寡核苷酸连接分析的技术方法

中文名称寡核苷酸连接分析英文名称oligonucleotide ligation assay定 义一种测定等位基因单碱基突变的方法,用以确定基因是正常(野生型)还是缺陷(突变型)的。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

寡核苷酸连接分析的技术方法

中文名称寡核苷酸连接分析英文名称oligonucleotide ligation assay定  义一种测定等位基因单碱基突变的方法,用以确定基因是正常(野生型)还是缺陷(突变型)的。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

连接扩增反应的技术方法

中文名称连接扩增反应英文名称ligation amplification reaction;LAR定  义采用两套互补引物,利用嗜中温DNA连接酶进行变性(100℃)和连接(30℃)的反复循环,是连接酶链反应的类似技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

基因的重组连接技术

DNA酶切片段的连接是分子生物学实验中又一关键技术,该技术是基因重组,基因改造的重要中间环节。两DNA片段相邻的5'磷酸和3'羟基间可由连接酶催化形成磷酸二酯键,这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA联接酶和T4DNA联接酶催化,但分子生物学实验中主要采用T4DNA联接酶,因该酶在

DNA片段的连接技术

一、目的与原理DNA酶切片段的联接是两DNA片段相邻的5‘磷酸和3’羟基间可有连接酶催化形成磷酸二酯键,这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶催化,但是分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。本实验拟通过T4DNA连接酶对酶切片断的连

寡核苷酸探针技术介绍

利用寡核苷酸探针可检测到靶基因上单个核苷酸的点突变。常用的寡核苷酸探针主要有两种:单一已知序列的寡核苷酸探针和许多简并性寡核苷酸探针组成的寡核苷酸探针库。单一已知序列寡核苷酸探针能与它们的目的序列准确配对,可以准确地设计杂交条件,以保证探针只与目的序列杂交而不与序列相近的非完全配对序列杂交,对于一些

DNA重组技术-连接

实验概要        体外连接获得重组分子,用于转化受体细胞。实验原理    质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段,  然后体外使

合成寡核苷酸探针的技术步骤

首先使支持物羟基化,并用光敏保护基团将其保护起来。每次选取择适当的蔽光膜(mask)使需要聚合的部位透光,其它部们不透光。这样,光通过蔽光膜照射到支持物上,受光部位的羟基解保护。因为合成所用的单体分子一端按传统固相合成方法活化,另一端受光敏保护基的保护,所以发生偶联的部位反应后仍旧带有光敏保护基团。

寡核苷酸探针的制备方法

寡核苷酸探针是人工合成的,与已知基因DNA互补的,长度可从十几到几十个核苷酸的片段。如仅知蛋白质的氨基酸顺序量,也可以按氨基酸的密码推导出核苷酸序列,并用化学方法合成。

热继电器的连接技术

  连接线  热继电器的连接线除导电外,还起导热作用。如果连接线太细,则连接线产生的热量会传到双金属片,加上发热元件沿导线向外散热少,从而缩短了热继电器的脱扣动作时间;反之,如果采用的连接线过粗,则会延长热继电器的脱扣动作时间。所以连接导线截面不可太细或太粗,应尽量采用说明书规定的或相近的截面积。

浅谈PCB连接的方法

PCB是电子产品的基本元器件,任何电子产品都需要PCB才能制成。那么,PCB在电子产品之中,必须要与其他器件相互连接在一起,这就是PCB的互连。总的来说,PCB的连接有三个方面:芯片到PCB、PCB内部、PCB与外部器件。一、芯片与PCB的互连芯片与PCB互连,存在的问题是互连密度太高,会导致PCB

DNA连接酶的连接方法有哪几种?

第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成

DNA重组技术:酶切、连接

实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。   5’…G↓A

半抗原——载体连接方法

1.半抗原与载体连接时,应选择合适的方法,结合方式的选择应考虑如下因素:  1)半抗原的溶解度和稳定性:在结合反应中应不导致半抗原活性的改变,同时也不能使载体变性至不溶解的程度。  2)结合键的位置:抗体对远离蛋白质联接点的半抗原部分有最好的特异性,故联接时应使联接键远离半抗原的决定簇。3)选择适合

ID连接裂纹的检测及定量技术

概述 按一般法规或规章要求,一旦检测出一个可疑的内孔表面(ID)相连的裂纹,则必须对它进行鉴定。初始过程通常包括使用与检测阶段相同的1.5、2.25或5MHz斜探头。进一步评估信号幅度、上升和降落时间、回波动态响应和脉冲持续时间,希望籍此能帮助确定该可疑信号是否来自内部相连几何体、沉头孔、根部或

ID连接裂纹的检测及定量技术

  概述   按一般法规或规章要求,一旦检测出一个可疑的内孔表面(ID)相连的裂纹,则必须对它进行鉴定。初始过程通常包括使用与检测阶段相同的1.5、2.25或5MHz斜探头。进一步评估信号幅度、上升和降落时间、回波动态响应和脉冲持续时间,希望籍此能帮助确定该可疑信号是否来自内部相连几何体、沉头孔、

