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实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDS仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间： （1）反应1：20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白，室温下反应（2）反应2：5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白（模拟消化），室温下反应。 2. 分别在2、4、8和24 h取出5 μl 反应液，加2×SDS样品缓冲液5 μl，-20℃下冻存。3. 在24 h 时，将5 μl 反应2（模拟消化）液与5 μl 2×SDS样品缓冲液混合。4. 将5 μl 原始融合蛋白溶液与5 μl 2×SDS样品缓冲液混合。 5. 将所有样品于沸水浴中加热10 min，加样到SDS-聚丙烯酰胺凝胶上电泳，根据裂解程度确定适当的温育时间。 6. 确定了适当的裂解条件后，......阅读全文
研究者们在分离到某一基因后，要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达——即：有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA技术的发展早期，人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随后，认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多，除了要有强启动子
实验材料 表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞 试剂、试剂盒 二硫苏糖醇
pGEX 载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽 S 转移酶融合，因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液Tri
重组蛋白是研究生物学过程的重要工具。需要使用表达系统来对其进行制备。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质。作者： 伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」实验步骤一、引言选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及
实验步骤 一、引言 选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及 时 获 取 所 需 数 量 和 质 量 的 重z组蛋白非常关键。选 择 了 错 误 的表达宿主可 能 导 致 蛋 白 质错 误 折 叠 或
《自然·医学》 美国乔治敦大学的医学研究人员发现了一种阻断尤文氏肉瘤相关融合蛋白活性的新方法，尤文氏肉瘤是一种发生在儿童和青少年期的罕见癌症。该项科研成果为研发治癌药物开发了新思路。 研究人员报告说，他们发现了一个小分子，并成功对其进行了测试。该小分子可阻止融合蛋白与形成肿瘤的另一个
在免疫沉淀IP&免疫荧光IF如何正确的选择Flag标签抗体？Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统，广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相
实验概要本实验介绍了谷胱甘肽琼脂糖凝胶的使用方法。Pgex载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽S-转移酶溶合，因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。Pgex是一类以谷胱甘肽(γ-谷胱甘肽半胱胺酰甘氨酸)作为底物，通过形成硫醇尿酸失活毒性小分子的酶。由于GST对底物的亲和力是亚豪摩尔级的，因此谷胱甘肽
植物原生质体是指脱去全部细胞壁由质膜包被的具有生命活力的裸露细胞。它具有细胞生命特征和全能型，是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源，同时也是植物遗传工程的理想受体和遗传改良的理想材料。酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维
治疗性重组蛋白或单克隆抗体是影响细胞、组织、器官乃至生命的外源性重组蛋白，在细胞内成熟过程中几乎均会发生蛋白质糖基化修饰，而糖基化修饰的质和量的差异，可能会影响相关重组蛋白表达水平、结构及功能。重组蛋白表达服务可以帮助研发人员研发高效、高质量的蛋白质。在生物体中50%以上的蛋白质存在糖基化现象，
什么是冠状病毒？ 冠状病毒(Coronavirus)是一种有包膜（或囊膜）的正链线性RNA病毒，也是一种最大的RNA病毒。冠状病毒属于网巢病毒目。我们通常说的冠状病毒是冠状病毒科的两个亚科之一。该亚科包括甲、乙、丙、丁(α，β，γ和δ )四个属。 冠状病毒的包膜是由双层脂质和跨膜蛋白组成。病毒的
膜融合是生命基本和重要的过程之一，真核细胞多种形式的胞内区间具有不同的生物化学性质，细胞维持这些胞内分区之间的动态平衡主要依赖的是囊泡转运，该过程与许多重要疾病密切相关。 囊泡转运即包含转运物质的囊泡从供体出芽然后转移至目标膜，锚定之后与目标膜融合，从而使得膜蛋白、磷脂和内容物转运至另一个细胞
