沃森生物:子公司获美国发明ZL授权
近日,沃森生物控股子公司上海泽润生物科技有限公司持股 92.5%的上海泽润安珂生物制药有限公司收到了“Material with immunogenicity”(具有免疫原性的物质)美国发明ZL授权证书。ZL摘要为:提供了一种融合蛋白,其包含人乳头瘤病毒 E7 抗原、病毒衣壳蛋白和分子伴侣蛋白。还提供了一种由该融合蛋白聚合形成的具有免疫原性的大分子,该大分子的颗粒形态不同于病毒样颗粒,其能用于治疗人乳头瘤病毒相关疾病。 据悉,上海泽润安珂生物制药有限公司在“治疗性重组人乳头瘤病毒 16 型 E7 融合蛋白疫苗”研发过程中已实施该项ZL,该产品已于 2012 年按照治疗性生物制品 1 类新药向中国国家食品药品监督管理总局申请临床研究,目前正在审评过程中。 目前,上海泽润安珂生物制药有限公司就治疗性 HPV 疫苗项目共有 2 个ZL族: (1)具有免疫原性的物质 (Material with imm......阅读全文
融合蛋白的酶解实验
基本方案 辅助方案 备选方案1 辅助方案 备选方案2 备选方案3 实验材料 融合蛋白
构建融合蛋白的基本方法
构建融合蛋白的基本方法是将具有特定功能的天然或人工编码的多肽序列模块化,并使用基因编码的DNA序列模板合成,随后将第1个蛋白的终止密码子删除,再接上带有终止密码子的第2个蛋白基因,以实现两个基因的共同表达。通过控制每一个功能肽模块在整体蛋白材料中的确切位置和密度,人们便能够根据实际需要改变融合蛋白的
GST融合蛋白纯化的原理
GST纯化系统其实就是凝胶亲和层析系统。该纯化柱中,凝胶手臂上通过硫键结合一个谷胱甘肽。然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶(即GST)之间酶和底物的特异性作用力,使得带GST标签的融合蛋白能够与凝胶上的手臂谷胱甘肽结合,从而将带标签的蛋白与其他蛋白分离开。
融合蛋白的制备方法介绍
基于重复结构的融合蛋白大多为短肽,不具有复杂的空间结构,因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现,主要包括以下基本步骤::首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护,其次将羧基活化为活性中间体,待耦合过程结束后,对肽链上氨基
新颖的融合蛋白表达系统
研究者们在分离到某一基因后,要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达——即:有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA技术的发展早期,人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随后,认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多,除了要有强启动子和起始密码
融合蛋白的临床应用介绍
1、DNA疫苗 目前,疫苗已经经历了三代:第一代疫苗是用减毒或杀死的病原体来激活机体免疫系统;第二代疫苗是用生物技术和重组DNA技术研制的组分疫苗注射机体诱导免疫应答; 第三代疫苗是直接注射基因重组的抗原基因来激活人体免疫系统,即DNA疫苗。 DNA疫苗与传统疫苗相比有着明显的优势,如易于生
关于融合蛋白的特点介绍
融合基因可在原核细胞(如大肠杆菌) 也可在真核细胞中进行表达。 原核表达系统的特点是时程短,费用低,是科研中的主要工具。其缺点是真核蛋白表达没有得到确切修饰;大量蛋 白常常沉淀成不溶性包涵体聚合物,需要复杂的变性和复性过程;大量蛋白的分泌较困难。真核表达系统的特点是蛋白翻译后加工机会多,甚至可
构建融合蛋白的基本方法
构建融合蛋白的基本方法是将具有特定功能的天然或人工编码的多肽序列模块化,并使用基因编码的DNA序列模板合成,随后将第1个蛋白的终止密码子删除,再接上带有终止密码子的第2个蛋白基因,以实现两个基因的共同表达。通过控制每一个功能肽模块在整体蛋白材料中的确切位置和密度,人们便能够根据实际需要改变融合蛋白的
基因置换实验——构建融合蛋白
实验材料菌株BY4741质粒PDB118试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材YPD 平板YPD 液体培养基血球计数板SC-his平板实验步骤YPD 平板 第 1 天将菌株 7-3 在 YPD 平板上划单克隆,30°C 下培养两天。第 3 天挑取单克隆,在 5 mlYPD 液体培养基中培养,30°C 过
融合蛋白的制备方法介绍
基于重复结构的融合蛋白大多为短肽,不具有复杂的空间结构,因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现,主要包括以下基本步骤:首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护,其次将羧基活化为活性中间体,待耦合过程结束后,对肽链上氨基酸的保
融合蛋白的临床的应用
1、DNA疫苗目前,疫苗已经经历了三代:第一代疫苗是用减毒或杀死的病原体来激活机体免疫系统;第二代疫苗是用生物技术和重组DNA技术研制的组分疫苗注射机体诱导免疫应答; 第三代疫苗是直接注射基因重组的抗原基因来激活人体免疫系统,即DNA疫苗。DNA疫苗与传统疫苗相比有着明显的优势,如易于生产,稳定性强
融合蛋白技术的临床应用
1、DNA疫苗目前,疫苗已经经历了三代:第一代疫苗是用减毒或杀死的病原体来激活机体免疫系统;第二代疫苗是用生物技术和重组DNA技术研制的组分疫苗注射机体诱导免疫应答; 第三代疫苗是直接注射基因重组的抗原基因来激活人体免疫系统,即DNA疫苗。DNA疫苗与传统疫苗相比有着明显的优势,如易于生产,稳定性强
常见融合蛋白及功能介绍
1、免疫球蛋白(Ig)融合蛋白免疫球蛋白融合蛋白是指在基因水平将目的基因同Ig部分片段基因相连,并在真核或原核细胞中表达出的具有上述两部分结构域的重组蛋白。据目的蛋白与Ig不同片断相连,可将其分为二大类 :一类为Fab(Fv)融合蛋白; 另一类为 Fc融合蛋白。2、甲状旁腺激素(PTH)融合蛋白甲状
融合蛋白技术的操作要点
