木聚糖酶的来源

木聚糖酶的来源 木聚糖的结构复杂,在主链上常常连有种类不一的支链,因而要降解利用木聚糖,亦需要相应的各种酶的作用。木聚糖酶广义上说是一种多聚复合酶,是能降解木聚糖的一类酶的总称。它在自然界中来源极为广泛,存在于细菌、真菌、蜗牛、甲壳动物、反刍动物、海洋藻类、陆地植物组织等。被报道的产木聚糖酶的微生物有木霉、曲霉、青霉、链霉菌、细菌等,其中被研究较多的是木霉、曲霉、细菌所产生的木聚糖酶,且不同来源的木聚糖酶,它们的酶学性质也有所差异。......阅读全文

什么是工具酶呢?工具酶都有哪些?

作为试剂用于测定化合物浓度或酶活力的酶称为工具酶。对于底物或产物不能直接测定或难于准确测定的酶促反应,采用酶耦联法测定。1.NAD(P)十或NAD(P)H偶联的脱氢酶及其指示反应。2.偶联H2O2的工具酶及其指示反应有些酶作用于底物时,可使其氧化产生H2O2,在POD的作用下使色素原氧化显色进行测定

生物酶学基础同工酶简介

概述  同工酶 (isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会(CBN)的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶(LDH)同工酶,用电泳方法将LDH同工酶分离,

生物酶学基础酶的催化特性

酶的催化特性酶和一般化学催化剂相比,酶具有下列的共性和特点。1 共性酶与一般催化剂相比,具有下面几个共性:①具有很高的催化效率,但酶本身在反应前后并无变化。酶与一般催化剂一样,用量少,催化效率高;②不改变化学反应的平衡常数。酶对一个正向反应和其逆向反应速度的影响是相同的,即反应的平衡常数在有酶和无酶

重组酶聚合酶扩增(RPA)技术简介

核酸检测革命:可替代PCR的犀利技术——RPA重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA

生物酶学基础蛋白酶简介

水解蛋白质肽键的一类酶的总称。按其水解多肽的方式,可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断,形成分子量较小的月示和胨。外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解,而游离出氨基酸,前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶。按其活性中心和最适pH值,又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋

生物酶学基础固定化酶简介

固定化酶固定化酶及制备原则固定化酶固定化酶是20世纪50年代开始发展起来的一项新技术,最初是将水溶性酶与不溶性载体结合起来,成为不溶于水的酶的衍生物,所以曾叫过“水不溶酶”(water insoluble enzyme)和“固相酶”(solid phase enzyme)。但是后来发现,也可以将酶包

能量运输的关键ATP酶与GTP酶

ATP与ATP酶:ATP酶,又称为三磷酸腺苷酶,是一类能将三磷酸腺苷(ATP)催化水解为二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根离子的酶,这是一个释放能量的反应。在大多数情况下,能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。部分ATP酶是内在膜蛋白(Integral

异相酶免疫试验和均相酶免疫试验

  Ag为待测抗原,AgAb-E为结合标记物,Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失,即结合标记物(AgAb-E)无酶活性,游离标记物(Ab-E)有酶活性;  (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E

生物酶学基础酶的化学本质

酶的化学本质酶(enzyme)是由活生命机体产生的具有催化活性的蛋白质,只要不是处于变性状态,无论是在细胞内还是在细胞外,酶都可发挥其催化作用。关于酶是否蛋白质的问题,在20世纪初曾有过争论。1926年萨姆纳(Sumner)首次从刀豆提取液中分离纯化得到脲酶结晶,并证明它具有蛋白质的性质,提出酶的本

猪胰蛋白酶酶活力的测定

实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000,其等电点约为pH8.9,胰蛋白酶的分子量与其酶原接

酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多,非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术,其中以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent aay,ELISA)最常用,它可用于测定抗体,也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下

如何选择合适细胞的消化酶重组胰酶和动物源胰酶

培养细胞的老师们都知道细胞的生命是极其脆弱的在培养过程中有哪些行为是比较伤害细胞的呢?在培养贴壁细胞过程中消化过程在一定程度上是对细胞的一种折磨但是又不得不进行这个过程所以如何做好细胞消化善待细胞们是我们一定要了解的步骤~ 胰酶的作用原理胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基

诊断酶学

本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代ALP仍是

诊断酶学

诊断酶学:本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代

诊断酶学

本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代ALP仍

什么是酶?

