十的三次方标准派生菌株如何稀释成十的二次方菌液
你先做一系列梯度稀释,然后取适当浓度的单位体积菌液涂板,培养,统计菌落数,这样可计算出准确的滴度。然后,再讲相应浓度菌液按你要求的滴度稀释即可。比如,你统计出一个梯度的菌液浓度为150cfu/ml,那么你拿这个菌液稀释1.5倍即可。稀释菌液要放到4℃保存。......阅读全文
抗菌血清的制备
实验概要本实验制备了抗菌血清。抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防
病原菌的分离鉴定及其疫苗的制备(3)
(二)疫苗制备1 .病原菌的扩大培养与分离液体培养:按配方配制 2216E 液体培养基,将培养基用 三角烧瓶分装并盖上棉塞后置 于高压蒸汽锅内, 121 ℃ 灭菌 15 ~ 30min ,冷却后于超净工作台内加入 1ml 左右预先制备的病原菌菌液,盖上棉塞,用摇床于 28~ 30 ℃ 下震荡(约
细菌多点接种仪的特点及技术参数
主要特点 1.种棒使用经特殊处理的不锈钢制成,由于专门的结构设计和特殊加工,消除了接种棒的疏水性并防止了采样时菌液滴落。 2,培养皿上的菌落位置很容易判定灭菌处理方法简单。 3.接种速度极快,减轻工作强度并避免操作误差。 4.采菌液量准确 重现性高,可靠性高的检测手段,采菌量准确 确保所
细菌多点接种仪主要特点和技术参数
主要特点种棒使用经特殊处理的不锈钢制成,由于专门的结构设计和特殊加工,消除了接种棒的疏水性并防止了采样时菌液滴落。2.具有位置判定针,培养皿上的菌落位置很容易判定灭菌处理方法简单。3.接种速度极快,减轻工作强度并避免操作误差。4.采菌液量准确 重现性高,可靠性高的检测手段,采菌量准确 确保所有接种棒
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——幼胚的接种
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒Silwet农杆菌菌液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 幼胚盾片接种于侵染培养基后,从摇床上取出一管菌液(见注 9),向管中加入 60 μl 1%(V/V)的 Silwet,至终浓度为 0.015%。2. 完成 3.2 节的步骤 3 后,立即将离心管中所有的农杆菌菌液(4
涂布平板法flash演示
涂布平板法是平板计数的一种重要方法,不会影响某些热敏感菌和严格好氧菌的生长,因此在微生物学研究中也是很常用的纯种分离方法。 (1)样品稀释液的制备,按照样品需要稀释成相应浓度的菌液。 (2)先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼
肥达氏试验
实验方法原理将已知的伤寒杆菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副伤寒杆菌“H”抗原与病人血清混合作试管定量凝集试验,以检测病人血清中的相应抗体,临床上作为诊断伤寒和副伤寒的参考依据。仪器、耗材待检血清诊断菌液蒸馏水试管试管架微量移液器吸管水浴箱实验步骤1. 将大小一致的小试管放置试管架,4排,每排8
肥达氏试验
实验方法原理 将已知的伤寒杆菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副伤寒杆菌“H”抗原与病人血清混合作试管定量凝集试验,以检测病人血清中的相应抗体,临床上作为诊断伤寒和副伤寒的参考依据。仪器、耗材 待检血清诊断菌液蒸馏水试管试管架微量移液器吸管水浴箱实验步骤 1. 将大小一致的小试管放置试管架,4排,
GST融合蛋白表达与纯化的实验步骤与注意事项(二)
7、转化BL21(DE3)pLysS菌株检测GST融合蛋白的表达(1)冰上融化BL21(DE3)pLysS感受态细胞(天根)(2)2 ml离心管中,加入25μl BL21+ 3μl质粒(300-500ng),混匀(质粒≤感受态1/10)(3)冰上放置30min(4)42°C,90s(5)冰上放置2-
质粒DNA导入细菌细胞实验——一步法制备感受态细菌实验
