限制酶切割双链DNA的方式
限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesive terminus);第二种为平整切割。......阅读全文
限制酶切割双链DNA的方式
限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesive terminus);第二种为平整切割。
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验
实验方法原理 置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点,它们在中央填充片段的两端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)。实验材料 噬菌体 T4 DNA 连接酶限制性内切核酸酶λ
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验
实验方法原理 置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点,它们在中央填充片段的两端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验
置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点,它们在中央填充片段的两端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理置换型载体
限制性内切酶切割DNA
一、实验目的1.通过对DNA的酶切,学会设计构建体外重组DNA分子;2.根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶;3.掌握DNA的酶切技术。 二、实验原理 限制性内切酶是从细菌中分离出来的一种能在特异位点切割DNA分子的核酸内切酶,目前已从多种细菌中分离出超过400种,识别各自不同
研究揭示Agos蛋白指导导向DNA链切割靶标DNA链的机制
2018年12月27日,《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志在线发表题为Two symmetric arginine residues play distinct roles in Thermus thermophilus Argonaute DNA guide strand-mediated
限制性内切酶切割DNA的原理、仪器试剂和步骤
一、实验目的1.通过对DNA的酶切,学会设计构建体外重组DNA分子;2.根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶;3.掌握DNA的酶切技术。 二、实验原理 限制性内切酶是从细菌中分离出来的一种能在特异位点切割DNA分子的核酸内切酶,目前已从多种细菌中分离出超过400种,识别各自不同的核苷
可被单一限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备...
实验方法原理 在某些情况下,制备好的 λ 噬菌体 DNA 经限制酶的简单消化即可用于克隆。但只有当所用载体能用遗传学方法筛选含有外源 DNA 序列的重组噬菌体时(如 EMBL 系列、λ2001、λDASH、λZAP、λgt10),这种方案才是可行的。因为在这种情况下,不必采取步骤来减少非重组
DNA母链的复制方式
①时期:有丝分裂间期和减数第一次分裂的间期。②场所:主要在细胞核中。③条件:a、模板:亲代DNA的两条母链;b、原料:四种脱氧核苷酸为;c、能量:(ATP);d、一系列的酶。缺少其中任何一种,DNA复制都无法进行。④过程:a、解旋:首先DNA分子利用细胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把两条扭成螺旋的
我国学者揭示Agos蛋白指导导向DNA链切割靶标DNA链机制
近日,《Proceedings of the National Academy of the Sciences of the United States of America,PNAS》杂志在线发表题为“Two symmetric arginine residues play distinct
可被单一限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA制备实验
实验方法原理 在某些情况下,制备好的 λ 噬菌体 DNA 经限制酶的简单消化即可用于克隆。但只有当所用载体能用遗传学方法筛选含有外源 DNA 序列的重组噬菌体时(如 EMBL 系列、λ2001、λDASH、λZAP、λgt10),这种
可被单一限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA制备实验
在某些情况下,制备好的 λ 噬菌体 DNA 经限制酶的简单消化即可用于克隆。但只有当所用载体能用遗传学方法筛选含有外源 DNA 序列的重组噬菌体时(如 EMBL 系列、λ2001、λDASH、λZAP、λgt10),这种方案才是可行的。因为在这种情况下,不必采取步骤来减少非重组噬菌体的形成。本实验来
DNA双链末端的概念
中文名称平端英文名称blunt end定 义DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
双链DNA的结构特点
中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定 义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
双链互补DNA的定义
中文名称双链互补DNA英文名称double-strand cDNA;dscDNA定 义以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
双链DNA的结构特点
中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定 义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
双链DNA探针标记法
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连
细胞化学词汇双链DNA
中文名称:双链DNA英文名称:double-stranded DNA;dsDNA定 义:由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
DNA限制酶的功能和作用
限制性核酸内切酶(以下简称限制酶):限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶(“分子手术刀”)。发现于原核生物体内,现已分离出100多种,几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组DN
抗双链DNA抗体(aniDNA)的简介
抗DNA抗体包括抗双链DNA抗体、抗单链DNA抗体和抗zDNA抗体。 检验中一般是指与双链DNA和单链DNA都反应的抗双链DNA抗体。 抗双链DNA抗体阳性是系统性红斑狼疮的标志,阳性率达90%以上,有较高的特异性,因而抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断和治疗监控极重要。抗双链DNA抗体在其
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3端
实验材料 限制性内切核酸酶T4 噬菌体 DNA 聚合酶模板 DNA试剂、试剂盒 醋酸氨乙醇酚氯仿T4 噬菌体 DNA 聚合酶缓冲液dNTP 溶液仪器、耗材 Sephadex G-50 离心柱水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液醋酸氨(10 mol/L)乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3端
实验材料 限制性内切核酸酶 T4 噬菌体 DNA 聚合酶 模板 DNA 试剂、试剂盒 醋酸氨
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3端
实验材料限制性内切核酸酶T4 噬菌体 DNA 聚合酶模板 DNA试剂、试剂盒醋酸氨乙醇酚氯仿T4 噬菌体 DNA 聚合酶缓冲液dNTP 溶液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱水浴实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液醋酸氨(10 mol/L)乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲液适当的
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称,该所科学家和洛克菲勒大学合作,成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究,为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称,该所科学家和洛克菲勒大学合作,成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究,为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA
细胞化学词汇双链互补DNA
中文名称:双链互补DNA英文名称:double-strand cDNA;dscDNA定 义:以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
双链DNA探针标记法介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。1. 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的