葡萄糖氧化酶的生产及其在工业中的应用
葡萄糖氧化酶(GOD)是一种需氧脱氢酶,属氧化还原酶,能够在有氧环境下,专一氧化β-D-葡萄糖为D-葡萄糖酸-δ-内酯和过氧化氢,D-葡萄糖-δ-内酯又以非酶促反应方式自发水解为葡萄糖酸。早期GOD命名为β-D-吡喃葡萄糖氧化酶或β-D-吡喃葡萄糖需氧脱氢酶,后来简称为葡萄糖氧化酶,1961年国际生化协会酶委员会将其系统命名为β-D-葡萄糖,分子式为C6H12O6,欧盟系统编号为EC 1.1.3.4[ 1 ]。在1904年,人们就发现了GOD,但当时没有引起足够的重视[ 2 ]。直到1928年,Muller首先从黑曲霉菌丝体经压汁处理后的无细胞提取液中发现了GOD,进行了葡萄糖酸形成的酶学研究,并进一步研究了其作用机理。此后Nakamatsu、Fiedurek、Rogalski等先后对GOD做了大量研究工作并投入生产。后来各国学者又相继在拟青霉属、胶霉属及帚霉属等中也提纯出了GOD。20世纪40年代就开始有GOD产品出售。50年......阅读全文
临床生化试剂检测中的各种交叉污染
第一类:前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。 此时残留的污染物被带入下一测试中,与该测试的试剂反应,可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确,并且可以定量分析。 主要项目有: 1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果
临床生化试剂检测中的各种交叉污染
第一类:前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。此时残留的污染物被带入下一测试中,与该测试的试剂反应,可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确,并且可以定量分析。主要项目有:1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。 2. CK
临床生化试剂检测中的各种交叉污染
第一类:前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。此时残留的污染物被带入下一测试中,与该测试的试剂反应,可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确,并且可以定量分析。主要项目有:1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。2. CK-
临床生化试剂检测中的各种交叉污染
第一类:前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。此时残留的污染物被带入下一测试中,与该测试的试剂反应,可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确,并且可以定量分析。主要项目有: ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。 2. CK-N
血糖酶法测定法的主要特点是什么
目前血糖测定主要采用酶法,包括: ①已糖激酶法,该法准确度和精密度高,特异性高于葡萄糖氧化酶法,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法; ②葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法,该法准确度和精密度都能达到临床要求,并且操作简便,适用于常规检验; ③葡萄糖氧化酶-极谱分析法,该法是GOD-POD的改
血糖酶法测定法的特点
目前血糖测定主要采用酶法,包括: ①已糖激酶法,该法准确度和精密度高,特异性高于葡萄糖氧化酶法,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法; ②葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法,该法准确度和精密度都能达到临床要求,并且操作简便,适用于常规检验; ③葡萄糖氧化酶-极谱分析法,该法是GOD-POD的改
葡萄糖氧化酶的测定
实验方法原理 GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶。酶实验是通过与过氧化物酶(POD)偶联的一个反应序列中进行的,其供体是邻联二茴香胺:实验材料 过氧化物酶试剂、试剂盒 磷酸钾邻联二茴香胺葡萄糖仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml
葡萄糖氧化酶测定实验
实验方法原理GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶。酶实验是通过与过氧化物酶(POD)偶联的一个反应序列中进行的,其供体是邻联二茴香胺:实验材料过氧化物酶试剂、试剂盒磷酸钾邻联二茴香胺葡萄糖仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品记
葡萄糖氧化酶测定实验
基本方案 实验方法原理 GOD,β-D-葡萄糖:氧1-氧化还原酶。酶实验是通过与过氧化物酶(POD)偶联的一个反应序列中进行的,其供体是邻联二茴香胺:
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细胞中进行的糖酵解使血中葡萄糖
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细胞中进行的糖酵解使
为什么葡萄糖氧化酶和溶菌酶可用于食品保鲜
葡萄糖氧化酶(GlucoseOxidase,简称GOD)是一种需氧脱氢酶,能专一地氧化β-D-葡萄糖成为葡萄糖酸和过氧化氢。广泛应用于食品保鲜、医疗诊断、饲料等行业。高纯度葡萄糖氧化酶为淡黄色粉末,易溶于水,不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有机溶剂,50%丙酮、60%甲醇能使其沉淀。一般
