更轻松的液相方法开发（三）探索寡核苷酸反相离子对分析方法开发（上）
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反相高效液相色谱
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合
高效反相液相色谱
实验方法原理反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级） 三氟乙酸（TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。（1）线性梯
何谓反相液相色谱
液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相，就称为正相；如果采用相对非极性固定相和极性流动相，则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留，所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反，反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。正相色谱的流出顺序是极性
高效反相液相色谱
实验方法原理 反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高
双三元液相解决饲料维生素检测难问题
食品中添加剂检测前处理过程十分繁琐，之前介绍过食品中维生素ADE的方法，通过双三元液相全自动在线二维分析技术，可以省去繁重的离线制备过程，分析效率得以飞速提升[1]。此次赛默飞针对低含量VB12添加的饲料检测，同样轻松应对难题，解放双手，工作效率倍增。 饲料维生素检测难点 现行有效的国标
方法开发从何开始？（一）
如何更有效地进行液相方法开发，除了准确地设立一个新方法的目标外，选择方法开发的起点也是一个重要因素。从“液相故障排除”的宗旨来讲，在方法开发过程中的许多选择会决定一些问题会在最终方法中碰到或者避免。所以，每一个特性参数需要根据方法开发中可能出现的问题及完整的方法进行优化。 在方法开发中的第
方法开发从何开始？（二）
表1和表2中的变量归类方式有点不一样。这里列出了一些变量的特性，可以帮我们来确定首先选择哪一个（类）的变量。我们详细地探讨一下溶剂强度，然后会简要提到表2中其它变量。因为如果能理解表2 中所列的内容的话，大多数的信息就很容易理解了。 溶剂强度（%B）：在方法建立过程中，色谱峰间距α的变化是一个希
三鹿事件：三聚氰胺检测方法汇总
三鹿奶粉事件沸沸扬扬，各地致病患儿的致命成分——三聚氰胺检测方法汇总 GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺 Spectra-Quad实现三聚氰胺含量在线检测 超高效液相色谱_电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺 反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量 高效液相色谱-二极管阵列法测定
将严谨的QbD引入分析方法开发之中（四）
让AQbD更加简便的工具 QbD、AQbD强调对过程的充分理解，而非简单着眼于适用特定样品种类的一系列条件。这种方法的潜在优势已经凸显，但是要获取更多的信息，需要进行更大规模的实验。因而能够缓解与本研究相关负担的工具，自然也就受到欢迎。图6：Mastersizer 3000测量管理器呈现分散趋势。图
将严谨的QbD引入分析方法开发之中（一）
由于QbD（质量源于设计）所蕴含的理念和技术逐渐成为制药行业的第二大基本原则，其应用领域也正日益扩展。而分析方法开发则是QbD当前的重点关注领域。分析方法的开发、验证和实施过程与产品开发极其相似，且可以从QbD所推崇的系统化的科学方法中获益。由于药物开发和制造离不开可靠的分析数据，这就迫切需要在分析
将严谨的QbD引入分析方法开发之中（二）
AQbD实际操作案例：开发活性成分的粒度测量方法。处理一项具体的分析案例有助于明确AQbD在实践中的应用。对微粉化活性药物成分粒径分布的测定及考察，旨在评估其是否适合下游工艺以及对于固体口服产品的生物利用度。在这种情况下，ATP是在过程中的某个定位点测定粒度分布的手段，保证足够的精确度，能确保该材料
沃特世新品－XBridge－HILIC－液相色谱柱
用于解决强极性化合物的色谱分离难题 6月18日，马萨诸塞州米尔福德–沃特世公司宣布 (WAT:NYSE)XBridge™ 分析色谱柱系列，将增加一个新成员-XBridge HILIC色谱柱。此产品能够有效地提高极性化合物的保留，而如果用传统反相色谱柱，则极性化合物保留很弱。现在全球的用户都可以从沃
高效液相色谱色谱条件的开发与优化
中国仪器仪表学会空中云课堂系列讲座——高效液相色谱色谱条件的开发与优化各有关单位： 为进一步提高广大科学技术人员的技术水平，掌握前沿的行业信息、了解最新的技术发展趋势，中国仪器仪表学会继续教育平台在这个特别的时期推出线上系列讲座，旨在搭建业内专家、科学技术人员、仪器仪表供应商共同参与的空中云课堂
静态顶空气相色谱方法开发的一般步骤