试剂、试剂盒TSS仪器、耗材培养基平板实验步骤1. 准备新鲜的过夜菌。按1:100的比例将过夜培养的菌液加入到新鲜的LB培养液中,于37 °C培养至OD600为0.3~0.4。2. 加人等体积冰冷的2 X TSS于菌液中,在冰上温和地混匀。3. 可以将菌液分成小份用干冰/乙醇浴冻存,于-70
平板倾注法注意事项
简单的数学问题:因为你要计算的是菌体的浓度,不是菌体的个数,与体积无关。 浓度 = 菌体个数/菌液体积。稀释到10-4浓度时,取出的1ml和取出的0.1ml二者浓度一样。0.1ml培养出来的菌落数虽然是1ml培养出来的菌落数的十分之一,但体积也是它的十分之一(0.1ml是1ml的十分之一)。计算原来
电转化感受态细胞实验原理
电转化感受态细胞实验原理 转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌细胞,并使其生物学特性发生可遗传的变化的过程,利用理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。电转化法是利用瞬间高压在细胞上打孔,因而需用冰冷的超纯水多次洗涤处于对树生长前期的细胞,以使细胞悬浮液中应
简介均质袋的用途和分类
均质袋的用途 用于食品中不同种类细菌检测时的样本处理、前增菌或样本稀释等。 均质袋的分类 根据液体不同分为:缓冲蛋白胨水均质袋,磷酸盐缓冲盐溶液均质袋,生理盐水均质袋,GN增菌液均质袋,志贺增菌液均质袋,10%氯化钠胰酪胨增菌液均质袋,3%氯化钠碱性蛋白冻水均质袋,0.1%蛋白胨水均质袋,
超声波破碎大肠杆菌温度升高解决方法
实验室常用超声波细胞破碎仪来破碎大肠杆菌,用于提取表达外源蛋白等试验,在超声波破碎大肠杆菌过程中常常温度探头测得大肠杆菌菌液中温度逐渐升高,有可能会致使热敏物质失活,该怎么解决呢?今天舜玛仪器来谈谈在超声波细胞破碎仪处理大肠杆菌过程中降低温度的解决措施。 超声波细胞破碎仪在处理大肠杆菌过程中,
超声波破碎大肠杆菌温度升高解决方法
实验室常用超声波细胞破碎仪来破碎大肠杆菌,用于提取表达外源蛋白等试验,在超声波破碎大肠杆菌过程中常常温度探头测得大肠杆菌菌液中温度逐渐升高,有可能会致使热敏物质失活,该怎么解决呢?今天舜玛仪器来谈谈在超声波细胞破碎仪处理大肠杆菌过程中降低温度的解决措施。 超声波细胞破碎仪在处理大肠杆菌过程中,
细菌的简单染色和革兰氏染色及其注意事项(二)
细菌芽孢染色法(一)原理细菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易着色,若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则:除了用着色力强的染料外,还需要加热,以促进芽胞着色。当染芽胞
细菌多点接种仪的特点
1.种棒使用经特殊处理的不锈钢制成,由于专门的结构设计和特殊加工,消除了接种棒的疏水性并防止了采样时菌液滴落。 2,培养皿上的菌落位置很容易判定灭菌处理方法简单。 3.接种速度极快,减轻工作强度并避免操作误差。 4.采菌液量准确 重现性高,可靠性高的检测手段,采菌量准确 确保
细菌多点接种仪的主要特点
1.种棒使用经特殊处理的不锈钢制成,由于专门的结构设计和特殊加工,消除了接种棒的疏水性并防止了采样时菌液滴落。 2,培养皿上的菌落位置很容易判定灭菌处理方法简单。 3.接种速度极快,减轻工作强度并避免操作误差。 4.采菌液量准确 重现性高,可靠性高的检测手段,采菌量准确 确保所有接种棒在培
肥达反应实验_定量凝集试验
实验方法原理用已知的伤寒杆菌H,O抗原和甲,乙型副伤寒杆菌H抗原,与病人血清作定量凝集试验,以测定患者血清中有无相应抗体,根据抗体含量的多少及增长情况,可帮助诊断伤寒及副伤寒。实验步骤1. 取小试管28支,分四排置于试管架上,每排7支,于每排第一管分别标记H,O,PA,PB 符号。2. 于各管内
肥达反应实验
实验方法原理 用已知的伤寒杆菌H,O抗原和甲,乙型副伤寒杆菌H抗原,与病人血清作定量凝集试验,以测定患者血清中有无相应抗体,根据抗体含量的多少及增长情况,可帮助诊断伤寒及副伤寒。实验步骤 1. 取小试管28支,分四排置于试管架上,每排7支,于每排第一管分别标记H,O,PA,PB 符号。2. 于各
