研究利用噬菌体蛋白介导抗生素高效靶向病原菌
在细菌耐药性日益严重的全球背景下,传统抗生素的有效性正面临严峻挑战。特别是被称为ESKAPE的病原体,其强大的抗生素耐药性和毒性给全球公共卫生安全带来了前所未有的威胁。这些病原菌携带抗生素耐药基因,毒性很强,可引起危及生命的感染。更糟糕的是,过去20年中,新批准的首创抗生素数量一直在稳步减少,尤其是用于治疗革兰氏阴性病原体感染的抗生素。因此,迫切需要针对耐药菌感染的新型治疗策略,而更快、更便宜的获取方法可能是重新利用现有的抗生素。6月20日,《自然—通讯》在线发表了四川农业大学动物医学院赵兴洪/万红平团队的研究论文。为有效应对耐药菌感染的问题,该研究首创了以病原菌特异性噬菌体受体结合蛋白(RBPs)和内溶素细胞壁结合域(CBDs)作为药物递送系统靶向模块实现抗生素体内精准高效递送的新策略。研究以基因工程手段获得的肺炎克雷伯菌噬菌体RBP和金黄色葡萄球菌噬菌体内溶素CBD作为纳米药物载体的靶向模块,分别将抗菌药物精准高效递送至了肺......阅读全文
噬菌体抗体ELISA
噬菌体抗体ELISA 噬菌体ELISA快速而便捷,尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。不过,后续的抗体检测总是要以其可溶性形式进行。 [器材和试剂] ● 96孔ELISA板,例如Nunc maxisorb442404(可自VWR购得) ● 2%M ● /Tw
噬菌体抗体ELISA
实验概要噬菌体ELISA是一种快速而便捷的方法,尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。主要试剂1. 2%MPBS2. PBS/Tween3. 辣根过氧化物酶(HRP)标记的小鼠抗噬菌体单克隆抗体(mAb)(Amer Sham BiOSCiences)4. 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)
噬菌体展示技术
1985年,Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ,使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面,从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内,即在噬菌体表面展示特定蛋白质,而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另
怎样培养噬菌体
将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养,一般培养16~24小时。2. 将噬菌体原液100 μl 与寄主细菌悬浮液300 μl均匀混合,静置15分钟使其感染。3. 将混合液接种至含10 ml新鲜液体培养基的试管中,于适当温度下振荡培养约8~24小时,培养时间依噬菌体之不同而异。4. 将培养液移入
噬菌体检查
病原体是许多疾病的主要诱因,对人类健康构成了严重威胁。近年来,食品、水源和环境中致病微生物已造成世界上许多流行病的爆发。因此,为了控制病原体的传播并减少流行病的发生,检测致病微生物的技术的成熟可行性显得尤为重要。 培养物细菌分离和鉴定是实验室检测病原体的“金标准”方法。该检测方法虽然足够灵敏,
噬菌体的特点
噬菌体(phage)是侵袭细菌的病毒,也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体必须在活菌内寄生,有严格的宿主特异性,其取决于噬菌体吸附器官和受体菌表面受体的分子结构和互补性。噬菌体是病毒中最为普遍和分布最广的群体。通常在一些充满细菌群落的地方,如:泥土、动物的肠道里,都可以找到噬菌体。噬菌体(ba
噬菌体培养法
一. 液体培养法1. 将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养,一般培养16~24小时2. 将噬菌体原液100 μl 与寄主细菌悬浮液300 μl均匀混合,静置15分钟使其感染。3. 将混合液接至含10 ml新鲜液体培养基的试管中,于适当温度下振荡培养约8~24小时,培养时间依噬菌体之不同而异。
植物分辨病原菌和有益菌
丹麦奥尔胡斯大学以及其他研究所的科学家发现,植物生物分子互作可帮助它们正确分辨有益菌和病原菌。 国际研究团队整合生物化学、化学选择和微生物遗传学等研究手段,发现豆科植物百脉根根瘤菌分泌的特殊修饰几丁质分子物质(Nod因子)和病原菌分泌的几丁质。植物的检测通过位于细胞表面的受体蛋白质配体发生
