利用CRISPR／Cas9技术构建基因敲除大鼠及小鼠模型
国际著名生物学期刊《Nature Biotechnology》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式发表了上海市调控生物学重点实验室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀教授和李大力副教授课题组的最新研究成果。这是继今年6月该课题组在《Nucleic Acids Research》杂志发表基因敲除小鼠新技术后，再次在国际著名生物期刊上报道课题组在基因敲除大鼠和小鼠技术上所获得突破和成果。 基因敲除动物模型一直以来是在活体动物上开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶标的重要工具。但传统的基因敲除方法需要通过打靶载体构建、ES细胞筛选、嵌合体小鼠选育等一系列步骤，不仅流程繁琐、技术要求很高，而且费用大、耗时较长，成功率受到多方面因素的限制。刘明耀、李大力课题组一直致力于开发基因敲除动物新技术。其团队于今年6月在《Nucleic Acids Research》发表了关于转录激活样效应因子核酸酶(TA......阅读全文
利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除大鼠及小鼠模型
国际著名生物学期刊《Nature Biotechnology》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式发表了上海市调控生物学重点实验室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀教授和李大力副教授课题组的最新研究成果。这是继今年6月该课题组在《Nucleic Acids Rese
Fgf21基因敲除小鼠
背景信息FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活特性，并参与多种生物过程，包括胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭。成纤维细胞生长因子21（FGF21）是一种肝细胞因子——即由肝脏分泌的一种激素，通过下丘脑室旁核中的FGF21受体信号传导调节糖摄入和对甜食的偏好，并与伏隔核内多
基因敲除小鼠的原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除。基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的顺利奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES
动物所大鼠基因敲除工作取得突破
8月8日，Nature Biotechnology杂志在线发表了中国科学院动物研究所周琪研究员领导的生殖工程研究组的研究论文Simultaneous generation and germline transmission of multiple gene mutations in rat
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来，已推动2000+个课题组加速研究进展，帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系，或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来，已推动2000+个课题组加速研究进展，帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系，或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关
一步生成条件性基因敲除小鼠ESC
最近发展的基因组编辑工具，包括转录激活因子样效应物核酸酶（TALENs）和CRISPR/Cas9，使我们能够通过诱导双链断裂（DSBs）的非同源末端连接（NHEJ）修复，快速而有效的敲除靶向基因。然而，这种方法不能进行必需基因的功能研究，这类研究通常采用的策略是基于Cre-LoxP系统的条件性基
基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用
“千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间，在全人抗体小鼠RenMab上，逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除，并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括： 在RenMab上完成1000多个Targets的
基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用
“千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间，在全人抗体小鼠RenMab上，逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除，并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括： 在RenMab上完成1000多个Ta
文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
投稿人：郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们： 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。 第一集，关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠（Knoc
文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。第一集，关于基因敲除小鼠。基因敲除小鼠（Knockout Mice），人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达，从而使小鼠呈现这个
文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