静态顶空是气相色谱常用的进样技术，通俗点来说就是将在瓶子里的样品上方得到平衡的气体直接进样，当然事实上没这么容易。本文主要说明静态顶空的色谱方法的开发步骤。 一、样品的处理 首先，与常规气相相近当然是确定如何处理样品。 待测组分是否有足够的挥发性？如果挥发性太低的话用什么方法可以增
成都生物所开发出用于快速分析的磁性固相萃取新方法
大豆所含的异黄酮类化合物作为天然雌激素对人体具有多项保健及治疗功效，其含量的多少是反映大豆及其相关产品品质的一个标准。目前，液态大豆制品中的大豆异黄酮类化合物含量测定的主流方法是先冷冻干燥成为固态样品后再进行后处理。这种方法的缺点明显，包括周期长、操作繁琐、能耗高、非选择性等;并且长时间的样品前
教你如何选择合适的液相色谱柱
液相色谱柱，是一种用于液体色谱分析仪器的部件。那么我们该如何的去选择液相色谱柱呢?下面我们就一起来看看吧。 在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等，液相色谱柱决定终分离效果，所以在选择色谱柱时候有必要考虑清楚自己的需求。 首先液相色谱柱目前来
反相离子对色谱仪的离子对试剂
反相离子对色谱仪的离子对试剂有季铵盐、叔铵、烷基磺酸盐、高氯酸和烷基磺酸盐等。一、季铵盐：如四丁基铵磷酸盐和溴化十六烷基三甲基铵等。主要用于强酸、弱酸、磺酸染料和羧酸的分离。二、叔铵：如三辛铵等。主要用于磺酸盐和羧酸等分离。三、烷基磺酸盐：如甲基、戊基、己基、庚基和樟脑磺酸盐等。主要用于强碱、弱碱和
反相离子对色谱仪的离子对试剂
反相离子对色谱仪的离子对试剂有季铵盐、叔铵、烷基磺酸盐、高氯酸和烷基磺酸盐等。一、季铵盐：如四丁基铵磷酸盐和溴化十六烷基三甲基铵等。主要用于强酸、弱酸、磺酸染料和羧酸的分离。二、叔铵：如三辛铵等。主要用于磺酸盐和羧酸等分离。三、烷基磺酸盐：如甲基、戊基、己基、庚基和樟脑磺酸盐等。主要用于强碱、弱碱和
三聚氰胺的样品制备及检测
三聚氰胺是一种重要的化工材料，本来与食品、饲料行业毫不相干，但是发生在美国的数起饲料致死宠物的事件使两者联系在一起。经过调查，发现这些进口饲料中含有一定浓度的三聚氰胺，对此，美国食品药品监督管理局（FDA）要求饲料厂商提供三聚氰胺的检测报告，因此，三聚氰胺事件也使得分析领域掀起了检测方法的开发
固相萃取技术在环境水质监测方法开发中的应用与方法
固相萃取技术是一种基于液固分离萃取的试样预处理技术!由液固萃取和柱液相色谱技术相结合而发展起来的%该技术通过颗粒细小的多孔固相吸附剂选择性地吸附溶液中的被测物质%被测物质被定量吸附后!用体积较小的另一种溶剂洗脱或用热解析的方法解析被测物质%在此过程中达到分离富集被测物质的目的!然后用
固相萃取技术在环境水质监测方法开发中的应用与方法
固相萃取技术是一种基于液固分离萃取的试样预处理技术!由液固萃取和柱液相色谱技术相结合而发展起来的%该技术通过颗粒细小的多孔固相吸附剂选择性地吸附溶液中的被测物质%被测物质被定量吸附后!用体积较小的另一种溶剂洗脱或用热解析的方法解析被测物质%在此过程中达到分离富集被测物质的目的!然后用适当的方法进行测
反相高效液相色谱2
方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一
反相高效液相色谱概述
结果与保留值之间的关系：利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数，Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析，得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系，其中极性氨基酸残基在2～20 氨基酸组成的肽中，可减少在柱上
反相高效液相色谱5
方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合物进行脱盐实验实验材料蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）2 -丙醇硝酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、流动相的配制1.配制缓冲液 A(弱流
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级）三氟乙酸（TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相层析实验
多肽和蛋白质的分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品（如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的，质量在 30~5
反相高效液相色谱6
方案6 计算机辅助方法优化梯度条件的 RP-HPLC 蛋白质分离实验实验材料HPLC 肽标准品蛋白质样品试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）磷酸磷酸二氢钠硫脲硝酸钠三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、配制流动相以
反相高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用1