植物病原菌的分离所需器材介绍
1.分离材料:梨黑斑病(Alternaria kikuchiana),柿树圆斑病(Pestnlotia sp)及杉木炭疽病(Glomerella cingolata)新发病的病叶;杨树烂皮病(Cytospora chrysosperma)国槐腐烂病(Dothiorella sp.)的带有新病斑的枝条
植物病原菌的分离的实验目的
植物病原菌的分离培养是植物病理学实验最基本的操作技术之一,它对原害鉴定,病原形态观察、植物病害接种体的培养等方面都是经常使用的研究手段。通过本实验,要求植物病原菌分离培养的一般原则和方法。
疑难病例病原菌的检测体会
近几年来,经常发现临床病人反复感染,但是找不到病原菌。最近我室会诊了1例老年病人,因反复下呼吸道感染,3次住院、出院,均未治愈。原就诊医院在痰标本中,始终未发现致病菌,仪凭经验使用多种抗菌药物,效果不佳。 为此,本室参加了临床会诊,首先通知病人全部停用2d抗菌药物;床边留取脓痰、立即接
对ICU病房病原菌的检测分析
感染是ICU病房内病人导致多器官功能衰竭和死亡的主要因素,发生率明显高于普通病房[1],而控制感染主要是对病原菌采用有效的抗菌治疗。近年来,随着第三代头孢菌素等抗生素的广泛应用和耐药菌株的增加,病原菌在构成和药物感敏性上都发生了较大的变化,而ICU病房病人病情危重,多数无法获得病原学依据后才用药,经
新研究阐释病原菌毒力调控机制
近日,华东理工大学生物工程学院教授王启要课题组在病原菌毒力调控方面取得新进展,相关研究发表于《核酸研究》。如果将细菌核心基因组比作细菌内部的原住民,那么细菌进化的主要驱动力就是水平转移基因元件(入侵者)不断与原住民融合,从而赋予或增强细菌致病性和环境适应性等特性。三型分泌系统(T3SS)、六型分泌系
新研究阐释病原菌毒力调控机制
近日,华东理工大学生物工程学院教授王启要课题组在病原菌毒力调控方面取得新进展,相关研究发表于《核酸研究》。如果将细菌核心基因组比作细菌内部的原住民,那么细菌进化的主要驱动力就是水平转移基因元件(入侵者)不断与原住民融合,从而赋予或增强细菌致病性和环境适应性等特性。三型分泌系统(T3SS)、六型分泌系
植物病原菌的分离的实验原理
植物患病组织内的真菌菌丝体,如果给予适宜的环境条件,除个别种类外,一般都能恢复生长和繁殖。植物病原菌的分离就是指通过人工培养,从染病植物组织中将病原真菌与其它杂菌相分开,并从寄主植物中分离出来,再将分离到的病原菌于适宜环境内纯化,这个过程总称植物病菌的分离培养。植物病原真菌的分离一般都是采用组织分离
酵母多糖吸附病原菌作用主要机理
酵母细胞壁多糖能吸附病原菌的主要机理是: 甘露聚糖能干扰肠道病原菌的定殖, 从而降低动物肠道病原微生物数量如沙门氏菌和大肠杆菌的数量。肠道中的病原菌(大肠杆菌、沙门氏菌、梭状芽孢杆菌等) 细胞表面或绒毛上具有一种蛋白质物质(类丁质结构) , 通过识别动物肠壁细胞上的特异性, 而与之糖类结合, 在肠壁
如何区别是定植菌还是病原菌?
对于痰标本培养确定分离菌是否为可能的感染菌最简单和最直接的证据就是痰标本涂片,首先感染菌会导致白细胞大量增加,其次由于感染早期(细菌/真菌)启动非特异性免疫因子中中性粒细胞是最主要的免疫细胞,吞噬和包裹现象是反映细菌与机体免疫系统的相关性的最重要的信号,观察这一现象有助于区别是感染还是定植。俞云松教
酵母多糖吸附病原菌作用的介绍
酵母细胞壁多糖能吸附病原菌的主要机理是: 甘露聚糖能干扰肠道病原菌的定殖, 从而降低动物肠道病原微生物数量如沙门氏菌和大肠杆菌的数量。肠道中的病原菌(大肠杆菌、沙门氏菌、梭状芽孢杆菌等) 细胞表面或绒毛上具有一种蛋白质物质(类丁质结构) , 通过识别动物肠壁细胞上的特异性, 而与之糖类结合, 在
病原菌侵入后机体的免疫反应
一、宿主体表的防御功能(一)机械的阻挡和排除作用健康和完整的皮肤与粘膜能有效地阻挡细菌的侵入。呼吸道粘膜上皮细胞的纤毛向上颤动,可将细菌咳出或咽下;随粪便每日约排菌1012个;小便可清除尿道上皮的细菌。(二)分泌液中化学物质的局部抗菌作用汗腺分泌的乳酸,皮脂腺分泌的脂肪酸均有一定的抗菌作用。胃酸能杀
靶向克隆法
靶向克隆法是一种新的基因克隆方法,该克隆方法的特点是:在基因克隆过程中不使用已有的DNA Ligase,而是使用新开发的靶向克隆酶。靶向克隆酶能够使末端序列相同的双链DNA(14bp-18bp)同源重组,从而达到克隆基因的目的。LP Recco酶,中文名:靶向克隆酶,无需传统基因克隆所需要的限制性内
M13噬菌体与其他噬菌体相比的优点
噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点?M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开。而其他用于噬菌体展
概述λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制
λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制首先由A·坎贝尔所推测,以后经实验证明。 当用λ噬菌体转导发酵乳糖的基因时,大约10^6 被感染的细菌中出现一个转导子。这一事实说明大约10^6 噬菌体中只有一个带有发酵乳糖的基因,这是低频转导。当λ噬菌体整合到寄主细胞后,带有发酵乳糖基因的λ噬菌体也整合到
噬菌体竟然可以保护自身基因组免受CRISPR核酸酶切割
细菌和感染它们的病毒正在进行一场与生命本身一样古老的分子军备竞赛。进化为细菌配备了一系列可靶向并破坏病毒DNA的免疫酶,包括CRISPR-Cas系统。但是,杀死细菌的病毒(也称为噬菌体)已设计出了它们自己的工具来帮助它们战胜这些最强大的细菌防御。 如今,在一项新的研究中,来自美国加州大学旧金山
Nature首次揭示噬菌体保护自身基因组免受CRISPR核酸酶切割
细菌和感染它们的病毒正在进行一场与生命本身一样古老的分子军备竞赛。进化为细菌配备了一系列可靶向并破坏病毒DNA的免疫酶,包括CRISPR-Cas系统。但是,杀死细菌的病毒(也称为噬菌体)已设计出了它们自己的工具来帮助它们战胜这些最强大的细菌防御。 如今,在一项新的研究中,来自美国加州大学旧金山
噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(4)
噬菌体侵入宿主细胞进行系列合成反应时,宿主菌细胞本身进行了一系列工作,以修复噬菌体侵入所引起的创伤,并加固胞壁的结构,阻止细胞质的继续渗出。噬菌体巧妙地利用宿主菌细胞的“机器”而有效地合成自身。 (三)细菌素对敏感菌株的作用 细菌素的作用范围很窄,与噬菌体一样有很强的特异性。有的细菌素
噬菌体展示技术的原理及应用
将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合(插入信号肽与衣壳蛋白基因间)后,以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面,每个噬菌体只含1个外源基因,被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性,展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体,就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示
Mol-Cell:特殊DNA运输技术或可有效攻克耐药性细菌的感染
抗生素耐药性是目前威胁全球公众健康的主要隐患,其会影响到任何人的健康;如今每年70万人的死亡都归因于抗生素耐药性,2050年这一数字将会增长至1000万;近日,一项刊登在国际杂志Molecular Cell上的研究报告中,来自以色列特拉维夫大学的研究人员通过研究成功促进DNA运输到耐药性细菌病原
Cell:阻断特殊的“守门”蛋白或有望靶向治疗前列腺癌
驱动癌症生长的特定分子驱动子通常并不具有成药性(undruggable),研究人员也几乎无法开发出特殊化合物来阻断这些分子驱动子的活性,并抑制癌症生长,其中很多分子都是通过将促癌信息传递到细胞核中的特殊“入口”中来发挥作用,在细胞核中信息指令就会被执行,近日,一项刊登在国际杂志Cell上的研究报
华东理工大学蛋白靶向降解策略研究获进展
近日,中国工程院院士、华东师范大学教授钱旭红和副教授杨泱泱课题组在蛋白靶向降解策略研究中取得重要进展,相关成果以《自噬途径依赖的具有内质网靶向能力的DNA纳米材料用于降解膜结合细胞器内的蛋白质》为题发表于《德国应用化学》,并被评选为“非常重要论文”。近年来,靶向蛋白降解策略已成为疾病治疗与干预的重要
靶向细胞周期蛋白的microRNA对难治肿瘤有意外疗效
近日,来自美国丹娜法伯癌症研究所和北大-清华生命科学联合中心等单位的研究人员在国际学术期刊Cancer Cell上发表了一项最新研究进展。他们通过筛选发现了一类能够靶向细胞周期蛋白的microRNA,该研究为癌症治疗提供了新的可能。 细胞周期蛋白(Cyclin)能够与细胞周期呈同步周期性浓度升