农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——幼胚的接种
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒Silwet农杆菌菌液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 幼胚盾片接种于侵染培养基后，从摇床上取出一管菌液（见注 9），向管中加入 60 μl 1%（V/V）的 Silwet，至终浓度为 0.015%。2. 完成 3.2 节的步骤 3 后，立即将离心管中所有的农杆菌菌液（4 ml) 倒入已接种幼胚盾片的培养皿中 [见注 10，图 5.1 (a )]。3. 将培养皿转移至黑暗条件下放置 15 min 至 3 h ( 见注 11)。在此期间可以进行其他培养皿的农杆菌菌液侵染操作。4. 吸去多余的农杆菌悬液 [ 图 5.1 (b) ] ，应注意不要吸到胚（见注 12)。将胚转移至含固体接种培养基的新培养皿中，接种时盾片向上，胚轴面需接触到培养基。5. 将共培养培养板置于 22~23℃ 暗培养 2~3 天。展......阅读全文
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——幼胚的接种
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒Silwet农杆菌菌液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 幼胚盾片接种于侵染培养基后，从摇床上取出一管菌液（见注 9），向管中加入 60 μl 1%（V/V）的 Silwet，至终浓度为 0.015%。2. 完成 3.2 节的步骤 3 后，立即将离心管中所有的农杆菌菌液（4
幼胚培养的技术特点
中文名称幼胚培养英文名称culture of larva embryo定 义将子叶期以前的具胚结构的幼小胚从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
病毒的鸡胚培养_羊膜腔接种
病毒的鸡胚培养可用于：（1）某些病毒分离、增殖；（2）病毒的毒力测定、中和试验；（3）生产疫苗等。实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料（如患者咳嗽液等）分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层，也可被鸡胚咽下或吸入，引起全胚胎感染。另外，病毒也可被排泄到尿囊腔中，使尿囊腔中含有大
病毒的鸡胚培养_卵黄囊接种
实验方法原理卵黄囊接种法主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖。这些大的病原体主要在卵黄囊的内皮细胞生长，且生长速度很快，立克次体在染色后也可看到。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等实验步骤1. 接种步骤与方法(1
病毒的鸡胚培养_尿囊腔接种
实验方法原理尿囊腔接种法广泛应用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养，这些病毒被注射到尿囊腔后，可在内皮细胞中复制，复制的病毒被释放到尿囊液中，因此，在尿囊液中含有大量的病毒。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验
实验材料 农杆菌细胞试剂、试剂盒 根癌农杆菌甘油原液抗生素仪器、耗材 MG L 液体培养基实验步骤 1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中，28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜（17~20 h) 至 O
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验
实验材料农杆菌细胞 试剂、试剂盒根癌农杆菌甘油原液 抗生
病毒的鸡胚培养_绒毛尿囊膜接种
实验方法原理绒毛尿囊膜接种常用于牛痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒的分离，因为这些病毒在绒毛尿囊膜上可形成肉眼可见的斑点状或痘疱状病灶。另外，病毒可在绒毛尿囊膜上进行滴定，因为感染性病毒颗粒的数目可以通过产生的斑和痘的数目来计算。该方法还可用于抗病毒血清的滴定试验，即在有抗体存在的情况下，痘疱形成受到
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验7
转化效率的计算仪器、耗材Southern 杂交分析实验步骤1. 转化效率通常用百分比表示。计算方法为：确定的独立转基因单株总数 x100 /侵染的总幼胚数。2. 如果一个胚得到一株以上的转基因植株，这视为一个独立转化事件，来自同一转化事件的其他所有单株视为姐妹株。这些姐妹株有可能来源于不同的细胞，属
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验4
胚性愈伤的诱导和再生实验材料胚仪器、耗材诱导培养基再生培养基实验步骤1. 共培养 2~3 天后，将胚转移至诱导培养基以诱导胚性愈伤（表 5.1，诱导培养基 a 适用于面包小麦，诱导培养基 b 适用于硬粒小麦）。记录下转移的胚的个数以便计算转化效率，转移时确保胚的盾片仍朝上。22~23℃ 避光培养。2
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验2
根癌农杆菌接种外植体的准备（见注 6)实验材料面包小麦硬粒小麦试剂、试剂盒乙醇仪器、耗材层流罩超净台实验步骤1. 面包小麦和硬粒小麦开花后 12~16 天剪下幼穗，将种子幼体用 70% ( V/V）的乙醇浸泡 1 min，再换用 10% 乙醇（V/V）轻轻晃动 10 min 进行表面消毒，最后用足量
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验6
