研究揭示骨骼肌兴奋收缩偶联过程原位结构基础

中国科学院生物物理研究所孙飞研究组和大连化学物理研究所李国辉研究组共同揭示了高等哺乳动物骨骼肌三联体介导兴奋-收缩偶联过程的原位结构基础。相关论文3月20日发表于《先进科学》。在生物体内,骨骼肌的收缩与舒张是受神经系统控制的。神经系统传递来的化学信号经过一系列的转变与传递过程最后形成肌肉的机械收缩行为,这个过程被称为兴奋-收缩偶联。在这一过程中,三联体上的RyR1是整个兴奋-收缩偶联过程中传递兴奋信号的重要元件。然而,尽管 RyR1的高分辨率结构已经被解析,仍有一系列关于 RyR1功能的重要科学问题未被解决。在该研究中,孙飞研究组基于前期工作基础,进一步结合组织原位制样方法和冷冻电子断层三维重构技术,系统性地表征了骨骼肌中三联体的精细原位结构。其中包括:解析了RyR1在骨骼肌16.7 ?分辨率的原位结构,发现在原位环境下RyR1与FKBP12和钙调蛋白(Calmodulin,CaM)紧密结合;解析了RyR1-DHPR超级复合体的......阅读全文

原位PCR和原位RTPCR操作规程

(一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10m

原位PCR和原位RTPCR操作规程

原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。一、仪器设备英国Thermo Hybaid原位PCR仪。二、操作流程1、原位PCR步骤(1)预处理

荧光原位杂交实验——荧光原位杂交技术

荧光原位杂交可应用于:(1)动植物基因组结构研究;(2)染色体精细结构变异分析;(3)病毒感染分析;(4)肿瘤遗传学和基因组进化研究。实验方法原理用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵

FISH荧光原位杂交实验(原位杂交)

1. 实验目的        通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和在生物学、医学领域的应用。掌握原位杂交技术的操作方法,熟练掌握荧光显微镜的使用方法。2. 实验原理        荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗

基于同步辐射光的催化剂动态结构原位表征装置通过验收

  12月26日,中国科学院计划财务局组织专家在山西煤炭化学研究所,对王建国研究员负责的中国科学院科研装备研制项目“基于同步辐射光的催化剂动态结构原位表征装置”进行验收及成果鉴定。   验收鉴定专家委员会由中科院高能物理所胡天斗研究员、谢亚宁研究员、北京大学刘海超教授、太原理工大学李瑞丰教授、董晋

原位杂交仪—荧光原位杂交相关解释

  荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule

原位电性能测试

 聚焦离子束(Focused Ion beam, FIB)的系统是利用电透镜将离子束聚焦成非常小尺寸的显微切割仪器。目前商用系统的离子束为液相金属离子源,金属材质为镓(Ga),因为镓元素具有低熔点、低蒸气压及良好的抗氧化力;典型的离子束显微镜包括液相金属离子源、电透镜、扫描电极、二次粒子侦测器、5

原位PCR的概念

原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和 高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。原位PCR是Hasse等于1990年建立的,实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落 细胞、血细胞等. 

原位PCR实验相关

  所需设备  原位PCR反应是在载玻片的平面上进行,保持水平可以使反应各组分均匀地分布在组织切片上,所以须在原位PCR仪上进行,该仪器不但可以使载玻片保持水平,而且还可以给载玻片进行均匀地加热,保证扩增反应的顺利进行。  探针种类  与原位杂交一样,检测原位PCR结果的探针可以是DNA探针,也可以

原位型冻干机简介

  冻干腔和冷阱为两个独立的腔体,冻干腔中的搁板带制冷功能,物料置入冻干腔后,物料的预冻、干燥过程无需人工操作。该类型冻干机的制作工艺复杂,制造成本高,但原位型冻干机是冻干机发展方向,是进行冻干工艺摸索的理想选择,特别适用于医药、生物制品及其他特殊产品的冻干。

原位芯片的应用

    原位芯片作为基础材料,它就像一个支点,可撬动多领域的应用,且与我们生活息息相关。比如,在原位芯片的“助攻”下,电子显微镜观测能力将大幅度提高,能全程高清拍摄每个原子的变化和运动轨迹,借由这项技术,可以研究汽车尾气、废水等。由于原位芯片高通量、少样本量的特性,可满足超快速体外诊断(如用尿液检测

原位杂交技术

导语我们常说,科学家也是艺术家,在明确真理探索科学的道路上,往往会创造出很多极具美感的艺术作品。所以今天小编为大家介绍的就是能做出美美图的新技能。先欣赏一下美美的实验结果图~---Olson, B. D. and Downes, G. B. ---in situ Hybridization of w

原位进样原理

原位测序技术的原理和应用点击次数:664 发布日期:2022-3-23  来源:苏州阿尔法生物实验器材有限公司原位测序 (ISS) 是一种新方法,通过该方法直接在固定组织或细胞样品的切片中对 mRNA 进行测序。原位测序原理关键是测序信息与其位置之间的联系—在一些情况下,是亚细胞位置。这与传统测序不