投稿人：郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们： 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。 第一集，关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠（Knoc
华人科学家首次培育出基因敲除大鼠
可能在不久的未来，大鼠将会代替小鼠，重新成为实验室里的头号“动物明星”。最近，国际顶级学术期刊《自然》发表了华人科学家的最新成果——首次培育出了基因敲除的大鼠。这一突破解开了20多年来“无法用基因敲除的方法来构建大鼠疾病动物模型”的难题，使得这种“与人类更接近”的动物能更好地为人类疾病
旅美华裔学者直接参与“基因敲除小鼠”试验
70岁的意大利裔美国人卡佩基等美英三位学者本月8号获得今年的诺贝尔生理学或医学奖。旅美华裔学者邓初夏当年曾是卡佩基科研团队的成员。日前他在接受本台驻美国记者采访时，谈到了自己参与“基因敲除小鼠”试验的感受。 1986年，邓初夏考入犹他大学研究生院，师从卡佩基，成为从事“基因敲除”试验的第一个研究
新一批敲除小鼠序列数据存入基因银行
美国得克萨斯州基因组医学研究所将其敲除小鼠库的超过275000个核苷酸序列信息存入了美国国立卫生研究院的基因银行。 以休斯敦为根据地的得克萨斯州基因组医学研究所于今年5月加入国际敲除小鼠协会。在美国国立卫生研究院号召在国际科学界广泛分享小鼠研究信息后，该研究所表示愿意向美国健康研究院提供基因序列
设计cas9条件性基因敲除小鼠
其关键是构建带有两个Loxp位点的小鼠，即flox(flanked by loxP)小鼠。今天我们就来详细介绍一下如何设计。共分三步：第一步，选择外显子。第二步，设计sgRNA。第三步，设计SSODN。听起来蛮简单的哈？下面我们详细讲讲。第一步，选择外显子。1. 尽量选择敲除所有转录本共用的外显子。
应用优化CRISPR技术建立基因完全敲除的小鼠及猴
6月6日，《细胞研究》在线发表了一项成果，应用改进的“C-CRISPR”技术可以获得单基因或多基因功能完全敲除的小鼠及猴。这项研究由中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所、脑科学与智能技术卓越创新中心的杨辉研究组、熊志奇研究组以及神经所苏州非人灵长类研究平台孙强团队合作完成。该研究通过将多个
基因敲除技术
一．概述：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较
基因敲除简介
基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因
基因敲除技术
一．概述：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较
基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用（一）
基因敲除(gene knockout ) 是 80年代初出现的一项新的基因工程技术, 是制备转基因动物的重要技术之一。利用该技术可以培育先天缺陷某一特定基因的动物, 以此研究该特定基因的生理功能或在疾病发生发展中的意义。近年来基因敲除小鼠在药物依赖性研究中也得到广泛的应用。在传统的药物依赖性
中国专家解读诺贝尔医学奖：“基因敲除小鼠”缘何获奖
首都医科大学宣武医院细胞治疗中心主任张愚８日介绍，本年度诺贝尔生理学或医学奖得主的最大贡献在于，他们创造了一套完整的“基因敲除小鼠”的方式，把任意改变小鼠基因变为现实，不仅可以研究单个基因在动物体内的功能，而且为人类攻克某些遗传因素引发的疾病，提供了药物试验的动物模型。 张愚介绍，所谓“基因敲除小鼠
基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用（二）
3. 2 D2 受体在阿片类诱导的运动增强效应实验中, D2 受体KO 小鼠对内源性和外源性阿片类物质诱导的运动增强效应与 WT 小鼠无显著性差异, 表明 D2 受体缺失未影响阿片诱导的运动增强效应。在药物身体依赖性实验中,D2 受体 KO 小鼠和 WT 小鼠的戒断症状没有明显差别,说明 D2
基因靶向的基因敲除
实验步骤构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制，其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列，其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞（一般是胚胎干细胞）核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染
APP完全性敲除小鼠和APP条件性敲除小鼠在阿尔茨海默病...
APP完全性敲除小鼠和APP条件性敲除小鼠在阿尔茨海默病研究的应用基因是很多人类疾病的内在因素，对疾病相关基因的研究是生命医学研究领域的主流，如何快速了解研究疾病相关的基因以及这些基因的概况？一篇篇去读文献搜集筛选实在耗时耗力，为此，赛业生物的新栏目《Weekly gene》上线啦，每周二为您介绍一
基因敲除技术简介
基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因
基因敲除技术简介
动物实验和实验动物都要求达到实验室操作规范（good laboratory practice, GLP）和标准操作程序（standard operating procedure, SOP）这些规范和操作对实验动物和实验室条件，工作人员素质，技术水平和操作方法都要求标准化。所有药物的安全评价试
控制基因敲除法
【探针技术用于检测由siRNA介导的基因调制】 为了研究基因功能，科学家们常常会有针对性地关断某些特定的基因。 而要验证这种基因沉默的有效性, 就需要运用适当的具特异性的检测方法。理想的检测方法不仅要测量准确, 而且还要能让细胞保持完好无损。 利用诸如RNA(核糖核酸)技
基因敲除技术简介
基因敲除是一种遗传工程技术，是指通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。基因敲除针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。基因敲除技术克服了随机整合的盲目性和偶然性，是一种理
基因敲除的定义
基因敲除(geneknockout),是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除可中止某一基因的表达外,还包括引入新基因