酶(enzyme)指的是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。

酶标记抗体

酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(

酶活性定义

酶活性指的是有机体的生命活动表现了它内部化学反应历程的有序性,这种有序性是受多方面因素调节的,一旦破坏了这种有序性,就会导致代谢紊乱,产生疾病,甚至死亡。酶活力受到调节和控制是区别于一般催化剂的重要特征。

酶切实验

实验方法原理 采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单,但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同(主要是盐离子浓度不同)或反应温度不同,这时可以采用如下措施解决:1)先用一种酶切,然后乙醇沉淀回收DNA分子后再用另

酶的介绍

酶(enzyme)是活细胞内产生的具有高度专一性和催化效率的蛋白质,又称为生物催化剂,生物体在新陈代谢过程中,几乎所有的化学反应都是在酶的催化下进行的。细胞内合成的酶主要是在细胞内起催化作用,也有些酶合成后释入血液或消化道,并在那里发挥其催化作用,人工提取的酶在合适的条件下也可在试管中对其特殊底物起

酶切实验

酶切可用于:(1)获得粘性末端进行连接;(2)验证DNA重组是否成功;(3)验证质粒酶切位点是否有效。实验方法原理采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单,但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同(主要是盐离子浓度

DNA酶切

一、 DNA酶切反应   1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶

胆酶分离

基本概述什么是“胆酶分离”?具体的说,“胆酶分离”通常是指在肝炎发展过程中,由于肝细胞的大量坏死,对胆红素的处理能力进行性下降,因此出现上升;同时转胺酶由于已经维持相当长时间的高水平,从而进行性耗竭,因此出现ALT下降,转氨酶不高。这种转氨酶现象就是所谓的“胆酶分离”。转氨酶的高低变化对于肝炎病人来

胰激肽原酶

制法要求本品应从检疫合格的猪胰中提取,生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品来源于动物,在生产过程中应采用适宜的病毒灭活工艺等方法进行病毒安全性控制。性状本品为白色或类白色粉末;无臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中几乎不溶鉴别(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液

脂酶试验

  (1)原理:有些细菌产生脂酶,可分解脂肪成游离的脂肪酸。在培养基中加入维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物,如果脂肪被分解,则维多利亚蓝被释放出来,呈现深蓝色。   (2)培养基:含维多利亚蓝的脂酶培养基。   (3)方法:将待检菌接种于含维多利亚蓝的脂酶培养基中,置37℃孵育24h,观察结

DNA酶切

一、 DNA酶切反应   1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在

脂酶试验

脂酶试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。  (1)原理:有的细菌产生脂酶,可分解脂肪成游离的脂肪酸。从而使培养基中与脂肪结合形成无色化合物的维多利亚蓝释放出来,呈现深蓝色。  (2)培养基:脂酶培养基(含维多利亚蓝)。  (3)方法:将被检菌接种于上述培养基中,于37℃培

尿素酶试验

尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm

DNA酶试验

DNA酶试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。(1)原理:某些细菌产生DNA酶,可使长链DNA水解成寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀,寡核苷酸链则溶于酸,所以当在菌落平板上加入酸后,会在菌落周围出现透明环。(2)培养基:0.2%DNA琼脂平板。(3)方法:将被检菌点种于

酶解法原理

(1)实验过程中,需要轻摇试管,以使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果.(2)蜗牛以植物为食,所以唾液中含有果胶酶和纤维素酶,I、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组.其目的是排除无关变量的干扰.(3)离心后收集沉淀物,并用等渗溶液清洗,目的是保持细胞正常形态.(4)要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要