蛋白质N端测序服务Edman法
服务简介几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端，蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期，同时关联着蛋白亚细胞器定位等，这些与蛋白的功能和稳定性息息相关，对蛋白进行N-端测序分析，有利于帮助分析蛋白质的高级结构，揭示蛋白质的生物学功能。对蛋白N端测序主要分类两大类，其一为非质谱技术，其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处。蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的。Edman化学降解是测定蛋白质一级结构的方法主要是从蛋白质或多肽氨基酸末端进行分析，其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）环化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）转化为苯异硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三个主要的化学步骤，每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基，同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解，而后通过转移的PTH-氨基酸鉴......阅读全文
蛋白质印迹法的操作步骤
试剂准备1、SDS-PAGE试剂：见电泳实验。2、匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液：甘氨酸 2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至
什么是蛋白质测定的Lowry法
就是Folin---酚法测定蛋白质含量原理：磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应．蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应．Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍．试剂：一：1,4%碳酸钠；2,0.2N氢氧化钠；3,1%硫酸铜；4,2%酒石酸钾钠.1和2等体积混合,3和
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
疏水作用层析法 实验方法原理 在疏水层析的主要支持介质上含有大小不等的疏水侧链，烷基或芳香基，可是绝大多数情况起作用的是苯基或辛基。当碳氢链长度增加，即变得更
蛋白质印迹法的技术分类
Western Blot显色的方法主要有以下几种：i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理
lowry法测蛋白质含量误差分析
可能存在干扰物质，如还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵等，详见药典四部0731蛋白质含量测定Lowry法中第二种方法，通过将蛋白质沉淀来去除干扰。
蛋白质印迹法的样品制备
1、单层贴壁细胞总蛋白的提取： （1）倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 （2）每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动1min洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两
盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大，盐分子较小，会随着层析流动相进入孔径较小的固定相，在层析中迁移速率小，而蛋白质分子尺寸较大，不能随流动相进入固定相，迁移速率大，首先从层析术中流出，实现脱
什么是蛋白质测定的Lowry法
就是Folin---酚法测定蛋白质含量原理：磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下，易被酚类化合物还原而呈蓝色反应．蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应．Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍．试剂：一：1，4%碳酸钠；2，0.2N氢氧化钠；3，1%硫酸铜；4,2%酒石酸钾钠。1和2等体积混合，3和
盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大，盐分子较小，会随着层析流动相进入孔径较小的固定相，在层析中迁移速率小，而蛋白质分子尺寸较大，不能随流动相进入固定相，迁移速率大，首先从层析术中流出，实现脱
蛋白质印迹法实验的要点
蛋白质印迹法是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。在实验过程中有很多要点需要实验人员注意，小析姐整理了一些，希望对你的实验能有所帮助。 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot，其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的
蛋白质印迹法的操作步骤
1.SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2.匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。3.转膜缓冲液：甘氨酸 2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至1000
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 在疏水层析的主要支持介质上含有大小不等的疏水侧链，烷基或芳香基，可是绝大多数情况起作用的是苯基或辛基。当碳氢链长度增加，即变得更疏水时，疏水强的少量蛋白质被吸附。这时疏水相互作用太强，需用极端方法洗脱，可能会导致蛋白质变性。苯基琼脂糖比辛基琼脂糖疏水性低，是疏水纯化中效果不错的常用介质
lowry法测蛋白质含量误差分析
可能存在干扰物质，如还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵等，详见药典四部0731蛋白质含量测定Lowry法中第二种方法，通过将蛋白质沉淀来去除干扰。
