新方法可批量生产高质量DNA分子
据物理学家组织网6月3日(北京时间)报道,瑞典卡罗林斯卡研究所和美国哈佛大学合作开发出一种用于制造短的单链DNA分子的新方法,可以解决许多目前生产中的问题。新方法对DNA纳米技术以及开发由DNA片段组成的药物都很有价值。相关论文发表在最近的科学期刊《自然·方法学》上。 短的单链DNA分子也叫寡核苷酸,这种DNA片段是研究人员的基本工具,在许多科学领域发挥着重要作用。当前的基因和分子生物研究开发领域取得的诸多进步,如生物基因组快速扫描技术,必须依靠寡核苷酸。 新方法也是一种用途广泛的新型制造技术,能解决目前DNA片段生产过程中的限制问题。生产过程是生物生产,通过所用的细菌来复制DNA序列,让人们能以低成本大量地制造DNA副本。“我们已经通过酶催化的生产方法造出了一种系统,不仅能提高寡核苷酸制造的质量,而且利用细菌廉价地生产大量 DNA复制品,也使扩大生产规模成为可能。”合作开发人员、卡罗林斯卡研究所神......阅读全文
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的注意事项
检查时要求:一般认为抗双链DNA的效价与病情相平行,即病情活动时,抗DNA抗体效价升高,病情缓解时,效价降低。由于各地测定的方法不同,所以正常值也不同,一般来说,结合率要大于20%以上才有临床意义。 检测技术的特异性都不是100%的。例如,绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA,但可能含少量组蛋白
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的正常值
Farr法结合活性小于或等于20%。 间接免疫荧光法阴性。 斑点免疫结合试验小于1:40(阴性)。 (注具体参考值请根据各实验室而定。)
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
GeneLink-未修饰的DNA寡核苷酸的价格表
Gene Link寡核苷酸适用于要求苛刻的应用和一致的结果。我们认为,重视时间并且没有因寡核苷酸质量而导致实验失败的空间的研究人员应考虑使用Gene Link。我们针对每种寡核苷酸的众多质量控制步骤可确保您放心。 Gene Link Oligo合成部门不是“寡头工厂”。在合成过程中以及在通
RNA-SI-核酸酶作图
实验材料 [γ-32P」ATP合适的寡核苷酸DNA 模板l10XdNTP 混合物KLenow 片段合适的限 制性内切核酸酶X 射线胶片洗脱缓冲液tRNA 石蜡油S1 核酸酶试剂、试剂盒 10X 激酶缓冲液PNK10X 复性缓冲液6% 聚丙烯酰胺 8mol L 尿素溶液 (溶于 0.5XTBE) 及甲
RNA-SI-核酸酶作图
实验材料 [γ-32P」ATP 合适的寡核苷酸 DNA 模板l 10XdNTP 混合物 KLenow 片段 合适的限 制性内切核酸酶
DNA双链体的结构和功能
中文名称DNA双链体英文名称DNA duplex定 义两条以3′,5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA,通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子,形成超螺旋DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
活人细胞中四链DNA的形成
DNA通常形成经典的双螺旋形状-两股彼此缠绕。实验室中已经形成了其他几种结构,但这并不一定意味着它们在活细胞内形成。先前已在细胞中检测到称为DNA G-四链体的四重螺旋结构。然而,所使用的技术需要杀死细胞或使用高浓度的化学探针来可视化其形成,因此尚未追踪其在正常条件下在活细胞中的实际存
英国研究利用DNA链重建细胞“骨架”
英国伦敦大学学院领导的一项研究使用DNA链人工重建了构成细胞“骨架”的微小管和线状结构,这些结构赋予了细胞形状并支撑其功能实现。研究结果发表在《自然通讯》(Nature Communications)杂志上。 细胞“骨架”由蛋白质构成,可为细胞提供结构支持、帮助细胞移动以及在细胞内运输物质等。
DNA测序——双脱氧链末端终止法
实验方法原理DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3'-OH末端上进行的。由于2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脱氧而失去游离-OH,当它参入到DNA链后,3'-OH末端消失,使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理,将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体,
双链DNA探针随机引物合成法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是:(1)Klenow片段没有5'→3'外切
分子遗传学词汇双链DNA
中文名称:双链DNA英文名称:double-stranded DNA;dsDNA定 义:由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
抗双链DNA抗体参考值
