更轻松的液相方法开发（三）探索寡核苷酸反相离子对分析方法开发（上）
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反相高效液相层析实验
多肽和蛋白质的分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
反相高效液相色谱6
方案6 计算机辅助方法优化梯度条件的 RP-HPLC 蛋白质分离实验实验材料HPLC 肽标准品蛋白质样品试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）磷酸磷酸二氢钠硫脲硝酸钠三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、配制流动相以
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品（如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的，质量在 30~5
反相高效液相色谱5
方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合物进行脱盐实验实验材料蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）2 -丙醇硝酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、流动相的配制1.配制缓冲液 A(弱流
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级）三氟乙酸（TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色谱的原理
在反相液相色谱中，固定相的极性小于流动相，洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性，疏水性强的保留时间长！
高效液相色谱仪分析开发流动相调整的三个原则
高效液相色谱仪分析与开发流动相调整的三个原则是从强到弱、三重规则和精细调整。一、由强到弱：一般使用90英寸的乙腈或甲醇水或缓冲溶液进行测试。可以快速得到分离结果，并根据峰值调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。二、三倍规则：对于有机溶剂（乙腈或甲醇）的量每减少10％，保留因子增加约3倍，这是三倍规则。调
液相色谱仪分析开发中流动相调整的三个原则
液相色谱仪分析开发中流动相调整的三个原则是由强到弱、三倍规则和粗调转微调。一、由强到弱：一般先用90%的乙腈或甲醇－水或缓冲溶液进行试验，可很快得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。二、三倍规则：每减少10%的有机溶剂（乙腈或甲醇）的量，保留因子增加约3倍，此为三倍规则。
UPLC/MS/MS测定肉类和乳品中的氨基糖苷类抗生素（二）
样品制备萃取缓冲液 (10 mM NH4OOCH3/0.4 mM Na2EDTA/1% NaCl/2% TCA):将0.77 g乙酸铵(NH4OOCH3)置于1L的容量瓶中。加入大约900 mL试剂水，溶解。使用1 N HCl或1 N NaOH将pH值调节至4.0。加入0.15 g乙二胺四乙酸二
乳制品中核苷酸分析
乳粉中添加尿苷酸（UMP）、胞苷酸（CMP）、腺苷酸（AMP）、鸟苷酸（GMP）、肌苷酸（IMP）等多种核苷酸，用来提高婴儿的免疫调节功能和记忆力。 核苷酸分析目前存在的挑战：由于核苷酸极性很大，用反相色谱柱很难达到很好的保留和分离，所以为了提高核苷酸的保留往往会尝试离子对色谱方法，离子对色谱方法存
UPLC/MS/MS测定肉类和乳品中的氨基糖苷类抗生素
氨基糖苷类抗生素会作为兽药被用于治疗产肉和产乳动物，因此需要一种分析其在这些商品中残留的有效分析方法。这类抗生素给残留分析提出了巨大的挑战。与其他大多数抗生素不同，这些化合物无法使用乙腈或其他有机溶剂从组织或乳品中萃取出来。在研究中，使用含有三氯乙酸(TCA)的水性缓冲液将氨基糖苷类抗生素从肉类
气相色谱故障分析方法(三)
故障分析方法(三) ▲GC故障的种类： 气路部分故障：气体输入不正常、气体品种不对或纯度不够、气路泄漏、气路堵塞、气路污染、气路部件故障、流量设置不正常、色谱柱问题、等等。 主机电路部分故障：启动或初始化不正常、温度控制部分故障、键盘或显示部分故障、开关门不正常、点火不正常、电流设置不正常、量
中国积极探索马铃薯主食产品开发
“马铃薯主粮化不是说天天吃炒土豆、炖土豆、蒸土豆，而是用马铃薯全粉加工成馒头、面条等主食，这意味着马铃薯也能当‘饭’吃了。所以，马铃薯全粉生产是主食化的关键一环。”河北省张家口市张北县，在马铃薯行业打拼多年的何明告诉记者。 ２０１５年８月，中国农业部在全国９个省（市）开展马铃薯主食产品开发试
探索矿产资源开发保护新模式
