSA和0.5％triton的PBS溶液。荧光二抗488用含2.5％BSA和0.5％triton的PBS溶液稀释二抗，室温避光孵育2小时。荧光二抗通常指代的就是带荧光团标记的二抗，这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。
western－blot－二抗时间要多久
一般是室温下一个小时即可。也可适当长些时间！
选择合适的二抗，不再纠结
当你徘徊在如何选择二抗，或不知怎样选择最合适的二抗时，你的眼神告诉我，你纠结了，但是这不是你的错。而当看完以下内容，你将不会再纠结，否则，那将是我的错。1. 弄清一抗的宿主物种是什么二抗指向一抗的物种。如果使用来源于兔的一抗，则需要来源于除兔以外的其它物种的抗兔二抗。例如山羊多克隆抗兔IgG 二抗可
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抗磷脂抗体与病态妊娠（二）
APL筛查的临床意义很多研究证实，APL检测阳性与产科中很多病症相关，如反复流产、先兆子痫、妊高症、早产、宫内生长迟缓和宫内死胎/死产等。反复流产2次或2次以上自然流产的发生率为5%。在已知原因中，自身免疫（如APS）导致的反复流产比例最高。反复流产妇女中APL阳性率（20%）远远高于正常产妇（5%
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荧光二抗488用什么稀释
含2.5％BSA和0.5％triton的PBS溶液。荧光二抗488用含2.5％BSA和0.5％triton的PBS溶液稀释二抗，室温避光孵育2小时。荧光二抗通常指代的就是带荧光团标记的二抗，这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。
免疫荧光染色的一抗，二抗分别用什么稀释
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释，再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了，用培养液没什么意义，只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下，有很多protocol。一般一比几百到一万都有，依抗体而定。可以4度过夜，这样染色效果
荧光二抗如何选择更好根据一抗种属及类型
荧光二抗如何选择更好-根据一抗种属及类型二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合
免疫荧光染色的一抗，二抗分别用什么稀释
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免疫荧光的一抗核二抗分别用什么稀释
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山羊抗兔二抗（HRP标记）在诸多文献中的应用
在免疫学实验中，比如WB，IHC，IF等，大家都知道选着好正确的一抗，往往实验就成功了一大半，因此，往往很多研究者便会忽视对二抗，以及其它试剂盒品质的追求。二抗是一种相对而言比较稳定的产品，包装大，因此很多实验室都会公用一个二抗。但如果二抗没有选择好的话，影响的可能就是一整个实验室或者课题组了。艾美
免疫荧光染色的一抗，二抗分别用什么稀释
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做wb时，一抗和二抗浓度是怎么确定的
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态
免疫荧光染色的一抗，二抗分别用什么稀释
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免疫组化中一抗与二抗有什么要求
比如一抗是鼠抗人，二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊，兔，马等。一抗是单抗，二抗是多抗，是抗一类同种异型的Ig，带有特殊的可产生发光现象的标记。条件允许尽量选择进口，一抗abcam，Santa，CST等值得信赖，二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位，那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的
做wb时，一抗和二抗浓度是怎么确定的
一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；二抗的用量，和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态
elisa二抗孵育过夜影响结果吗
孵育过夜一般多见于封闭液。二抗孵育过夜比较少见。因为二抗中酶的活性可能容易受到影响，并且如果在二抗孵育阶段有微生物滋生，后续洗涤步骤少，容易干扰显色。
WB检测中二抗的选择方法
WB检测之二抗二抗选择二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体，选择范围较窄，基本是商品化的，在不考虑二抗修饰类型的前提下，二抗的选择需要遵循以下原则：二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X，选择了鼠抗X一抗，则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗选择要考虑的问