什么是原位检测?
在检测中,经常听到原位检测,常见于岩土工程其实就是:在实地尽量对土体少的扰动,现场进行的一项检测,以尽可能的取得较为准确的测量数据。......阅读全文
什么是原位检测?
在检测中,经常听到原位检测,常见于岩土工程其实就是:在实地尽量对土体少的扰动,现场进行的一项检测,以尽可能的取得较为准确的测量数据。
荧光原位杂交检测领域发展
鉴于FISH 起始阶段的发展主要是探针类型和检测位点的扩展,荧光检测技术将来的发展可能包括检测领域的扩展。荧光图像临床诊断应用需要在检测体系上进一步提高,如探针的结合,照相和分析的自动化,因此避免了不同操作间的误差。样品厚度是荧光显微镜检测样品类型的一个限制因素。近来的激光共聚焦显微镜和光学X射
原位PCR和原位RT
(一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪 。(二)、操作流程1、原位PCR 步骤1)预处理:(1)切片常规脱蜡;(2)0.2mol/L HCl处理10min;(3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min;(4)Nase消化组织37℃ 30min;(5)梯度酒精脱水,室温干燥
用非同位素探针进行原位杂交和检测实验——荧光原位杂交
实验方法原理实验材料载有样本的载玻片试剂、试剂盒 20〜150 ng非同位素标记的DNA探针去离子的甲酰胺l0 mg mL经超声处理的鲑精DNA主杂交混合液50% (V V)甲酰胺(未去离子)SSCpH 7.0生物素检测液或地高辛检测液或生物素 地高辛检测液0.1% (V V) Triton ×-1
间接原位PCR(原位杂交PCR)
与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。一、预杂交1. 试剂与配制2×SSC50%去离子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v)预杂交液:2×SSC,5%硫酸葡
间接原位PCR(原位杂交PCR)
间接原位PCR(原位杂交PCR) 实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒
间接原位PCR(原位杂交PCR)
与直接原位PCR所不同的是,靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入,而是标记一段与扩增片段互补的探针,在扩增结束后,应用此探针进行原位杂交。因此,此处主要介绍原位杂交,其余方法同原位PCR。实验材料组织或细胞样品试剂、试剂盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNAR
原位PCR
About in situ PCR (Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The In Situ PCR: Amplification and Detection in a Cellu
原位PCR
实验概要原位PCR技术自上世纪90年代初建立至今,科学家就一直对原位PCR的技术和应用进行研究,目前该项技术已日臻完善。原位PCR既能分辨带有靶序列的细胞又能标出靶序列在细胞内的位置,在分子和细胞水平上研究疾病的发病机理、临床过程以及病理的转归,其特异性和敏感性均高于一般PCR技术。在病毒学、病理学
原位杂交组织化学杂交体检测
杂交体检测又称杂交体显示,是指通过一定方法使杂交反应形成的杂交体(杂交信号)成为在显微镜下可识别的产物。对原位杂交反应信号进行显示的方法因探针标记物不同而异。 (一)放射性核素标记探针的检测 *个原位杂交实验(1969年)以’H作为核酸探针的标记物,杂交信号用放射自显影术检测。随着
原位末端转移酶标记技术检测凋亡
(一)原理凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后,将DNA切割成许多双链DNA片段以及高分子量DNA单链断裂点(缺口),暴露出大量3-羟基末端,如用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)将标记的dUTP进行缺口末端标记,则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。(二)荧光标记法1.材料
原位杂交HPV-DNA检测技术应用及体会
原位杂交技术是新近开展的一项新技术,其原理是采用荧光、生物素、地高辛等标记的探针,依据碱基对互补配对原理,与组织切片、细胞制片等标本中的靶序列特异杂交,经信号放大显色后,镜下观察结果。此方法具有很高的灵敏性和特异性。本文就HPV DNA检测技术在常规实验中的操作体会等问题,总结如下。 1材料与方
用于检测植物组织RNA的原位杂交法
用于检测植物组织RNA的原位杂交法(一)组织切片制备l 植物组织的甲醛固定和包埋1.将植物组织切成小块,立即放入一个装有10~50ml固定剂溶液的烧杯中,把烧杯放到真空脱水机内。调节真空度以形成一个温和的真空,然后慢慢恢复常压。微量便于固定剂渗入组织,必须反复真空和非真空状态。待固定剂充分
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛
间接原位PCR(原位杂交PCR)实验
实验材料 组织或细胞样品试剂、试剂盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNARnaseDTT乙醇仪器、耗材 玻片石蜡膜橡皮泥湿盒实验步骤 一、预杂交 1. 试剂与配制 2×SSC 50%去离子甲酰胺:用4×SSC配制(v/v) 预杂交液:2×SSC,5%硫
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛应
原位杂交仪—原位杂交实验(二)
原位杂交第二天 1. 1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。 2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。 3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。 4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。
荧光原位杂交的荧光原位杂交
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结
原位杂交仪原位杂交的意义
原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或R
原位杂交仪—原位杂交试验(一)
收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗,然后换成甲醇,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧水处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)
原位杂交仪—原位杂交实验(三)
原位杂交第三天 1) 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,最后用1mlMABT溶液置换,25分钟。 2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置
2-TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒说明
DNA断裂是细胞凋亡的重要特征,在凋亡初期,DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段;晚期则可进一步在核小体间断裂,形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUT
概述荧光原位杂交位点数目及检测目标
在FISH 技术基本确立之后,FISH 不仅用于单基因或核酸检测,FISH 技术的进一步发展扩展到多色FISH 多基因位点同时检测,从基因检测发展到基因组、染色体、活细胞中转录产物mRNAs 原位检测以及组织水平的核酸检测,并且在今后的研究中还有可能应用到整个生物体的检测。早期的探针较大,是通过
原位末端标记技术检测细胞凋亡的介绍
细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法: ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单
土壤原位PH记录仪检测土壤的pH值
在现代耕地土壤品质问题中,土壤的酸化现象还是比较突出的,而一旦土壤出现了酸化的现象,那么再在土壤上种植作物,那么也很难获得丰产丰收了。因此为了让土地重新焕发光彩,在种植作物之前,很有必要做的一件事情,就是使用土壤原位PH记录仪来检测土壤的pH值。如果检测到的土壤酸碱度不合适其作物生长范围,那么就需要
关于荧光原位杂交的检测领域发展的介绍
鉴于FISH 起始阶段的发展主要是探针类型和检测位点的扩展,荧光检测技术将来的发展可能包括检测领域的扩展。荧光图像临床诊断应用需要在检测体系上进一步提高,如探针的结合,照相和分析的自动化,因此避免了不同操作间的误差。样品厚度是荧光显微镜检测样品类型的一个限制因素。近来的激光共聚焦显微镜和光学X射
原位PCR定义
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。原位PCR既能分辨鉴定带有靶序列的细胞,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾
原位PCR技术
除了经典的原位杂交外。原位杂交可与其他组织化学技术相结合,或与其他分子生物学技术相结合,使其应用范围扩大,成为更有应用价值的技术。PCR技术是根据生物体内DNA复制的特点而建立的在体外经酶促反应将特定DNA序列进行高效和快速扩增的技术,它可将单一拷贝或低拷贝的待测核酸以指数形式扩增而达到用常规方法可
原位PCR仪
用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增,不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾病的发病机