健康人血清1:10稀释为阴性(绿蝇短膜虫法)。 健康人结合率≤20%(放射免疫分析法Farr试验)。 一般以待测血清A值/阴性对照A值(P/N)≥2.1为阳性,正常人P/N值<2.1(ELISA法)。 正常人为阴性(NC膜上不出现着色点)(滴金免疫渗滤试验)。
DNA四链体的结构和分类
中文名称DNA四链体英文名称DNA tetraplex定 义富含鸟嘌呤序列的四链DNA所形成的一种结构。已发现两种主要的类型,一类为重复的鸟嘌呤序列的回折形成的反平行链;另一类由四条独立的平行链相系而成。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇双链DNA结合域
中文名称:双链DNA结合域外文名称:dsDNA-binding domain定 义:双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。作 用:双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA
限制酶切割双链DNA的方式
限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesive terminus);第二种为平整切割。
平行DNA三链体的结构特点
中文名称平行DNA三链体英文名称parallel DNA triplex定 义第三链与双螺旋中的一条链具有相同的序列,且第三链的方向也和双螺旋中的一条链相同的一种DNA三链体结构。这种结构的形成与基因重组过程有关。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇平行DNA三链体
中文名称:平行DNA三链体英文名称:parallel DNA triplex定 义:第三链与双螺旋中的一条链具有相同的序列,且第三链的方向也和双螺旋中的一条链相同的一种DNA三链体结构。这种结构的形成与基因重组过程有关。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
什么是抗双链DNA抗体测定
抗双链DNA抗体测定是对抗双链DNA抗体的测定。抗双链DNA抗体又称为抗天然DNA抗体,是抗核抗体的一种类型,几乎所有红斑狼疮病人都有该抗体的升高。目前认为,它在红斑狼疮的发病中起一定的作用,在一些病人中,DNA的大分子可存在于循环血液中或者粘附于多种器官的微血管上,如肾脏、肺和脑组织,与血液中
双链DNA探针标记法的介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到
抗双链DNA抗体的检测方法
检测抗DNA抗体的方法有多种,如ELISA、IIF、金标法、免疫印记法、放免法等。其中最特异敏感的是应用锥虫或血鞭毛虫(如绿蝇短膜虫)作基质测定抗dsDNA抗体。因为这些血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA,无其他抗原干扰;在阳性结果时,可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。因此该试验用于测定抗
绘图说明pcr技术的主要原理
pcr技术的基本原理: 该技术是在模板dna、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于dna聚合酶的酶促合成反应。dna聚合酶以单链dna为模板,借助一小段双链dna来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链dna模板中的一段互补序列结合
5.5-RNA-SI-核酸酶作图
SI 核酸酶是种内切酶,它是从米曲霉米曲霉 (Aspergillusoryzae) 中分离得到。它能降解单链核酸,却不能降解双链核酸。此外,它能高灵敏度地降解局部错配的双链分子,即使只有一对碱基错配,也能因 S1 核酸酶的切割而被检测出来。用 S1 核酸酶来识别和切割错配或未复性的区域,再通过变性内
核酸分子杂交法介绍
这是最早用于性病诊断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组或质粒DNA。探针以放射核素或非放射性核素标记,以利于杂交信号的检测。 所谓
DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA序列测定2
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法(双脱氧链终止法)和Maxam(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都同样生成相互独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组核苷酸都有共同的起点,却随机终止于一种(或多种)特定的残基,形成一系列以某一特定核苷酸
了解PCR生物学分子技术
1、PCR基本要素 PCR基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。 ①DNA模板:待拷贝的 DNA 称为模板,它可以是双链 DNA 也可是单链DNA,最后扩增得到的产物是双链状态的。 ②引物:是 DNA 复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中