蛋白质印迹法的应用特点
蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里希生物研究所（Friedrich Miescher Institute）的Harry Towbin在1979年提出的。在尼尔·伯奈特（Neal Burnette）于1981年所著的《分析生物化学》（Analytical Biochemistry）中首次被称为West
第三期柱子封端的双封端三封端到底指的是什么
（1）以气体A为研究对象，在玻璃管由水平转到竖直位置的过程中，设玻璃管横截面积是S，PA=76cmHg，VA=14S，PA′=76cmHg-L=70cmHg，VA′=lA2S，有玻意耳定律得：PAlA1S=PA′lA2S lA2＝P0l1P0?6＝76×1476?6cm＝15.2cm从状态①→③有玻
大连化物所定量蛋白质组学新技术新方法研究取得进展
近日，中科院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮研究员等人在定量蛋白质组学新技术新方法研究方面取得新进展。相关研究成果发表在最新一期的Angew. Chem. Int. Ed.上(2013年52卷，9205-9209页)。 该项研究工作利用胰蛋
部分分解多肽两端有关的－PCR－法筛选－PK120
基本方案 实验方法原理 实验材料 PK-120
快速了解maxanGilbert化学修饰法
实验方法原理用化学试剂 处理具有末端放射性标记的DNA片段 ，造成碱基的特异性切割并产生一组具有不同长度的DNA链降解产物，经凝胶电泳分离和放射自显影后，可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。实验材料DNA试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材电泳仪实验步骤一、取待测DNA片段，既可以是单链也可以是双链。 此
蛋白质含量测定法考马斯亮蓝法（Bradford法）
本法系依据在酸性溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白质分子中的碱性氨基酸（精氨酸）和芳香族氨基酸结合形成蓝色复合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法灵敏度高，通常可测定1～200μg的蛋白质量。本法主要的干扰物质有去污
用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法
实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒丙酮（或其他有机溶剂如乙醇或甲醇）仪器、耗材Eppendorf 管（小塑料离心管）Eppendorf 管离心机（小型台式离心机）混旋器实验步骤1. 加 1 ml冷丙酮（-20℃）至 200 ul 样品溶液，混匀。2. -20℃： 放置 10 min。3. 小型台式离
n基因
（1）切割基因时选用不同限制酶，形成的黏性末端不同，这样可以防止基因自身环化和不正确的连接．切割完成后，需用DNA连接酶将两基因连接成GFP-N融合基因（以下称融合基因），由于GFP基因切割是左端，而N基因切割是右端，因此该融合基因的上游基因为N基因．（2）由于融合基因的两端限制酶切割位点分别为Ka
华大基因引入亚洲首台Sequel测序仪更全面的基因组研究服务
2015年12月24日，中国深圳--全球最大的基因组研发机构华大基因今天宣布与实时单分子测序技术（SMRT）领导者加利福尼亚太平洋生物科学公司（Pacific Biosciences of California, Inc.，以下简称PacBio）再次合作，购入亚洲第一台Seque
迪安诊断牵手罗氏及FMI－引入“全面基因组测序分析服务”
近日，迪安诊断（300244）与罗氏集团(以下简称“罗氏”)及Foundation Medicine, Inc.(以下简称“FMI”)分别签订了独家战略合作协议，将携手助推中国肿瘤个体化诊疗进程。 根据相关协议，迪安诊断将成为FMI肿瘤全面基因组测序分析服务(CGP)在中国临床市场的独家合作
肱骨近端支架治疗肱骨近端骨折病例分析2
讨论肱骨近端骨折保守治疗争议 对于无移位和2部分骨折而言，长期临床观察认为保守治疗和手术治疗对其生活质量无明显影响。然而，保守治疗患者在制动早期往往出现肩关节明显疼痛、肩关节僵硬等症状。保守方式骨折端无法满意复位，也会出现骨折畸形愈合、关节面坍塌等并发症，给患者造成很大的身体和精神伤害。由
肱骨近端支架治疗肱骨近端骨折病例分析1
肱骨近端骨折约占所有成人骨折的5％。随着全球老龄化加剧，老年人发病率增加最为明显。在临床实践中，接近80％的肱骨近端骨折采用保守治疗，尤其是无明显移位和高龄患者。然而，对于3、4部分骨折等特定的骨折类型，保守处理往往预后较差，应该手术治疗。近年来随着医学科技的迅速发展，新的内置物和手术器械不断涌现，
川大华西医院研究者破译蛋白质测序难题
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/518754.shtm
新一代蛋白质测序方法诞生－|－Nature－Biotechnology论文推荐
德克萨斯大学奥斯汀分校研究人员发明了一种新技术，希望将蛋白质测序变得像 DNA 测序一样灵敏、快捷。 德克萨斯大学奥斯汀分校（The University of Texas at Austin）的一个研究小组展示了一种比现有技术更灵敏的蛋白质测序新方法，能够识别单个蛋白质分子，而不再一次需要数
我国或将实现蛋白质测序仪器和试剂国产化
基因测序技术飞速发展，使得几十个甚至上百个基因的测序能够在几天之内完成，近日，“蛋白质测序仪器和试剂国产化”项目实施工作会议在北京大学顺利落幕，会议得到了北京大学前沿交叉学科研究院方竞院长的大力支持。 90年代人类基因组计划，中国科学家承担了1%的任务；而2010年代的人类蛋白组计划，则是由中
新一代蛋白质测序方法诞生－|－Nature－Biotechnology论文推荐
德克萨斯大学奥斯汀分校（The University of Texas at Austin）的一个研究小组展示了一种比现有技术更灵敏的蛋白质测序新方法，能够识别单个蛋白质分子，而不再一次需要数百万个分子。这一进展可能对生物医学研究产生重大影响，使得开发用于癌症和其他疾病诊断的新的生物标志物更加容易，
SNP的检测方法（直接测序法与PCRSSCP）
人类基因组中存在着广泛的多态性，最简单的多态形式是发生在基因组中的单个核苷酸的替代，即单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNPs）。SNP通常是一种二等位基因的（biallelic），即二态的遗传变异，SNP的数量大、分布广，在组成人类基因组的