研究揭示细菌逆转录酶介导新型免疫机制
近日，中国科学院武汉病毒研究所团队，揭示了新型细菌抗病毒防御系统DRT4的工作机制。研究发现，在遭遇噬菌体入侵时，带有DRT4防御系统的细菌通过“自杀式防御”策略，牺牲被感染个体以保全群体。这一防御系统的启动“钥匙”来自于病毒自身编码的一种核酸结合蛋白。 研究团队综合运用生物化学、生物物理学及微生物学等多种研究手段，从分子层面解析了DRT4系统的防御机制。团队发现，该机制具有独特的“无模板”DNA合成能力，尽管DRT4被定义为原核生物逆转录酶家族，但其具有不依赖模板合成随机序列的单链DNA的酶活性。这一非典型聚合酶活性是其执行防御功能的核心基础。同时，DRT4上高度保守的酪氨酸残基（Tyr125）作为DNA合成的起始位点，揭示了其利用蛋白作为引物合成单链DNA的机制。 研究发现，病毒蛋白为系统“触发器”，T5噬菌体编码的单链DNA 3‘末端结合蛋白ORF55，是激活防御的“扳机”。在未感染状态下，细菌体内的3‘—5‘核酸......阅读全文
脂质体介导的瞬时转染
实验材料 靶细胞DNA试剂、试剂盒 阳离子脂质D-PBSA缓冲盐溶液NaCl 0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 细胞培养基还原的血清培养基无血清培养基多孔培养板实验步骤 A . 贴壁细胞的转染1. 将 1.3X105 个细胞/孔接种到 6 孔培养板，加 3 ml 培养基。2. 于 37°C 的 CO2
病毒介导基因转移技术介绍
病毒介导基因转移：前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移（viral mediatedgene transfer）是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体（vector），将外源目的基因通过基因重组技术，将其组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运
脂质体介导DNA转染法
脂质体（LR）试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物（1：1）。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时，首先需要优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞
通道蛋白介导的易化扩散
运输过程借助于穿越脂双分子层的通道蛋白完成。通道蛋白中心是亲水性小孔，不同种类的通道蛋白可分别运输离子，水等小分子。主要运输离子的通道蛋白也称为离子通道，对离子具有高度亲和力和高度选择性。离子通道运输速率高，每秒运输离子数量多达几百万个，载体蛋白每秒运载的分子数目则不足一千个。某些离子通道蛋白星关闭
通道蛋白介导的易化扩散
运输过程借助于穿越脂双分子层的通道蛋白完成。通道蛋白中心是亲水性小孔，不同种类的通道蛋白可分别运输离子，水等小分子。主要运输离子的通道蛋白也称为离子通道，对离子具有高度亲和力和高度选择性。离子通道运输速率高，每秒运输离子数量多达几百万个，载体蛋白每秒运载的分子数目则不足一千个。某些离子通道蛋白星关闭
LAMP（环介导等温扩增）技术
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用，其灵敏度高、特异性好，是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂，对仪器和人员要求比较高，不适合基层或现场快速诊断，因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci
什么是受体介导的胞吞？
细胞外的生物大分子(包括病毒、毒素等)选择性地与受体结合后经胞吞作用而进入细胞的过程。是受体-配体复合体得以解离，和某些受体的再利用所必需的过程。既是细胞高效率、高选择性和快速摄取胞外亲水分子的重要方法，也是穿越细胞膜运送物质的方式之一。
内含肽介导的蛋白连接
通过改变裂解条件以及对内含肽进行适当修饰，可以生物合成c端带有硫酯键或N端带有半光氨酸的蛋白质分子。两种蛋白质混合以后，硫酯键和半光氨酸利用“自然化学连接”(native chemical ligation)的原理进行自发的连接反应，在硫酯和半光氨酸之间形成肽键，从而将两种蛋白质连接起来。自然化学连
受体介导的胞吞作用介绍
细胞外的生物大分子(包括病毒、毒素等)选择性地与受体结合后经胞吞作用而进入细胞的过程。是受体-配体复合体得以解离，和某些受体的再利用所必需的过程。既是细胞高效率、高选择性和快速摄取胞外亲水分子的重要方法，也是穿越细胞膜运送物质的方式之一。
载体蛋白介导的易化扩散
运输过程是通过载体蛋白发生可逆的构象变化实现的。载体蛋白是膜上与物质运输有关的穿膜蛋白，对所运输的物质具有高度选择性，当载体蛋白一端表面的特异结合部位与专一的溶质分子结合，引发载体蛋白空间构象改变，将运送的溶质分子从结合的一侧转运到膜的另一侧；变构的载体蛋白对被转运物质的亲和力同时发生改变，于是被转
线粒体介导的凋亡过程介绍