原位PCR实验步骤

原位PCR实验步骤,原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马

原位杂交简介

原位杂交是在分子生物学领域应用极为广泛的实验技术之一,是在研究生物体发育过程中的一种极为重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为in situ hybridization,其中in situ为拉丁文,原义是"in its natural position". 字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处

什么是原位红外

原位红外是指测试反应过程中在原位不动下用红外线扫描机记录微观的反应变化。原位红外主要是测试反应过程中,官能团结构的变化,可以更好的模拟实验过程,对解释反应机理很有帮助。在催化剂表征方面,可以模拟出催化剂催化原理。

DRIFT原位光谱

散射反射傅立叶变换红外光谱(Diffuse Reflaxions Infrared Fourier Transformations Spectroscopy, DRIFTS)为化学家提供了研究接近真实反应条件的非均相气相反应的可能性。借助这种方法可以获取反应物与催化剂表面相互作用和吸附

什么是原位检测?

在检测中,经常听到原位检测,常见于岩土工程其实就是:在实地尽量对土体少的扰动,现场进行的一项检测,以尽可能的取得较为准确的测量数据。

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(二)

5.洗膜 取出塑料袋,用剪刀剪开,小心取出滤膜,立即浸入盛有2×SSC和 0.5%SDS溶液的盘中,室温下漂洗5min。再将滤膜移入2×SSC和0.1%SDS溶液中,室温下洗涤15min(轻轻摇动)。然后将滤膜移入 0.1×SSC和0.5%SDS溶液中;68℃轻轻摇动保温2h,更换缓冲液后继

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(三)

(1)DAN斑点杂交①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上。每个样品一般点50μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。(2)RNA斑点杂交:与上法类似,每个样品至多加10μg总RNA(

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(六)

夹心杂交法可用滤膜和小珠固定吸附探针,使用小珠可更好地进行标准化试验和更容易对小量样品进行操作。Dahlen 等利用微孔板进行夹心杂交,可同时进行大量样品检测,他们先吸取DNA探针加到凹板中,然后用紫外线照射使其固定到塑料板上。用微孔板进行夹心杂交还可直接用于PCR技术。应用光敏生物标记探针

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(五)

⑦60伏电泳过夜。 ⑧取出凝胶,水中浸泡2次,每次5min。 ⑨室温下将胶浸到50mmol/L NaOH和10mmol/l NaCl中45min,水解高分子RNA,以增强转印。 ⑩室温下将胶浸到0.1mol/L Tris·HCl (Ph7.5)中45min,使胶中和。

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(四)

(2)硝酸纤维素滤膜吸印。①将胶切成合适大小,切去右上角作为记号。②将胶放进盛有变性缓冲液(1.5mol/l NaCl, 0.5mol/L NaOH)的盘中轻摇动15min。③换到中和缓冲液(1mol/L Tris·HCl , pH8.0, 1.5mol/L NaCl)中轻摇动30min。④裁一张硝

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(一)

是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分

以菌落原位杂交为例介绍原位杂交技术

对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行克隆筛选时,可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。将少数菌落转移到硝酸纤维素滤膜上(1) 在含有选择性抗生素的琼

前列腺原位肿瘤模型的建立实验——原位种植法

前列腺原位肿瘤模型的建立可以:(1)连续活体监测前列腺癌发生、发展;(2)用于前列腺原位肿瘤生长及治疗的研究;(3)研究前列腺癌的生物学行为。实验方法原理10只BALB/C裸鼠前列腺背侧包膜内注入携带红色荧光蛋白(RFP)的前列腺癌PC-3细胞(PR7细胞)悬液20μL,第2、4、6、8周分别用非侵

新型原位光电电子显微学技术构建太阳能电池结构

  近日,东南大学电子科学与工程学院孙立涛教授团队在原位光电器件研究方面取得重要进展,其研究成果以“'In situ interface engineering for probing the limit of quantum dot photovoltaic devices”为题在最新一期

生物物理所揭示小鼠精子轴丝双联微管的原位精细结构

  轴丝是生物体中纤毛的基础结构,在细胞运动、细胞间通讯、感觉接收和胚胎发育等重要生命活动中具有关键作用。在运动纤毛中,轴丝由中央对复合体(CPC)和周围的9组双联微管(DMT)组成,通过径向辐条(RS)、外动力蛋白(ODA)和内动力蛋白(IDA)等组分相互连接,形成典型的"9+2"结构。轴丝各组分

关于荧光原位杂交用于染色体数目与结构异常的介绍

  在细胞遗传学检在中,重复序列的探针应用最多,包括a卫星DNA探针、β卫星DNA探针和经典卫星DNA (elassic -stllite DNA )探针。a卫星DNA探针主要检测人染色体的着丝粒。β卫星DNA探针位于顶端着丝粒染色体及染色体的异染色质周围。经典卫星DNA探针有AATCG短片段重复,

科学家研发可用于器官芯片中原位检测的胶体晶体微结构

  器官芯片是集成干细胞、生物材料、纳米加工等前沿技术,在体外构建的器官微生理系统,可模拟人体不同组织器官的主要结构功能特征,在药物研发和疾病模型构建等领域具有广泛的应用前景。随着器官芯片系统发展,微米尺度下的环境构建与调控、检测反馈等逐渐成为其发展的技术需求。  近日,来自东南大学的研究团队研发了