在构建融合蛋白中,一个关键的问题是两蛋白间的接头序列( Linker ),即连接肽。它的长度对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短,可能影响两蛋白高级结构的折叠,从而相互干扰;如果接头序列太长,又涉及免疫原性的问题,因为接头序列本身就是新的抗原。一般来说, 3-5个氨基酸的Linker可满
构建融合蛋白的基本方法
构建融合蛋白的基本方法是将具有特定功能的天然或人工编码的多肽序列模块化,并使用基因编码的DNA序列模板合成,随后将第1个蛋白的终止密码子删除,再接上带有终止密码子的第2个蛋白基因,以实现两个基因的共同表达。通过控制每一个功能肽模块在整体蛋白材料中的确切位置和密度,人们便能够根据实际需要改变融合蛋白的
常见融合蛋白功能特点介绍
1、免疫球蛋白(Ig)融合蛋白免疫球蛋白融合蛋白是指在基因水平将目的基因同Ig部分片段基因相连,并在真核或原核细胞中表达出的具有上述两部分结构域的重组蛋白。据目的蛋白与Ig不同片断相连,可将其分为二大类 :一类为Fab(Fv)融合蛋白; 另一类为 Fc融合蛋白。2、甲状旁腺激素(PTH)融合蛋白甲状
制备融合蛋白的过程介绍
1、进行目的基因的克隆:根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cDNA为模板,利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。 2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质
融合蛋白的设计方法介绍
融合蛋白的设计大致分为基于重复结构、基于生长因子以及基于细胞粘附分子3类。第1类融合蛋白中最典型的是来源于弹性蛋白( Elastin-Like Polymers,ELPs) 及丝素蛋白( Silk-Like Polymers,SLPs) 的融合蛋白。ELPs 是一种由数个重复的氨基酸序列组成的细胞外
融合蛋白的酶解实验
实验材料 融合蛋白试剂、试剂盒 SDS仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机实验步骤 1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间: (1)反应1:20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白,室温下反应(2)反应2:5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白(
绿色荧光蛋白融合抗体研究
融合抗体 近二十年来,抗体生成技术有了飞速发展,已经从细胞工程抗体(杂交瘤技术一单克隆抗体)发展到了第三代抗体:基因工程抗体,尤其是噬菌体抗体库技术的出现,解决了人源抗体的研制问题,促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体(Single-chain variable
抗体融合蛋白的应用有哪些
1.肿瘤的体内显像诊断 2.病毒的诊断和抗病毒感染 3.血液疾病的诊断
融合蛋白技术的目的是什么?
融合蛋白技术是为获得大量标准融合蛋白而进行的有目的性的基因融合和蛋白表达方法,利用融合蛋白技术,可构建和表达具有多种功能的新型目的蛋白。
融合蛋白的酶解实验4
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDS盐酸胍CaCl2仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 将融合蛋白在≥10倍体积的20 mmol/l Tris·Cl(pH7.4)/6 mol/l 盐酸胍中透析4 h,或将盐酸胍加入融合蛋白中至终浓度为6 mol/l。2. 将样品在100倍体积的20 mmol
融合蛋白化学降解实验
基本方案 用溴化氰 实验方法原理 实验材料 1 mg ml 融合蛋白
抗体融合蛋白的应用有哪些?
1.肿瘤的体内显像诊断2.病毒的诊断和抗病毒感染3.血液疾病的诊断
常见融合蛋白特点及功能介绍
1、免疫球蛋白(Ig)融合蛋白免疫球蛋白融合蛋白是指在基因水平将目的基因同Ig部分片段基因相连,并在真核或原核细胞中表达出的具有上述两部分结构域的重组蛋白。据目的蛋白与Ig不同片断相连,可将其分为二大类 :一类为Fab(Fv)融合蛋白; 另一类为 Fc融合蛋白。2、甲状旁腺激素(PTH)融合蛋白甲状
融合蛋白的酶解实验1
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDS仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间: (1)反应1:20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白,室温下反应(2)反应2:5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白(模拟消化
融合蛋白的免疫筛选实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜实验步骤 1. 在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2. 选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.
融合蛋白化学降解实验
基本方案 备选方案1 备选方案2 实验材料 融合蛋白
融合蛋白的酶解实验6
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDSCaCl2重组牛肠激酶仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 做预试验监测肠激酶与融合蛋白按不同比例混合后的裂解效率,准备5个反应体系: (1)反应1至4:20 μl 融合蛋白;0.2 U、0.5 U、1 U和2 U的rEK,加50 mmol/l Tris·Cl