当线粒体的膜电位下降，线粒体膜通透性增加，线粒体内促凋亡因子（例如：当线粒体的膜电位下降，线粒体膜通透性增加，线粒体内促凋亡因子（例如：Cyt C、AIF、SMAC/DIABLO、HTRA2/OMI、ENDOG）释放到胞质中。Cyt C释放到胞内以后，与Apaf-1相互作用，在ATP和dATP的协
抗体介导的细胞分离技术介绍
抗体介导的细胞分离技术主要有：抗体/补体介导细胞学溶解法、流式细胞仪细胞分选法、平面黏附分离法和免疫磁珠分离法等 。
补体介导的细胞毒试验
一、实验原理带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细胞
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或
生物粒子介导的－DNA－转染实验
生物粒子介导的 DNA 转染实验 试剂、试剂盒 CaCl2 乙醇
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细胞
抗体介导的细胞分离技术介绍
抗体介导的细胞分离技术主要有：抗体/补体介导细胞学溶解法、流式细胞仪细胞分选法、平面黏附分离法和免疫磁珠分离法等 。
脂质体介导的细胞转染实验
实验概要学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂
脂质体介导的优势有哪些？
脂质体是由脂双分子层组成的颗粒，可介导基因穿过细胞膜。通过脂质体介导比利用病毒转导进行基因转移具有以下明显的优势： ①脂质体与基因的复合过程比较容易； ②易于大量生产； ③脂质体是非病毒性载体，与细胞膜融合将目的基因导入细胞后，脂质即被降解，无毒，无免疫原性； ④DNA或RNA可得到保护
染色体介导的基因转移
中文名称染色体介导的基因转移英文名称chromosome-mediated gene transfer定 义以染色体为载体在细胞间转移遗传物质的操作。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
农杆菌介导法的过程介绍
根癌农杆菌的Ti质粒上有一段转移DNA（T-DNA），具有向植物细胞传递外源基因的能力，而细菌本身并不进入受体细胞。农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应，主要包括：①受伤的植物细胞为修复创伤部位，释放一些糖类、酚类等信号分子。 ②在信号分子的诱导下，农杆菌向受伤组织集中，并吸附在细胞表面。
膜受体介导的信号转导
与脂溶性的化学信号不同，亲水性信号分子(所有的肽类激素、神经递质和各种细胞因子等)均不能进入细胞。它们的受体位于细胞表面。这些受体与信号分子结合后，可以诱导细胞内发生一系列生物化学变化，从而使细胞的功能如生长、分化及细胞内化学物质的分布等发生改变，以适应微环境的变化和机体整体需要。这一过程可以称
受体介导的胞饮作用介绍
中文名称受体介导的胞饮英文名称receptor-mediated pinocytosis定 义通过受体介导将特殊的、比较小的溶质有选择性的连续地摄入细胞内的过程。是穿越细胞膜运送物质的方式之一。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），信号转导（二级学科）
关于免疫介导性PRCA的介绍
早期研究证明，将PRCA患者血浆注入实验动物体内后能抑制骨髓红系造血，进一步研究表明PRCA患者血浆抑制活性来源于其IgG组分（PRCA-IgG），PRCA-IgG体外表现出抑制自身及正常红系祖细胞（BFU-E及CFU-E）生长活性，且呈浓度依赖性，但对自身及正常粒-单系祖细胞（CFU-GM）生
生物粒子介导的－DNA－转染实验
试剂、试剂盒 CaCl2乙醇甘油亚精胺质粒DNA细胞生长培养基仪器、耗材 基因枪金或钨粒子镜头纸微量离心管需转染的细胞或组织实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录1。稀释贮存液至所需浓度CaCl2(2.5mol/L)乙醇未曾打开过的纯乙醇一瓶。乙醇有吸湿性，在空气中会吸收水分。在
生物粒子介导的－DNA－转染实验
下面是拫据 Horch 等（1999)、Sanford 等（1993)、主要基因枪生产商的出版物（US/EG Bulletins 1688 and 2087;Bio-Rad) 以及 Steve Finkbeiner(University of California,San Francisco) 建立
载体蛋白介导的易化扩散介绍
运输过程是通过载体蛋白发生可逆的构象变化实现的。载体蛋白是膜上与物质运输有关的穿膜蛋白，对所运输的物质具有高度选择性，当载体蛋白一端表面的特异结合部位与专一的溶质分子结合，引发载体蛋白空间构象改变，将运送的溶质分子从结合的一侧转运到膜的另一侧；变构的载体蛋白对被转运物质的亲和力同时发生改变，于是被转
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物 遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养 3、烟草叶片与对