酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于细胞ELISA
应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多，非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术，其中以酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent aay，ELISA）最常用，它可用于测定抗体，也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下着重介绍ELISA（包括双抗体夹心法、细胞ELISA和斑点ELISA）和免疫酶组化技术（APAAP法）。 基本原理：先将以知的抗体或抗原结合在某种固相载体上，并保持其免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应，再用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离成分，然后加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量。 细胞ELISA 该方法将细胞视为固相载体。多用于检测细胞表面的抗原或受体或筛选细胞表面抗原的特异性抗体。 【试剂及配制】 （1）洗涤液（pH 7.4 ) KH2PO4 ......阅读全文
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于细胞ELISA
应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多，非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术，其中以酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent aay，ELISA）最常用，它可用于测定抗体，也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于斑点ELISA（dotELISA）
操作简便，不需要特殊仪器（酶联检测仪）。【试剂及配制】(1) 稀释液：为1%A的0.01mol/L pH7.4的。(2) 封闭液：为2% A的0.01mol/L pH7.4的。(3) 洗涤液：为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。(4) 底物溶液：见附录。【操作方法】(1)
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于双抗体夹心法ELISA
该法多用于检测多价大分子抗原，但不能用于检测半抗原等小分子物质。 【试剂及配制】 （1） 包被液（pH 9.6 碳酸盐缓冲液） Na2CO3 0.16g NaHCO3 0.29g 蒸馏水加至 100ml (2)稀释液(pH 7.4 -Tween 20) KH2PO4 0.
酶标抗体标记效果测定
酶标抗体标记效果测定：测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
抗体捕获酶标抗体法测定抗体的介绍
抗体捕获酶标抗体法测定抗体，血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法。先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，去除IgG后再测定特异性IgM。将抗IgM抗体连接在固相载体上，洗涤后加入稀释的血清标
酶标抗体结合物的纯化
在酶标记的溶液中，出现的是各种交联物的混合物，有酶-抗体、酶-抗体-酶、抗体-抗体、酶-酶，甚至还有游离的酶和抗体。在这中间，除了抗体-酶和酶-抗体-酶外，其它都应该给予除去。1、50%饱和硫酸铵沉淀法。此法只能除去游离的酶及酶-酶聚合体。而不能除去其它不需要者。但是此法对酶标抗体的损耗少。2、过S
双抗体夹心酶标抗体法的相关介绍
双抗体夹心酶标抗体法是检测抗原最常用的方法。将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体，洗涤除去未结合的抗体及杂质。加受检标本，使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。加酶标抗体使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合，彻底
酶标抗体的质量鉴定与保存
1．酶活性和抗体效价测定： 采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2．酶量和IgG量： 酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4 IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94
酶标抗体的质量鉴定与保存
1． 酶活性和抗体效价测定采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。2． 酶量和IgG量酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94′0.62其中，0.42为酶蛋白本身
酶标抗体的质量鉴定与保存
1． 酶活性和抗体效价测定 采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2． 酶量和IgG量 酶量（mg/ml）=OD403´0.4 IgG量（mg/ml）=（OD280-OD402´0.42）´0.94´0.62
关于酶标抗体法的基本介绍
酶标抗体法，又名酶联免疫吸附法（ELISA），利用酶标记抗原或抗体以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其基本原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性，而相对应的抗体或抗原与某种酶连接成酶标抗体或抗原，酶标抗体或抗原既保留了免疫活性可以与固相载体表面的抗原或抗体结合，又保留
人抗胰岛细胞抗体(AICA)酶联免疫分析（ELISA）
人抗胰岛细胞抗体(AICA)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中抗胰岛细胞抗体(AICA)的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗胰岛细胞抗体(AICA)水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相
竞争酶标抗体法测定抗体的基本介绍
竞争酶标抗体法测定抗体，可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体，洗涤后加入受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗原