细菌的芽孢染色(spore-staining)
实验原理细菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易着色,若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽孢呈无色透明状)。芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽孢染色法都基于同一个原则:除了用着色力强的染料外,还需要加热,以促进芽孢着色。当染芽孢时,菌体也会着色
如何选择实验室纯水机呢
1、实验室纯水机的价格 不管是什么商品,价格无疑是检验产品好坏的最直接标准,俗话说“好货不便宜”,很多人也许会贪图便宜,选择一些没有质量保证的品牌从而导致试验检验的结果不精准那就得不偿失了。但是我们也并不是一味追求过高的纯水机品牌,总之,价格要在一个合理的市场价格范围之内。 2、实验室纯水
测定微生物数量实验_显微镜直接计数法
实验方法原理利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的( 0.1 mm2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积
测定微生物数量
实验方法原理 利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的( 0.1 mm2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算
发根农杆菌诱根现象观察
一、原理发根农杆菌是一种寄主范围非常广泛的土壤细菌,可以侵染几乎所有的双子叶植物和少数单子叶植物。植物伤口感染发根农杆菌后,一到数周出现毛状根。毛状根没有向地性,除菌后在无激素培养基上可迅速生长并产生许多分枝。通过培养可直接从毛状根上再生植株,或经愈伤组织途径分化出再生植株。发根农杆菌转化系统是实现
碱裂解法提取质粒dna的注意事项
1、利用氯霉素抑制染色体的复制,而不抑制质粒的复制这一特点,在低拷贝质粒(如pUC19)的培养过程中添加氯霉素可以大大提高得率。2、RNA 的去除,首先是使用 RNase 消化。在溶液 I 中加入高浓度的 RNase A (100ug/ml),或者用含 25ug RNase A/ml TE 溶解抽提
质粒提取的注意事项
1、利用氯霉素抑制染色体的复制,而不抑制质粒的复制这一特点,在低拷贝质粒(如pUC19)的培养过程中添加氯霉素可以大大提高得率。2、RNA 的去除,首先是使用 RNase 消化。在溶液 I 中加入高浓度的 RNase A (100ug/ml),或者用含 25ug RNase A/ml TE 溶解抽提
血球计数板的误差来源及避免方法
误差来源1、镜检计数室。因前一次清洗不到位,或者保存过程中存在污染,更或者因操作不当导致的计数室存在划痕,若不及时清洗或更换,则会对后期实验计数产生极大影响。所以,在每次使用血球计数板之前都需要加一步镜检计数室,如若在镜检时发现计数室有污物,则需按要求清洗并吹干后再进行实验2、摇匀后取液。在吸出培养
微生物生长的几种检测方法(2)
染色计数法: 为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数,而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足,人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色,可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液,染色后在显微镜下观察,活细胞为无色,而死细胞为蓝色。 比例计数法
细菌多点接种仪主要特点
1.种棒使用经特殊处理的不锈钢制成,由于专门的结构设计和特殊加工,消除了接种棒的疏水性并防止了采样时菌液滴落。 2,培养皿上的菌落位置很容易判定灭菌处理方法简单。 3.接种速度极快,减轻工作强度并避免操作误差。 4.采菌液量准确 重现性高,可靠性高的检测手段,采菌量准确 确保所有接种棒在培养