用于表达监测的寡核苷酸分析实验1

用于表达监测的 mRNA 的扩增及其与寡核苷酸分析芯片的杂交 实验材料 样品 RNA 试剂、试剂盒 Superscript cDNA kit (Life Technologies)RNA 酶抑制剂制备对照转录池酚 氯仿 异戊醇乙酸铵乙醇10 X 转录缓冲液10 X rN

用于表达监测的寡核苷酸分析实验2

数据分析与处理以及数量评定实验步骤1.用 Affymetrix Gene Chip 软件进行最初的数据处理。通过检测图像像素值,此软件测定每种寡核苷酸探针的荧光强度从而计算出每种转录本的简化值。此简化值被称为「平均差异」,它通过确定某一特定转录本在所有引物对中的特异信号而得(即将某一特定转录本由完全

射频连接器的命名方法

介绍射频连接器的命名方法,通用射频连接器的主称代号采用国内、外通用的主称代号。特殊产品的主称代号由详细规范做出具体规定,如何规范的使用符号。射频连接器简称为:RF连接器,通常被认为是装接在电缆上或安装在仪器上的一种元件,作为传输线电气连接或分离的元件。它属于机电一体化产品。简单的讲它主要起桥梁作用。

常见的T载体及连接方法

T载体 是TA克隆载体的简称,就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。目前市场上常见的T载体 ,根据连接方法可以分成两种:方法1、以T4连接酶进行连接的方法,这种方法的载体 有P公司、T公司,可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的水平,转化子比较多,阳性率也不

细胞连接的连接方式介绍

细胞连接方式的例子在脊椎动物中,细胞连接可分为:紧密连接(Tight Junctions)使细胞非常紧密的相接,防止物质进出。例如皮肤细胞间的连接就是如此,以防止水分从汗腺流失。间隙连接(Gap Junctions)又称为通讯连接(Communicating Junctions),类似植物的原生质丝

微流控芯片连接方法

目前常用于制备微流控芯片的材料有单晶硅片、石英、玻璃和有机聚合物如PMMA、PDMS以及PC等。根据使用材质不同,微流控芯片主要分为硬质和软质芯片两大类,软质芯片主要指PDMS芯片,硬质芯片有聚合物芯片、玻璃芯片、硅衬底芯片等。不同的微流控芯片所对应的连接方式也有所不同。下面我们将分别讨论:1.PD

寡核苷酸的性质

寡核苷酸极易与它们的互补对链接。

微流控芯片的通用连接方法

  当使用钢针进行连接时,可能由于打孔质量的差异或者用户的不熟练导致劈孔,甚至引入各种碎屑,从而导致芯片堵塞;当使用粘接接头的方式进行连接时,粘接接头的使用增大了芯片进出口的面积,降低了芯片进出口可使用的密度,同时在粘接的过程中,需要等待较长的粘胶固化时间。为了防止以上问题,我们可以使用以下通用的连

微流控芯片的常见连接方法

微流控芯片分为硬质和软质芯片两大类,软质芯片主要指PDMS芯片,硬质芯片有聚合物芯片如PMMA芯片、PC芯片、COC芯片等、玻璃芯片、硅衬底芯片等。针对这些不同类型的芯片,其进出口的连接主要有四种方式:(1)PDMS芯片的钢针或毛细管的直接连接;(2)硬质芯片(包括玻璃芯片和聚合物芯片)的接头粘接;

英特尔发布高速连接技术“雷霆”

  据英国广播公司(BBC)2月24日报道,美国芯片制造商英特尔公司推出了新型高速连接技术雷霆(Thunderbolt),其理论最大数据传输速率可达10Gb/s,该技术有望给用户带来高速数据传输和高清屏幕显示。   雷霆技术即2009年英特尔发布的光锋(Light Peak)技术。

更轻松的液相方法开发(三)探索寡核苷酸反相离子对分析方法开发(上)

     本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。关于岛津      岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理     

更轻松的液相方法开发(四)探索寡核苷酸反相离子对分析方法开发(下)

        本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。关于岛津      岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理  

分析肾盂输尿管连接部梗阻的形成病因

  UPJO的确切病因尚不十分明确。引起UPJO的病因甚多,通过肉眼和光镜观察可将UPJO的病因归纳为3类:  1.管腔内在因素  管腔内的内在因素主要有肾盂输尿管连接部(UPJ)狭窄、瓣膜、息肉。其中,狭窄是UPJ梗阻的常见原因,主要表现为UPJ处肌层肥厚、纤维组织增生。狭窄段一般长约2cm,断面

连接酶链反应技术的研究与发展

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是Backman1997年为检出靶基因序列中的点突变而设计发明,并申报了ZL.1988年Landegren也进行了该项研究。1988年Backman等又因分离热稳定的连接酶,而申报ZL,1991年Backman和Barany分别用耐

寡核苷酸的优化设计

关键词:寡核苷酸;优化设计中图分类号:Q524     在核酸分子杂交、DNA序列测定和通过PCR放大DNA片段等实验中,都需要使用寡核苷酸作为探针或引物,而对这些反应的质量起最重要影响作用的,就是这些寡核苷酸探针或引物。用优化的寡核苷酸进行实验能够很快得到好的结果,而用不够合适的寡核苷酸时,常常得