常见的组织蛋白酶—组织蛋白D的内容介绍
组织蛋白酶D（CTSD） 是Westley 等于1979 年发现的1 种天冬氨酸类溶酶体肽链内切酶 [4]，广泛存在于脊椎动物、真菌、反转录病毒和植物病毒中，其正常功能是在溶酶体的酸性环境中水解蛋白质． 在pH2. 8 ～ 5. 0 的范围内，CTSD( 最适pH 值为4) 能够降解激素、多肽前体、多肽、结构及功能蛋白质，但在pH 大于5. 5 时无活性 [5]。 组织蛋白酶D 参与多种体内生理学活动：组织蛋白酶D 参与底物水解CTSD 作为1 种肽链内切酶，能够在溶酶体内降解多肽和蛋白质；组织蛋白酶D 参与表皮分化， 已有研究发现，CTSD 能够通过水解作用激活谷氨酰胺转移酶-1 ( transglutaminase-1，TG-1) ，从而促进角质化膜蛋白发生交叉连接，最终诱导皮肤表皮分化与新生；组织蛋白酶D 参与细胞凋亡。CTSD 除了具有多样的生理学功能，还与多种临床上的疾病密切相关，如: 阿尔茨海默病、动脉粥样硬化......阅读全文
常见组织蛋白简介
组织蛋白酶B组织蛋白酶B（CTSB） 是溶酶体内半胱氨酸蛋白水解酶，其催化作用由Cys ，His 实现，易被巯基试剂抑制，又称巯基酶，属于木瓜蛋白酶家族，在pH 3.0 ～ 7.0 都具有活性， 碱性条件下会不可逆失活 。CTSB 存在于细菌、病毒、原生动物、植物和哺乳动物中，在肝、脾、肾、骨、神经
组织总蛋白提取原理
关键词：脑组织 目的：熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识：无 原理：无 具体内容： 脑组织总蛋白质提取方法 1．将低温保存的样本称重。 2．加入裂解液。样本与组织比例=1：3~3.5 w/v，一般为150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器，将组织
常见的组织蛋白简介
组织蛋白酶B组织蛋白酶B（CTSB） 是溶酶体内半胱氨酸蛋白水解酶，其催化作用由Cys ，His 实现，易被巯基试剂抑制，又称巯基酶，属于木瓜蛋白酶家族，在pH 3.0 ～ 7.0 都具有活性， 碱性条件下会不可逆失活。CTSB 存在于细菌、病毒、原生动物、植物和哺乳动物中，在肝、脾、肾、骨、神经细
组织总蛋白提取原理
关键词：脑组织 目的：熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识：无 原理：无 具体内容： 脑组织总蛋白质提取方法 1．将低温保存的样本称重。 2．加入裂解液。样本与组织比例=1：3~3.5 w/v，一般为150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器，将组织
弹性蛋白的组织分布
在体内，弹性蛋白通常与结缔组织中的其他蛋白质相关。体内的弹性纤维是无定形弹性蛋白和纤维原纤维的混合物。这两种成分主要由较小的氨基酸组成，例如甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸和脯氨酸。总弹性蛋白范围为正常犬动脉中干脱脂动脉重量的58%至75%。新鲜组织和消化组织之间的比较表明，在35%的应变下，至少48%的动脉
组织总蛋白提取原理
关键词：脑组织 目的：熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识：无 原理：无 具体内容： 脑组织总蛋白质提取方法 1．将低温保存的样本称重。 2．加入裂解液。样本与组织比例=1：3~3.5 w/v，一般为150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器，将组织
如何从组织中提取蛋白
很简单 先把组织冻到液氮里面 然后再拿出来研磨成粉 边磨要边加液氮哦 不然磨不碎 然后再按照细胞提取蛋白一样的操作 加裂解液 高温煮啊什么的 只要很小很小一块的组织就可以提出很多蛋白了 千万别搞太大了
如何从组织中提取蛋白
很简单 先把组织冻到液氮里面 然后再拿出来研磨成粉 边磨要边加液氮哦 不然磨不碎 然后再按照细胞提取蛋白一样的操作 加裂解液 高温煮啊什么的 只要很小很小一块的组织就可以提出很多蛋白了 千万别搞太大了
蛋白质免疫印迹组织蛋白提取简介
1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪（最好高温高压处理）、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、两套研磨棒（最好高温高压处理）、掌上离
组织蛋白酶的简介
蛋白酶是人体内蛋白水解的主要参与者，根据其底物特异性可将其分为肽链内切酶、肽链端解酶、氨基肽酶和羧肽酶等；根据其蛋白水解机制分类为丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶和金属蛋白酶。其中半胱氨酸蛋白酶研究较多。它广泛存在于病毒、细菌、真菌、原生动物及原虫、植物、哺乳动物和人当
LSCM表达荧光蛋白的组织
表达荧光蛋白的组织经冷冻切片制样后，可直接封片，观察并扫描图像，也可配合使用其它荧光染料进行免疫荧光抗体标记和核染色。同时表达GFP 和 RFP 荧光蛋白的组织切片，如还需作免疫荧光抗体标记，应选择可以被 633 nm 和 405 nm 波长激光器激发的荧光染料，如 CY5、Alexa fluor
肾组织提总蛋白的方法
EDTA和Tris的混合液,配方：Tris-Cl (pH7.4) 20mM，EDTA 1mM.可加入蛋白酶抑制剂,提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM）。⑴ 匀浆 对于组织,可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1ml裂解液。可手动或电动匀浆。注意尽量
组织蛋白L的基本内容
组织蛋白酶L( cathepsin L，CTSL) 是溶酶体半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员，具有非常独特的合成和转运方式。溶酶体CTSL，含有信号肽，并且是从ORF 第1个AUG 起始位点开始翻译。 首先，信号肽牵引合成的CTSL 前体酶原到内质网上。 然后，在内质网上信号肽与前体肽间的肽键发生断
什么是组织蛋白酶？
