关于荧光蛋白的基本原理介绍

Chudakov是抓住一个偶然的机会从而培育出这种穿透性超强的深红色荧光蛋白质的。他的一个同事在逛莫斯科宠物商店时发现了一只颜色深红的海葵,出于职业的直觉,他将海葵带了回来;然后,他们对海葵的荧光蛋白质分子进行诱变,最终得到了一种能够在生物体内稳定存在,同时能发出更明亮红光的蛋白质。Chudakov已在人体细胞和青蛙身上测试了这种新的荧光蛋白质。在动物实验中,他发现从外界就可以明显看到这种深红色荧光蛋白质从小动物肌肉组织深处发出的亮光,而同种处于肌肉组织深处的一般荧光蛋白质发出的光则几乎看不见,Chudakov准备下一步在白鼠身上实验这种荧光蛋白质。 斯坦福大学分子影象中心的科学家Zhen Cheng对这项发现评价道:“红色光对生物体组织的穿透性远胜于其他颜色,正因为此,目前有很多科研人员都在努力培育具有高稳定性的红色荧光蛋白质,但截至目前尚没有哪一个比Chudakov培育出的荧光蛋白质更稳定、更明亮,Chudakov培育......阅读全文

绿色荧光蛋白在胞外环境能激发荧光吗

绿色荧光蛋白在胞外环境能激发荧光吗绿色荧光蛋的发光机理比荧光素/荧光素酶要简单得多。一种荧光素酶只能与相对应的一种荧光素合作来发光,而绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作,只需要用蓝光照射,就能自己发光。在生物学研究中,科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记。将这种荧光分子通过化学

绿色荧光蛋白的概念和发现

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

简述荧光蛋白的相关试验分析

  研究人员用特殊处理的荧光蛋白植入老鼠的脑细胞,这些荧光蛋白能够“点亮”神经元,从而使研究人员能够研究大脑是如何处理信息的。该技术被命名为脑彩虹,它的产生让神经科学家们第一次有机会从内部研究活体大脑。当外界信息涌入大脑时,脑彩虹让神经科学家们更加了解神经回路是如何加工信息的。  这项技术源自水母的

关于荧光藻蓝蛋白的作用介绍

  1、简介  荧光藻蓝蛋白是从螺旋藻中分离纯化的,具有独特光学性质的新型荧光标记物。  【英文名】:Fluorescence Phycocyanin,FPC)。  【特性】:FPC能发射强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率,其荧光强度比常用的荧光素强30倍,在可见光谱区有很宽的激发及发射

核蛋白的免疫荧光定位实验

实验方法原理:免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算

关于荧光蛋白的发展简史介绍

  最早出现的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是由下村修等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现,之后又在海洋珊瑚虫中分离得到了第二种GFP。其中水母GFP是由238氨基酸组成的单体蛋白质,分子量约27KD,GFP荧光的产生主

核蛋白的免疫荧光定位实验

免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。实验方法免疫荧光定位法 实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗

关于黄色荧光蛋白的基本介绍

  黄色荧光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体,最初来源于维多利亚多管水母( Aequorea victoria)。相对于绿色荧光蛋白,其荧光向红色光谱偏移,而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其最大激发波长为514 nm,

自动荧光显微系统:高效光控蛋白

  光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一,通过结合遗传学和光学方法,科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性,以及蛋白相互作用。  在进行光遗传学实验的时候,研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式(photobleaching mode)。虽然目前特殊激光或其它通过

绿色荧光蛋白的研究与应用

1962年,已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母(luminous hydromedusan Aequorea)中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代,对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初,科学家才克隆到

核蛋白的免疫荧光定位实验

核蛋白的免疫荧光定位可应用于:(1)定位细胞内核蛋白分布;(2)病毒研究。实验方法原理免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这

荧光蛋白的发光原理是什么

生命的颜色在海洋中,栖息着一类美丽而神奇的生物——水母。水母是一类古老的水生无脊椎软体动物。多数水母拥有颜色绚丽的伞性身躯及自体发光的能力,可散发出点点淡蓝色荧光,与摇曳的海水相映成辉,常引人无限遐想。没有人知道水母发光的能力是如何进化而来的,这些美丽的海洋精灵遍布在世界各地的海洋中,如繁星般点缀着

Ettan-DIGE荧光差异蛋白表达分析系统

原理和应用:    Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念,极大地提高了结果的准确性,可靠性和重复性。在DIGE技术中,每个蛋白点都有它自己的内标,并且软件全自动根据

如何选择荧光蛋白的激发波长?