人抗中性粒细胞抗体（ANA)酶联免疫分析（ELISA）
人抗中性粒细胞抗体（ANA)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中抗中性粒细胞抗体（ANA)的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗中性粒细胞抗体（ANA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相
酶标抗体法—转基因检测的介绍
检测转基因物质的双抗体夹心ELISA具备多克隆抗体费用较低。单克隆抗体亲和力高的特点，使得后续研究开发的试剂盒检测成本低廉，灵敏可靠，而且可以稳定、方便地提供标准化试剂，便于实现工业化生产。双抗体夹心ELISA检测方法的研究和建立，为制备免疫胶体金试纸条提供了便利，为建立转基因动物的现场、快速查
酶标抗体法检测农药残留的介绍
农药残留常用的快速检测方法有酶抑制法和ELISA。酶试剂易失活导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性差。ELISA法操作步骤简便，适用于样品量较大的分析筛选，但是ELISA受限于抗体和抗原的制备和提取。已建立检测毒死蜱残留的ELISA方法，检测DDT及其相关化合物的ELISA方法，测定套种氰戊
酶标抗体法—兽药残留检测的方法
兽药残留常用的方法有微生物法、仪器分析法、微生物法适用于对畜禽组织中的抗菌药物进行筛选检验，该方法虽然能检测高浓度的残留，但是检测限高于样品所规定的的最高残留限量。因此ELISA成为广泛应用的快速检测兽药残留的方法。已建立检测动物组织中的呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法，检测呋喃唑酮代谢
酶标抗体法—生物毒素检测的介绍
酶标抗体法—生物毒素检测：以免疫学为基础的检测方法如ELISA具有实验周期短、设备简单、操作简便等特定而被广泛应用。已建立检测黄曲霉毒素B1直接竞争ELISA法，检测猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的直接竞争ELISA法，基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析检测赭曲霉毒素A的方法等。
elisa筛选时需要到多少酶标二抗
酶标二抗常规包装为100ul(都是浓缩液).用于ELISA的时候,稀释比为一万到十万,最低的也可以达到一千.就以最低的算,100ul也可以稀释成100ml.(当然一般是用多少稀释多少,不要一次配完).这样一个孔加入100ul.可以用十块板.这都是以最低的量计算.实际上应该可以做更多的板子.如果你不是
ELISA实验不可忽视的小细节—酶标板
根据不同的分类标准，酶标板有着不同的分类。一、根据孔数，可分为96孔、48孔等，由于酶标板主要是配合酶标仪用，目前市面上的酶标仪最多为96孔，因此酶标板最为常用的也是96孔。二、根据其底部的不同，又分为平底的，U型底、V型底等。平底的折射率低，适于在酶标仪检测；U型底的酶标板折射率较高，方便加样、吸
ELISA检测试剂盒—酶标板分类
一、根据孔数，可分为96孔、48孔等，由于酶标板主要是配合酶标仪用，目前市面上的酶标仪最多为96孔，因此酶标板最为常用的也是96孔。二、根据其底部的不同，又分为平底的，U型底、V型底等。平底的折射率低，适于在酶标仪检测；U型底的酶标板折射率较高，方便加样、吸样、混匀等操作，可以不用放在酶标仪上，直接
间接酶标抗体法的基本信息介绍
间接酶标抗体法，主要是利用酶标记的抗抗体检测已与固相结合的受检抗体，是检测抗体最常用的方法。将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原，洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入稀释的受检样品（如血清），样品中特异性抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及
酶标抗体法—重金属检测的简介
重金属检测方法有原子吸收光谱法、原子荧光法、阳极溶出伏安法、催化极谱法和电感耦合等离子体质谱法，这些方法均不能满足快速检测的要求。而酶标抗体法可提高检测速度。建立了检测重金属镉的间接竞争ELISA法，Pb和Cr的间接竞争ELISA，一步竞争ELISA对环境水样中的Cd检测等。
酶标抗体法—致病微生物检测的介绍
不论是在发展中国家还是发达国家，对食品安全影响较大的是致病微生物引起的食源性疾病，而在人们食物链中，单增李斯特菌、空肠弯曲菌、沙门氏菌都是重要的食源性致病菌。已建立检测沙门氏菌的双抗夹心ELISA法，检测单增李斯特菌的ELISA法，耐热菌间接竞争ELISA快速检测方法等。
改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体
HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基，再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联，在标记前先用2，4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后，再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶
酶标板如何处理，增加抗体结合能力？
根据酶标板与蛋白和其它分子结合能力的不同可以将酶标板分为以下几类： 1 高结合力酶标板：酶标板经表面处理后蛋白结合能力大大增强，可达300~400ng IgG/cm2，主要结合的蛋白分子量＞10kD。使用该类酶标板可提高敏感性，并可相对减少包被蛋白的浓度和用量，不足之处为较易产生非特异性反应。抗
牛口蹄疫抗体酶联免疫分析（ELISA）
牛口蹄疫抗体酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中口蹄疫抗体水平。实验原理： 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中牛口蹄疫抗体。用纯化的口蹄疫抗体抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中口蹄疫
细胞免疫化学：免疫酶标技术
1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟，镜下控制染色
采用酶标法（ELISA）进行三聚氰胺检测
本实验方案采用Thermo Scientific的Multiskan MK3型酶标仪和Wellwash 4MK2型洗板机（由北京平利洋公司提供），，结合Abraxis三聚氰胺检测试剂盒，以竞争法测抗原的原理对液态奶或奶粉中的三聚氰胺进行检测分析。一、样品准备 巴氏消毒全脂奶（液体）： 1）用稀释液以
人产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG酶联免疫分析（ELISA）
人产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG水平。用纯化的人产细胞毒素幽