组织蛋白酶是存在于所有动物和其他生物体中的蛋白酶（降解蛋白质的酶）。这个家族大约有十几个成员，它们的区别在于它们的结构、催化机制以及它们切割的蛋白质。大多数成员在溶酶体中发现的低pH值下被激活。因此，这个家族的活动几乎完全在这些细胞器中进行。但是，也有例外，例如组织蛋白酶K，它在骨吸收过程中由破骨细
植物组织蛋白质提取方法
1、植物组织蛋白质提取方法（summer）1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清
结缔组织染色实验——胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白染色
实验方法原理黏蛋白是多糖与蛋白质结合的复合物，组织内含有硫酸根等成分，带有酸性物质，可称为酸性黏液（黏蛋白）。弹力纤维中的弹性蛋白由一种凝胶状的肽链组成，通过非极性吸附显色。胶原纤维是由纤维母细胞产生的一种胶原蛋白铰链而成，易与酸性染料结合。经过组合染色后，可分别显示胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白成分。
蛋白质免疫印迹实验组织蛋白提取
组织蛋白提取 1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪（最好高温高压处理）、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、两套研磨棒（最好高温高
温胰蛋白酶解离组织
方案12.5 温胰蛋白酶解离组织实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时，每隔半小时收集已分离的细胞，离心后加入含血清的培养基。实验材料组织 DBSS
冷胰蛋白酶解离组织
实验方法原理 剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料 组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒 生长培养基皮氏平皿仪器、耗材 培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤 1. 将组织（1~5 g，预先称重）移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮
温胰蛋白酶解离组织
实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时，每隔半小时收集已分离的细胞，离心后加入含血清的培养基。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶D-PBSA试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶离心管瓶子磁力搅拌机镊子移液管血球计数仪实验步骤1. 将组织（1~5 g）移入加有新配制的无菌 DBSS （5
概述组织蛋白酶的合成
目前人的组织蛋白酶主要分为两大亚族，一种是组织蛋白酶L 类的蛋白酶或称ERW FNIN 模体蛋白酶, 主要包括组织蛋白酶L (Cat-L ，下同)、V 、K 、S 和H；另一种为只包括Cat-B 的组织蛋白酶B 类蛋白酶。 组织蛋白酶都是由无活性的前体酶原(preprocathepsin) 水
冷胰蛋白酶解离组织
实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤1. 将组织（1~5 g，预先称重）移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮氏培养皿中
组织蛋白酶的合成简介
目前人的组织蛋白酶主要分为两大亚族，一种是组织蛋白酶L 类的蛋白酶或称ERW FNIN 模体蛋白酶, 主要包括组织蛋白酶L (Cat-L ，下同)、V 、K 、S 和H；另一种为只包括Cat-B 的组织蛋白酶B 类蛋白酶。组织蛋白酶都是由无活性的前体酶原(preprocathepsin) 水解而成，
骨桥蛋白与组织修复的影响作用
成体组织中创伤多通过瘢痕组织进行修复。在肉芽组织中，绝大多数新生血管内皮细胞中都存在OPN mR-NA的高表达。OPN能够促进内皮细胞的增殖、迁移以及新生血管管形的发生。在缺血诱导的视网膜血管化的发病过程中，OPN能够通过介导血管内皮细胞与细胞外基质的相互作用，加速血管内皮细胞的增殖，促进新生血
组织蛋白酶抑制剂
1、内源性蛋白抑制剂 (1)前体肽：是半胱氨酸蛋白酶酶原结构中的一个组成部分, 它占据着酶的活性中心, 阻止酶与底物结合, 使其不能发挥催化作用。 (2)Cystatin 家族：该家族抑制剂对靶蛋白酶选择性较差，它又包括三大类：cystatins 、stefins 及kininogens。
组织蛋白酶的分类简介
自从上世纪20 年代提出组织蛋白酶的概念以来，到目前为止从组织蛋白酶A 到组织蛋白酶Z 都已有报道。根据蛋白水解机制分类，组织蛋白酶成员中大部分属于半胱氨酸蛋白酶， 少数为天冬氨酸蛋白酶(组织蛋白酶D 、E) 和丝氨酸蛋白酶(组织蛋白酶A 、G)；根据其底物特异性分类,，组织蛋白酶又包括肽链内切
组织蛋白酶临床意义
组织蛋白酶涉及：癌症，组织蛋白酶D是一种有丝分裂原，“它会减弱衰变趋化因子的抗肿瘤免疫反应，从而抑制树突细胞的功能”。组织蛋白酶B和L参与基质降解和细胞侵袭。中风创伤性脑损伤阿尔茨海默病关节炎已发现埃博拉病毒、组织蛋白酶B和在较小程度上的组织蛋白酶L是病毒进入宿主细胞所必需的。慢阻肺慢性牙周炎胰腺炎
冷胰蛋白酶解离组织
经验交流（0）实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织 DBSS
温胰蛋白酶解离组织
实验方法原理 组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时，每隔半小时收集已分离的细胞，离心后加入含血清的培养基。 实验材料 组织 DBSS
如何从动物组织中裂解得到蛋白
你好，提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1：1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了，然后按量加入裂解液，细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟（间断摇动）。然后4摄氏度离心12000rpm，15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀，然后等