蛋白质N端测序服务Edman法

服务简介几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端,蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期,同时关联着蛋白亚细胞器定位等,这些与蛋白的功能和稳定性息息相关,对蛋白进行N-端测序分析,有利于帮助分析蛋白质的高级结构,揭示蛋白质的生物学功能。对蛋白N端测序主要分类两大类,其一为非质谱技术,其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处。蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的。Edman化学降解是测定蛋白质一级结构的方法主要是从蛋白质或多肽氨基酸末端进行分析,其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联,苯氨基硫甲酰酞(PTC-肽)环化裂解,和噻唑呤酮苯氨(ATZ)转化为苯异硫尿氨基酸(PTH-氨基酸)三个主要的化学步骤,每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基,同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解,而后通过转移的PTH-氨基酸鉴......阅读全文

-Illumina和梅里埃合作推出细菌性感染全基因组测序服务

  抵御抗生素耐药性意味着临床医生们需要小型工具来鉴别出哪种感染是细菌性的,以及引发感染的细菌种类,同时还要揭示出这些细菌对于多种抗生素是否是敏感性的。近日,Illumina公司和生物梅里埃公司(bioMerieux)就通过联合研究推出了一项全基因组测序服务,目的在于改善医源性感染的控制和流行病学的

不同平台的二代测序技术

  二代测序技术基于大规模平行测序技术(massive parallel analysis,MPS),它能同时完成测序模板互补链的合成和序列数据的获取。主要可以分成Roche 454焦磷酸测序、Illumina Solexa合成测序和ABI SOLiD连接法测序。  (1)Roche 454焦磷酸测

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质)

实验材料植物组织试剂、试剂盒苯酚提取缓冲液沉淀液等电聚焦缓冲液仪器、耗材低温粉碎机实验步骤3.1 蛋白质提取( 1 ) 新鲜植物组织在液氮中冷冻,然后在自动低温粉碎机中预先冷却的钢杯中将材料研磨成细碎的粉末(见注释 4) 。( 2 ) 在一个 15 ml 的离心管(falcon  tube) 中加入

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质...

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质)实验实验材料 植物组织试剂、试剂盒 苯酚提取缓冲液沉淀液等电聚焦缓冲液仪器、耗材 低温粉碎机实验步骤 3.1 蛋白质提取( 1 ) 新鲜植物组织在液氮中冷冻,然后在自动低温粉碎机中预先冷却的钢杯中将材料研磨成细碎的粉末(见注释 4) 。( 2 ) 在

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质)

1. 前言提取蛋白质是蛋白质组学研究的第一步。植物组织的蛋白质含量较低,并且存在多种非蛋白质成分,如细胞壁及贮藏多糖、脂质和酚类化合物,使蛋白质的提取难度增大 。植物蛋白质的可溶性与它们的细胞内定位关系密切,传统的蛋白质提取方法是用水合缓冲液、去垢剂或直接沉淀法 [1] 。除了普遍使用的 TCA

《生物化学》――名词解释

       氨基酸(amino acids):  是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物,氨基一般连接在α-碳上。氨基酸是肽和蛋白质的构件分子。  必需氨基酸(essential amino acids):  指人(或其它脊椎动物)自己不能合成,需要从饮食中获得的氨基酸,例如赖氨酸、苏氨酸等

细胞化学词汇凹端

中文名称:凹端英文名称:recessed terminus定  义:由限制性核酸内切酶产生的黏性末端的限制片段中的非突出端的DNA部分。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇黏端

中文名称:黏端英文名称:cohesive end;cohesive terminus;sticky end定  义:双链DNA片段末端的一种形式。其中两条链的3′或5′具有突出的单链末端,这种末端可以与同一DNA片段上另一末端的互补的突出序列相连而形成一个环状分子,或与另一DNA片段形成更大的DNA

细胞化学词汇3′端

中文名称:3′端英文名称:3′-end定  义:DNA或RNA单链带有游离3′-羟基或其磷酸酯的一个末端。一条核酸链通常从5′端到3′端书写。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇平端

中文名称:平端英文名称:blunt end定  义:DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

肢端黑子病例分析

1.病历摘要患者男,51 岁。双手掌、手指伸侧多发黑斑 3 年 余,渐增大增多,表面无破溃史,无瘙痒、疼痛感,于 2016 年 12 月来我科就诊。患者自三四年前双手掌、手 指多处开始出现黑色斑点,随后逐渐增多,斑片面积增 大,无痒痛感,数年内曾就诊于多家医院,都未给予明 确诊断,因担心

细胞化学词汇5′端

中文名称:5′端英文名称:5′-end定  义:DNA或RNA单链带有游离5′-羟基或其磷酸酯的一个末端。一条核酸链通常从5′端到3′端书写。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

凹端的结构特点

中文名称凹端英文名称recessed terminus定  义由限制性核酸内切酶产生的黏性末端的限制片段中的非突出端的DNA部分。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

肢端黑子病例分析

1 病历摘要患者男,51 岁。双手掌、手指伸侧多发黑斑 3 年 余,渐增大增多,表面无破溃史,无瘙痒、疼痛感,于 2016 年 12 月来我科就诊。患者自三四年前双手掌、手 指多处开始出现黑色斑点,随后逐渐增多,斑片面积增 大,无痒痛感,数年内曾就诊于多家医院,都未给予明 确诊断,因担心