葡萄糖检测试剂盒原理
1. 己糖激酶法(HK法) 葡萄糖 + ATP G-6-P+ ADP G-6-P + NAD+ 6-磷酸葡萄糖+NADH + H NADH在340/380nm的吸光度变化与标本中存在的葡萄糖数量成正比,可在340/380nm波长处进行吸光度测定,同时与标准品吸光度比较,从而计算出样本中葡萄
尿海藻糖酶的测定方法
酶活性的测定1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标
尿海藻糖酶的测定方法
一、酶活性的测定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。 2. 步骤 将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1
显色液A和B在elisa试剂盒检测中作用起底
酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent,ELISA)是20世纪70年代发展起来的一种检查技能,因其具有灵敏性高、特异性强、操作简略等长处,被广泛运用于各种抗原和抗体的测定,为辅助临床确诊与生物科研起到了活跃的效果。elisa试剂盒检查中显色液A和B有啥效果酶联免疫确诊
Nature聚焦NIH新任掌门人
NIH新任院长候选人Francis Collins经白宫提名后备受瞩目,当然,科学界有赞誉也有批判之声。近日,Nature就发表了一篇文章,从众多科学家的眼中来了解这位新任掌门候选人。 NIH前任院长之一Harold Varmus(任期为1993-1999年,现任Memorial Sloa
案例分析:捉拿“元凶”尿酸
尿酸在人体内无处不在,血液和尿液中广泛分布,人体内嘌呤(purine)代谢的最终产物,也是还原剂之一,在检验这一行听得最多的莫过于血尿酸和尿尿酸。这一常见的存在于人体内的代谢产物,在高尿酸血症以及痛风的过程中发挥着重要的作用。然而,在医学检验这一行更要处处“提防”,因为它被考虑是种干扰剂,严重影响检
免疫酶细胞化学实验技术
免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色
研究声称探测到暗物质粒子遭质疑
有传闻说CDMS粒子探测器已经发现了暗物质。(图片提供:Fermilab) 最近在博客圈中一直流传着一种说法:一个物理学家小组可能已经最终探测到暗物质粒子——一种通过自身引力将星系聚合在一起的神秘物质。如果这个传闻是真的,那么绝对算是有史以来最重要的发现之一。但是现在还不要急着预定飞往
成体巨核细胞谱系的空间和功能多样性
近日,中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)研究员王前飞研究组,首次绘制了小鼠巨核细胞的单细胞转录组图谱,揭示了体内巨核细胞在分子、空间分布及功能上的异质性,在此基础上提出了一种新的巨核细胞分类系统,而免疫巨核群体可能是一个新型造血分支。 以往研究对巨核细胞功能的认识局限于产生具有止血
只知其一不知其二,居然还有PDL2
PD-L2是什么鬼? PD-1蛋白目前有俩同伙:一个是大家熟知的PD-L1,另一个叫做PD-L2,或许以后还有PD-L3等等,God才知道还有没有PD-L4。 PD-1主要表达在免疫细胞上,PD-L1表达在免疫细胞细胞和肿瘤细胞上,而PD-L2主要表达在免疫细胞上。所以,相比于PD-L1,P
免疫酶细胞化学实验技术2
(四)染色原理及步骤 1.基本原理 酶标抗体与荧光色素标记抗体的染色相同,亦分直接法和间接法。直接法是将酶直接标记在每一抗体上,间接法是将酶标记在第二抗体上,检测组织细胞内的特定抗原物质。间接法所用的第一抗体是对组织细胞内某种抗原的特异性抗体(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而绝大数单克隆
双波长双试剂二点法测定血糖的方法研究
随着全自动生化分析仪的引进和使用,使双波长双试剂二点法测血糖方法易于推广应用。我院自2002年引进美国BECKMAN COULTERLX20自动生化分析仪后,我们进行了双波长双试剂二点法测定血糖的方法研究,经过2 a来的使用,效果良好,该方法经与BECKMANCOULTERLX20
迈瑞bs2000技术参数
广东中医院大学城医院是广东省中医院分院,占地面积8万平方米,建筑面积13.6万平方米,编制床位900张。该院检验科就迈瑞BS-2000M全自动生化检测系统进行了详尽的临床评估。该研究成果学术论文“迈瑞最新高速生化BS-2000M检测系统评估报告”形式,在国际期刊《Clinical Biochem
自动生化分析仪项目设置顺序探讨
[摘 要] 自动生化分析仪的普及应用,为生化质量控制整体水平的提高奠定了良好的基础,随着质量控制标准的进一步提高,对影响实验结果各种因素的进一步研究,项目设置顺序是影响实验结果的又一重要因素,仪器使用时间越长影响越明显。并初步总结经验,给出了一个最佳设置顺序。 [关键词] 自动生化分析仪;项目
如何测定葡萄糖氧化酶的活性
测酶活性的实验:.用萃取化学公司法(Amano法的改进型)测定葡萄糖氧化酶(1)试剂①磷酸盐缓冲液(pH7.0):取6.805g磷酸二氢钾(KH2PO4; Merck, Art.4873)溶于350mL蒸馏水中。用1M氢氧化钠溶液(NaOH (4g溶于100ml水))将pH值调至7.0,用蒸馏水定容
自动生化分析仪项目设置顺序探讨
[摘 要] 自动生化分析仪的普及应用,为生化质量控制整体水平的提高奠定了良好的基础,随着质量控制标准的进一步提高,对影响实验结果各种因素的进一步研究,项目设置顺序是影响实验结果的又一重要因素,仪器使用时间越长影响越明显。并初步总结经验,给出了一个最佳设置顺序。 [关键词] 自动生化分析仪;项目设
全自动生化分析仪常用试剂间的相互干扰和应对措施1
在使用全自动生化分析仪的过程中,我们经常会遇到这样的情况:单独做某个项目时结果没有问题,可是将它与某些项目组合在一起时,结果却出现异常。其中的原因是全自动生化分析仪的清洗系统随着仪器使用时间的累加,清洗效果逐渐下降,试剂交叉污染的程度增加所致。全自动生化分析仪各试剂间的相互干扰影响到了检验结果的准确