表一:波长组指定激发发射适用于UV -  紫外线360 - 380nm415nm长波通DapiVI -  紫罗兰400 - 415nm450nm长波通蓝色荧光蛋白青色荧光蛋白RB -  皇家蓝440-460nm500nm长波通绿色荧光蛋白RB -  皇家蓝440-460nm500 - 560nm带通

核蛋白的免疫荧光定位实验

免疫荧光定位法             实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合

绿色荧光蛋白分子标记的研究

  分子标记  作为一种新型的报告基因,GFP已在生物学的许多研究领域得到应用。利用绿色荧光蛋白独特的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签(protein tagging),即利用DNA重组技术,将目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内

核蛋白的免疫荧光定位实验

实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算

自动荧光显微系统:高效光控蛋白

光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一,通过结合遗传学和光学方法,科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性,以及蛋白相互作用。  在进行光遗传学实验的时候,研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式(photobleaching mode)。虽然目前特殊激光或其它通过光学

关于绿色荧光蛋白的应用介绍

  由于荧光蛋白能稳定在后代遗传,并且能根据启动子特异性地表达,在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地,荧光蛋白被改造成了不同的新工具,既提供了解决问题的新思路,也可能带来更多有价值的新问题。  荧光显微镜:GFP和它的衍生物的可用性已经彻底重新定义荧光显微镜,以及它被用来在细胞生物

如何平衡荧光蛋白的发射强度

显示了上面讨论的几个常见问题,多标样品(注意:图 6 中所有荧光团都只显示绿色和红色两种伪彩)经常会妨碍共定位的准确分析。用增强黄色荧光蛋白融合过氧化酶转染人类女性骨肉瘤上皮细胞,目标对象是缩氨酸序列(发绿色荧光),随后用免疫荧光的方法,用二次抗体标记 Alexa Fluor568(发红光),目标对

关于绿色荧光蛋白的结构介绍

  野生型绿色荧光蛋白,最开始是 238 个氨基酸的肽链,约 25KDa。然后按一定规则,11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。  荧光是荧光蛋白最特别的特点,

ACS-Nano:荧光成像膜蛋白标记方法揭示膜蛋白几何构型

  南通大学生命科学学院教师陈昌盛与德国弗莱堡大学合作,在活体细胞单分子层面构建出一种新型的荧光成像膜蛋白标记方法,可研究膜蛋白复合体的亚基组成及其几何构型。4月28日,相关研究成果《锌指蛋白介导的蛋白标记方法揭示膜蛋白的几何构型》在《美国化学学会纳米杂志》发表。  表达于细胞膜表面的膜蛋白一直以来

关于荧光蛋白的基本信息介绍

  来自莫斯科的研究人员培育出一种深红色的荧光蛋白质,这种蛋白质发出的光穿透性极强,即使蛋白质位于小动物体内深处,其发出的光也可以穿透生物体被外界看到,这使生物学家能够更方便地监视活生物体的发病和康复过程,而不用侵入式地进行研究。这一最新研究成果公布在《Nature Methods》在线版上。

绿色荧光蛋白的功能特点和作用

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

绿色荧光蛋白肿瘤发病机制的应用

  GFP是一个分子量较小的蛋白,易与其他一些目的基因形成融合蛋白且不影响自身的目的基因产物的空间构象和功能。GFP 与目的基因融合,将目的基因标记为绿色,即可定量分析目的基因的表达水平,显示其在肿瘤细胞内的表达位置和量的变化,为探讨该基因在肿瘤发生、发展中的作用及其分子机制提供便利条件。  在肿瘤

Nature子刊:荧光蛋白计时器

 要想真正了解活细胞中蛋白质组的动态,就必须对蛋白质周转(protein turnover)以及蛋白质迁移(protein mobility)进行评估。通常这需要不止一种方法,然而现在一种新型的荧光蛋白计时器使得同时追踪蛋白质周转和移动变为可能。相关论文发布在近期的《自然生物技术》(Nature B

绿色荧光蛋白的研究与使用历史

1962年,已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母(luminous hydromedusan Aequorea)中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代,对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初,科学家才克隆到

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共

蛋白质的荧光激发波长如何选择?

荧光蛋白的波长组指定激发发射适用于UV -  紫外线360 - 380nm415nm长波通DapiVI -  紫罗兰400 - 415nm450nm长波通蓝色荧光蛋白青色荧光蛋白RB -  皇家蓝440-460nm500nm长波通绿色荧光蛋白RB -  皇家蓝440-460nm500 - 560nm

LSCM绿色荧光融合蛋白表达载体的构建

绿色荧光融合蛋白表达载体的构建 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP) 及其突变体能在各种不同的生物系统中表达,这对细胞生物学的研究具有重要意义。而荧光蛋白的折叠能力及其同细胞内蛋白的融合能力,使研究 者能直接在细胞体内观察到蛋白质的特性。研究者不需要把蛋白质经过