中国(广州)分析测试论坛报告集锦(一)

华南师范大学 贾丽教授   来自华南师范大学激光生命科学研究所&激光生命科学教育部重点实验室的贾丽教授带来报告“在线富集毛细管电泳技术及应用”。   首先,贾教授介绍了毛细管电泳仪的基本组成、特点、分离模式和局限性等等。   接着,贾教授以水溶性维生素的富集、核酸的富集和激素类物质的富集为

基因测序的步骤是什么

PCR产物直接测序技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的DNA进行测序,省去了耗时的克隆步骤,避免了传统的细菌培养,模板提取等重复性操作,可以从少量的原始样品中得

基因测序的步骤是什么

PCR产物直接测序技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的DNA进行测序,省去了耗时的克隆步骤,避免了传统的细菌培养,模板提取等重复性操作,可以从少量的原始样品中得

基因测序的步骤

PCR产物直接测序技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的DNA进行测序,省去了耗时的克隆步骤,避免了传统的细菌培养,模板提取等重复性操作,可以从少量的原始样品中得

基因组直接测序法检测甲基化的介绍

  基因组直接测序法是过去一直沿用的DNA甲基化的研究方法,用Maxam—Gilbert化学裂解法对基因组DNA进行处理,并以连接介导的PCR来放大信号强度,然后进行序列分析。此法是基于5mC在标准的Maxam—Gilbert胞嘧啶化学裂解反应中不被裂解,故5mC可通过在测序胶上缺少对应于胞嘧啶降解

科学家开发出高精度纳米孔蛋白测序法

  长期以来,直接读取蛋白质的一级结构存在许多困难。科学家通常会根据基因序列和氨基酸密码子表来“破译”蛋白质的氨基酸序列。由于转录后修饰和翻译后修饰等生命活动的存在,氨基酸序列破译结果并非完全正确,甚至与真实序列有很大差异。近期,荷兰科学家开发出高精度纳米孔蛋白测序法,该技术能够读取蛋白质信息内容,

双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验

试剂、试剂盒 乙酸铵氯仿异戊醇DMSO乙醇NaOH酚测序反应缓冲液琼脂糖凝胶寡核苷酸引物闭环双链质粒 DNA仪器、耗材 干冰-乙醇浴65°C 水浴实验步骤 材料缓冲液和溶液试剂、缓冲液、储液的组成参见附录 1, 储液使用前稀释到适当浓度。乙酸铵(5mol/L, 非缓冲,pH~7.4)氯仿:异戊醇(2

一种全新的高精度纳米孔蛋白测序法

  长期以来,直接读取蛋白质的一级结构存在许多困难。科学家通常会根据基因序列和氨基酸密码子表来“破译”蛋白质的氨基酸序列。由于转录后修饰和翻译后修饰等生命活动的存在,氨基酸序列破译结果并非完全正确,甚至与真实序列有很大差异。近期,荷兰科学家开发出高精度纳米孔蛋白测序法,该技术能够读取蛋白质信息内容,

高通量DNA测序法可绘制全脑神经连线图

美国神经科学家团队提出了一种全新的革命性方法,以获得小鼠的全脑神经元连接图。相关研究成果刊载于10月23日《公共科学图书馆·生物学》杂志上。

双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验

双脱氧链终止法变性模板 分子克隆实验指南(第三版)下册 第12章 方案2下面通过碱变性质粒 DNA 的方法应与方案 3 联合使用,因在此过程中采用测序酶催化双脱氧测序反应。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒乙酸铵氯仿异戊醇DMSO

双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验

            试剂、试剂盒 乙酸铵 氯仿 异戊醇 DMSO 乙醇 NaOH酚 测序反应缓冲液 琼脂糖凝胶

PCRSBT与平常说的测序法有什么不同

其实灭什么不同,PCR-SBT法其实就是普通的第一代测序,而测序法可能有你们平常做的一代测序,还有二代测序

基因组直接测序法检测DNA的甲基化

基因组直接测序法是过去一直沿用的DNA甲基化的研究方法,用Maxam—Gilbert化学裂解法对基因组DNA进行处理,并以连接介导的PCR来放大信号强度,然后进行序列分析。此法是基于5mC在标准的Maxam—Gilbert胞嘧啶化学裂解反应中不被裂解,故5mC可通过在测序胶上缺少对应于胞嘧啶降解反应

科学家开发出高精度纳米孔蛋白测序法

  长期以来,直接读取蛋白质的一级结构存在许多困难。科学家通常会根据基因序列和氨基酸密码子表来“破译”蛋白质的氨基酸序列。由于转录后修饰和翻译后修饰等生命活动的存在,氨基酸序列破译结果并非完全正确,甚至与真实序列有很大差异。近期,荷兰科学家开发出高精度纳米孔蛋白测序法,该技术能够读取蛋白质信息内容,

ABI-3730XL测序平台的原理及特点

  Applied Biosystems 3730XL测序仪是高质量的长片段读取和序列分析的测序平台,应用灵活而广泛。3730XL可同时分析96个样品,该仪器采用4色荧光同时检测,可不间断24小时运行,自动灌胶,上样,电泳分离,检测及数据分析。本仪器除了能够完成新基因测序工作或比较测序工作外,还可进

放射性同位素标记的DNA序列测定分析

测定DNA 的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA 测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA 聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA 核苷酸序列的方法。它要求使用一种