转基因植株的鉴定及种子的收获实验材料再生苗仪器、耗材Magenta 盒实验步骤1. 经第二轮选择后，挑出根茎生长良好的再生苗（见注 16 ) 移栽于土壤中。首先，将各株再生苗移入 8 cm2 的盆钵里生长 1~2 周，使它们能够逐渐适应温室条件。当小苗足够大时，再取叶片提取 DNA 用于 PCR 和
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——选择
实验材料愈伤组织仪器、耗材选择培养基Magenta 培养盒实验步骤1. 将培养物转移至第一轮选择培养基中（表 5.1，选择培养基 1 ) ( 见注 15)。一些愈伤组织在转移时会自然散开，尽管这无关紧要，但放置时应将散开的愈伤块彼此靠近，以标记它们是来自同一幼胚。2. 培养 3 或 4 周后，筛选出
农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验1
根癌农杆菌菌液的准备实验材料农杆菌细胞试剂、试剂盒根癌农杆菌甘油原液抗生素仪器、耗材MG L 液体培养基实验步骤1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中，28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜（17~20
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料 植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒 利福平卡那霉素仪器、耗材 MG L 培养基实验步骤 1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒利福平卡那霉素仪器、耗材MG L 培养基实验步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，调到合适的
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料：植物凝胶 pBract 质粒
植物胚胎培养
植物胚胎培养包括胚培养、胚珠培养、子房培养、胚乳培养。 一、植物胚培养(embryo culture of plants) 1．胚培养的意义和类型 胚培养在实践中的应用意义 · 克服杂交育种中杂种胚的早期夭折 · 克服珠心胚干扰，提高育种效率 · 理论研究领域的应
桑椹胚的胚泡形成过程
桑椹胚增殖、分裂，当卵裂球数达到100个左右时，细胞间开始出现小的腔隙，最后融合成一个大腔，桑椹胚细胞继续发育为胚泡腔。此时，实心的桑椹胚演变为中空的泡状，称胚泡( blastor-cyst)。胚泡壁为1层扁平细胞，称滋养层；腔内的一侧有一细胞团，称内细胞群( inner-cellmass)。覆盖在
神经胚的介绍
神经胚（neurula）亦称髓胚。主要是指脊索动物的发生中在原肠形成（或者原条期）之后，从出现中枢神经系统原基的神经板时期开始，到袖经板闭合变成神经管期间的胚胎而言。在这一时期外胚层分化为神经板及表皮区，在神经板之下的为头肠、前索板、脊索原基、预定体节的位置，在多数情况下，表皮区的外胚层被侧板的
胚膜的概念
胚膜指的是高等陆生动物胚胎发育过程中胚体以外的一些膜组织，可提供个体发育的适宜的小环境，并能吸收营养，交换气体和存放、排泄废物等。
免疫接种的接种对象
白喉、百日咳、麻疹、脊髓灰质炎等疫苗多用于儿童，因成人经隐性感染或患病已获得免疫力。有些传染病如伤寒、霍乱等，不同年龄都可感染，故所有人群皆需接种。另外，视职业或工作性质不同需接种某类疫苗，如破伤风类毒素的接种对象主要是战士、民兵。
免疫接种的接种途径
常用的有皮上划痕、皮内、皮下、口服与气雾等途径。死疫苗多用皮下注射法，活疫苗则可用皮内注射、皮上划痕或以自然感染途径接种，尤以后者为佳。如脊髓灰质炎活疫苗以口服为佳，而流感疫苗则以气雾吸入为佳。
胚斑的结构特点
在动物卵母细胞核中所认定的一种核仁（R．Wagner，1836）。这种核仁的形态、数目、位置，都可由于卵的发生时期和动物种类的不同而有很大的差异。在海胆和哺乳类等卵黄少的情况下，核仁的形体较大，数目为1（海胆）-2个；而在鱼类、两栖类、爬行类、鸟类和某种昆虫等一些卵黄多、胞核大的卵，其核仁的数目则很
神经胚的功能作用
神经胚：神经沟两侧上部向背部中线升起、靠拢并愈合在一起，形成一个中空的管状结构，与此同时，管的顶部细胞脱离外胚层，两侧的外胚层细胞重新融合在一起形成的完整的外胚层。
病毒的鸡胚培养
目的意义：了解禽源病毒鸡胚培养的意义及用途掌握病毒鸡胚培养的基本方法基本原理：鸡胚培养是培养某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分离、增殖、毒力滴定、中和试验及生产疫苗等。病毒接种鸡胚的途径有多种，主要有卵黄囊接种、绒毛尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种、羊膜腔接种途径等，应根据需要选择适当的途径。器材
胚孔的形成特点
原肠形成时，内胚层细胞迁移到胚体内部形成原肠腔，留有与外界相通的孔。通过胚孔背唇进入胚内的细胞将形成脊索及头部中胚层，其余大部分中胚层细胞经胚孔侧唇进入胚内。原口动物的口起源于胚孔，称为口胚孔，如大多数无脊椎动物；而后口动物的胚孔则发育为成体的泄殖腔，称为泄殖胚孔，与胚孔相对的一端另行开口，发育为成
胚状体的定义
离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物，此现象无论在体细胞培养还是生殖细胞培养中均可以看到，因而统称为体细胞胚或胚状体。在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成与合子胚相类似的结构。胚状体一般专指在组织培养条件下产生的
桑椹胚的定义
桑椹胚（Morula）是指一个受精卵经过多次分裂，形成由32个左右细胞组成的细胞团 。其属于动物胚胎发育的早期阶段，里面的细胞还是全能细胞。桑椹胚是多细胞动物全裂卵的卵裂期，卵裂球形成团块状时期的胚胎，卵裂腔几乎没有或者很小
胚状体的来源
胚状体大多起源于一个胚性细胞，通过首次分裂形成二细胞原胚，以后经过细胞分裂形成多细胞原胚，在单子叶植物中，胚性细胞的第一次分裂一般为不均等分裂，在双子叶植物中，胚性细胞的第一次分裂为不均等分裂或者均等分裂，在大多数情况下，胚性细胞的第一次分裂为平周分裂，形成两个子细胞，处于上部的顶细胞继续发育为多细