国务院关于《全国矿产资源规划（2016—2020年）》的批复中明确提出，“以保障资源安全为目标，以提升矿业发展质量和效益为中心，强化资源保护和合理利用，正确处理政府与市场、当前与长远、局部与整体、资源与环境、国内市场与国际市场的关系，推进供给侧结构性改革，优化资源开发保护格局，加快矿业绿色转型升
生物制药开发早期的粘度测量新方法概述（三）
结论 生产高浓度、低粘度的生物治疗制剂是当今医药行业所面临的主要挑战之一。本文所介绍的这种新技术将紫外区域成像与微毛细管粘度计相结合，提供了有效的高通量技术，可在配方浓度下对极少量的未改性样品进行非破坏性分析，从而为生物制药开发提供有力支持。这就使制药厂商得以在药物开发早期阶段筛选候选药物时就能确定
寡核苷酸连接分析的技术方法
中文名称寡核苷酸连接分析英文名称oligonucleotide ligation assay定 义一种测定等位基因单碱基突变的方法，用以确定基因是正常(野生型)还是缺陷(突变型)的。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数，能提
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。 1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板
乳制品中核苷酸分析
乳粉中添加尿苷酸（UMP）、胞苷酸（CMP）、腺苷酸（AMP）、鸟苷酸（GMP）、肌苷酸（IMP）等多种核苷酸，用来提高婴儿的免疫调节功能和记忆力。 核苷酸分析目前存在的挑战：由于核苷酸极性很大，用反相色谱柱很难达到很好的保留和分离，所以为了提高核苷酸的保留往往会尝试离子对色谱方法，离子对色谱方法存
多肽分析过程中常见问题解读
小分子越来越难做，大分子发展很强势，似乎成为了近年来药物研发市场的重要表现之一，“多肽”类药物正是其中的一大热门。目前多肽药物的质量监管日趋渐严，在这种趋势下，寻找能满足更高分离度，灵敏度的分析方法就显得尤为重要。很多小伙伴在在开发多肽类样品分析方法中总是遇到各种的问题，无比烦恼。这里小编就总结了一
反相离子对色谱仪常用离子对试剂
反相离子对色谱仪离子对试剂种类决定于被测样品的性质，通常选用与被测样品电荷相反的离子对试剂。一、离子对试剂：烷基磺酸盐，如庚烷磺酸盐和樟脑磺酸盐等。主要应用对象：强碱、弱碱、儿茶酚铵和肽类。二、离子对试剂：烷基磺酸盐，如辛基和十二烷基磺酸盐等。主要应用对象：强碱、弱碱、儿茶酚铵和肽类。三、离子对试剂
液相色谱柱平衡慢的解决办法
液相色谱柱缓慢平衡的常见原因是新旧流动相组分的吸附强度差异很大从一种方法到另一种方法进行特殊的分析或改变需要很长时间。特殊方法可以考虑特殊列。不使用时，可以移除色谱柱，填充适当的溶剂或流动相，密封保存，不进行其他分析。胺改性剂胺改性剂如三乙胺通常添加到反相或离子对流动相，以减少样品中破碎组分的尾随通
液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有高效、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 在检测
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
残留溶剂及其气相分析方法的开发经验谈
前言：化学合成药物中不可避免地会使用有机溶剂，但工艺中有的有机溶剂并不能完全去除掉，这些残留溶剂对人体健康和环境又有可能造成损害，国际协调大会（ICH）对残留溶剂的分类和限量都做了规定，详见公众号转载的文章“ICH常用有机溶剂分类及残留限度”。对于溶剂残留的检测首先要明确可能会有的残留溶剂，这些溶剂
反相液相色谱与正相液相色谱分析时,出锋顺序如何
常见物质官能团的极性顺序：烷基〈卤素〈（F〈 Cl〈 Br〈 I ）〈醚〈硝基〈睛〈叔胺〈酯〈酮〈醛〈醇〈酚〈伯胺〈酰胺〈羧酸〈磺酸。在反相液相色谱法中，物质极性强的先出峰，极性弱的后出峰，在正相色谱中相反，物质极性强的后出峰，极性弱的先出峰。
反相高效液相色谱柱的保护要怎么做
反相高效液相色谱柱的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。 选择合适的色谱柱可以缩短方法开发时间，并使开发的方
HPLC的应用以及方法开发（2）
9.了解系统的滞后体积(梯度); 具体操作步骤： (一)选择HPLC检测器： 对样品有响应并有一个输出信号; 应该提供在检测器响应值与样品浓度之间的线性关系并且所设计的校正技术应该促进这种关系; 但是： 由于受HPLC系统其他部件的影响会产生响应与
HPLC的应用以及方法开发（1）
据2004年数据统计，世界上化合物总数多达4700多万种; 在全部有机化合物中仅有20%左右的样品适用于GC分析; 而HPLC可对80%左右的有机化合物进行分离和分析; HPLC特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物质的分离和分析并且可以做制备