环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种新兴的内源性非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA)，是继microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非编码RNA家族中极具研究潜力的新成员。越来越多的研究表明，环状RNA具
尽管在20世纪60年代后期首次描述了在哺乳动物组织或液体中，有囊泡在细胞周围存在，但是直到2011年才提出通用术语“胞外囊泡（extracellular vesicle, EV）”来定义所有的由脂质双层包围的胞外结构，如图1所示。在1980年代，人们描述了EV可以通过质膜向外出芽或通过细胞内内吞
实验材料 载体和酵母菌 试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 SD
86) 选择sephadex G75或者superdex 75,柱子的大小一般都是按你的处理量算的,通常的柱子大多是1.6x60,2.6x60,或者有100cm的柱子,内径为1.6或者2.6的.也也有更粗的.一般都不会有问题. 1,我们实验室没有sephadex G75(3000-8000
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
1. Cell：中科院生物物理所王艳丽/章新政课题组从结构上揭示Cas13a切割RNA机制 doi:10.1016/j.cell.2017.06.050 CRISPR/Cas系统是目前发现存在于大多数细菌与所有的古菌中的一种免疫系统，被用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。在CR
分析测试百科网讯 如果说基因是生命的起点，那么糖蛋白的表现很大程度上就是研究生命功能的终点。人类蛋白中有50%以上都发生了糖基化的修饰，在病理和生理过程中糖蛋白发挥了至关重要的作用，在生物制药中最亮眼的单抗药100%都是糖蛋白药物。对糖蛋白和糖蛋白质组学的研究是贯穿生物制药、疾病与临床研究生生不
一种siRNA分子(紫色和绿色部分)可能治疗遗传性肝脏疾病 RNA干扰(RNAi)，基因沉默技术的一种，显示了疾病治疗的巨大潜力，但从来没有人能确切证实它对疾病治疗所能发挥的作用。但是现在RNAi已经逐渐获得了研究人员的一致好评。一项新的研究表明，该方法能够显著并安全地削弱导致一种罕见的肝脏疾
高等生物遗传图谱的构建依赖于选择性杂交后代的分析或者通过家系分析法来计 算连锁关系。对人类而言仅后者是可行的。使用长度多态性限制片段（RFLPS）在构 建人连锁图谱方面已取得长足的进步。为了对带有与已知表现型相关的RFLP标记的基 因进行定位，首先得建立间隔约10CM的遗传标记束（平均1CM等于1％
寨卡病毒是一种由伊蚊传播的虫媒病毒, 属于黄病毒科的黄病毒属. 自1947年在非洲乌干达被发现以来,寨卡病毒主要局限于非洲和亚洲的热带地区流行. 由于其引起的症状同登革热非常相似, 但程度较轻, 因此长期不被重视. 2007年寨卡病毒从东南亚逐步扩散至太平洋诸岛屿, 2015年南美寨卡病毒大规模
虽然表观上简单，盘绕螺旋（coiled coil ) 模体是高度专一的，并在理解三级结构及其形成方面具有重要意义。最常观察到的盘绕螺旋形态——平行二聚态，其一般的结构类型仍有待全面的描述。尽管如此，其结构已呈现出在某些特定位置需要某些特定类型氨基酸的严格规则。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德
SYBR® Green是一种插入DNA分子的染料，具有多种分子生物学应用，其中之一就是用于实时定量PCR（qPCR）。随着PCR循环的连续进行，这种染料的荧光强度会不断增强，从而可以使人们对反应中的DNA进行定量。SYBR Green法及一些其他基于染料的qPCR方法比探针法的成本低，使用也更为方便
蛋白纯化经验指南生物谷整理 http://www.bioon.com 原创：Chromatography weixingui@263.net， 推荐书籍：《蛋白纯化与实验鉴定指南》、《生物工程下游技术》、《酶工程》、《酶制剂工业》 1) 我现在手头
1. 前言融合蛋白 Enbrel (Etanercept) 是由人的肿瘤坏死因子（TNF，Tumornecrosis factor）膜外受体部分和人的免疫球蛋白（IgG1）的 Fc 部分融合而成，是一种人源 TNF-α 受体抗体融合蛋白，是肿瘤坏死因子（TNF-α）的拮抗剂，它通过抑制 TN
我们都知道，线粒体是机体的细胞能量工厂，近年来随着科学家们研究的深入，他们渐渐开始发现线粒体对机体健康非常重要，本文中，小编就对相关研究进行了整理，分享给大家！ 【1】EMBO J：单一的线粒体蛋白缺失或会诱发全身性的炎症反应 doi：10.15252/embj.201796553 目前研
2008年8月31日下午，质谱沙龙第十一期活动在西苑医院实验楼举行。会议有来自二炮总医院、西苑医院、医科院药物所、医科院药植所、朝阳医院、北大医学院、北医三院、空军总医院、中科院过程工程所、AB公司等老朋友，还有来自中科院、中科院微生物研究所、艾杰尔科技公司等新朋友。 应大家要求，AB公司首先请出
分析测试百科网讯 近日，海南省教学仪器设备招标中心受招标人海南大学委托，采购场发射透射电子显微镜、基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱仪、纳米喷雾干燥仪、石英晶体微天平、多功能样品前处理平台、热重-红外图像-气质联用原位反应系统、显微傅里叶变换红外光谱仪+光声光谱检测器、差示扫描量热
1.7 抗体纯化1.7.1 多克隆抗体的纯化采用辛酸-饱和硫酸铵法纯化抗β-内酰胺酶的兔血清，2次滴加饱和硫酸铵的最终体积分数分别为50%和40%。将沉淀用少量PBS溶解后转入透析袋中，用PBS溶液透析48h，利用紫外分析法检测透析液直至透析完全。1.7.2 单克隆抗体的纯化采用PEG6000沉淀法