新方法可在大量细胞内自动测定基因表达
《自然—方法学》报道了一种可在数千个人体细胞中自动测量基因表达的方法。该方法使单分子荧光原位杂交技术（smFISH）成倍放大，并能确定细胞内RNA转录发生的位置，为了解RNA转录的生物功能提供了重要线索 通过将目标与荧光探针相结合，smFISH可用于检测细胞内的特定RNA序列，但要将每个RNA分子对应的“点”成像，需要设置更高的成像放大率和精确度。Lucas Pelkmans等人采用了更明亮的探针，让其可以对更多细胞进行快速、强大的低放大倍数成像，精确定量低水平表达以及查询较短的RNA转录。他们使用的软件能够自动勾画出细胞和细胞核，对“点”计数以定量表达并全面记录细胞内转录发生的位置。与那些通过高通量RNA测序技术获得的结果相比，此次人体细胞研究的结果展现出了高度可重复的表达水平。 通过利用数据发现与细胞功能有关的基因的方式，研究人员展现出了测定大量细胞内转录表达和转录发生位置的重要性。......阅读全文
T细胞基因的转录激活及其表达
TCR/CD3复合物与配体结合后，经多种信号转导途径传递信号，最终导致T细胞活化和增殖。信号转导中所涉及的基因根据其活化时间可以分为早早期、早期、晚期基因三种类型（表8-5)。早早期基因的转录不需蛋白的合成，而早期及晚期基因的转录则需蛋白的合成。早早期及早期基因转录在有丝分裂期之前，而晚期基因转
基因表达的转录机制介绍
转录过程由RNA聚合酶（RNAP）进行,以DNA为模板,产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动,留下新合成的RNA链。 基因组DNA由两条反向平行和反向互补链组成,每条链具有5'和3'末端。这两条链分别称为“模板链”（产生RNA转录物的模板）和“编码链”（含有转录本序列的
转录组测序与转录表达谱测序的异同
转录组测序可以得到特定条件下所有mRNA转录本的丰度信息，从而发现新的转录本和可变剪接体基因表达谱(gene expression profile)：指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特
基因表达转录调控的主要途径
基因表达转录调控可分为三种主要途径:1)遗传调控(转录因子与靶标基因的直接相互作用);2)调控转录因子与转录机制相互作用,3)表观遗传调控(影响转录的DNA结构的非序列变化)。
基因表达的转录调控的介绍
可分为三种主要途径： 1）遗传调控（转录因子与靶标基因的直接相互作用）； 2）调控转录因子与转录机制相互作用； 3）表观遗传调控（影响转录的DNA结构的非序列变化）。 通过转录因子直接调控靶标DNA表达是最简单和最直接的转录调控改变转录水平的方法。基因的编码区周围通常都具有几个蛋白质结合
关于基因表达的转录机制介绍
基因表达的转录过程由RNA聚合酶（RNAP）进行，以DNA为模板，产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动，留下新合成的RNA链。 基因组DNA由两条反向平行和反向互补链组成，每条链具有5'和3'末端。这两条链分别称为“模板链”（产生RNA转录物的模板）和“编码链”（含有转
关于基因表达的转录调控介绍
基因表达的转录调控可分为三种主要途径：1）遗传调控（转录因子与靶标基因的直接相互作用）；2）调控转录因子与转录机制相互作用，3）表观遗传调控（影响转录的DNA结构的非序列变化）。 通过转录因子直接调控靶标DNA表达是最简单和最直接的转录调控改变转录水平的方法。基因的编码区周围通常都具有几个蛋白
基于－AFLP－的转录表达谱分析
实验材料Total RNA试剂、试剂盒链霉亲和素包被的磁珠洗涤缓冲液EDTA第一链缓冲液第二链缓冲液DTT4 dNTP 的混合物SuperScript IIRNase HSTEXTris· ClRL缓冲液ATPPCR 缓冲液T4 多核苷酸激酶缓冲液加样染料硅烷黏合硅烷溶液变性聚丙烯酰胺凝胶TBE 分
基于－AFLP－的转录表达谱分析（一）
实验方法原理 实验材料 Total RNA试剂、试剂盒 链霉亲和素包被的磁珠洗涤缓冲液EDTA第一链缓冲液第二链缓冲液DTT4 dNTP 的混合物SuperScript II RNase HSTEXTris· ClRL缓冲液ATP PCR 缓冲液T4 多核苷酸激酶缓冲液加样染料硅烷黏合硅烷溶
基于－AFLP－的转录表达谱分析（二）
19. 取 10 ml 反应混合物和分子质量参照物一起电泳，检查预扩增的情况。 应该看到位于 50～500 bp 之间的，呈拖尾状的弥散产物。20. 按 1：500 稀释 2 ul 非选择性的预扩增cDNA片段（也就是＋0/＋0）到Tris· Cl （pH 8. 0）/0.1 mmol/L EDTA
基因表达的转录后调控的介绍
真核生物的RNA被翻译之前需要通过核孔输出,因此核输出对基因表达有着显著影响。所有进出细胞核的mRNA的运输都是通过核孔进行的,受到各种输入蛋白和输出蛋白的控制。 携带遗传密码的mRNA需要存活足够长的时间才能被翻译,因为mRNA在翻译之前必须经过很长距离的运输。在典型的细胞中,RNA分子仅在
揭示新小鼠巨细胞病毒转录激活因子病毒晚期蛋白表达
2020年1月2日，病毒学期刊Journal of Virology 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所钱志康课题组的最新研究“Murine Cytomegalovirus Protein pM49 Interacts with pM95 and Is Critical for Vira
基因表达的转录后调控的相关介绍
基因表达的转录后调控：真核生物的RNA被翻译之前需要通过核孔输出，因此核输出对基因表达有着显著影响。所有进出细胞核的mRNA的运输都是通过核孔进行的，受到各种输入蛋白和输出蛋白的控制。 携带遗传密码的mRNA需要存活足够长的时间才能被翻译，因为mRNA在翻译之前必须经过很长距离的运输。在典型的
细胞核中表达转录因子可以和细胞质中的酶互作吗
比较典型的大分子： 可以进入细胞核的物质：DNA聚合酶、RNA聚合酶、核糖体蛋白、转录因子； 可以进入细胞质的物质：mRNA、核糖体亚基。 各种小分子，都是可以自由出入核孔的。
如何证明基因需要转录调控元件调控表达
如何证明基因需要转录调控元件调控表达如果此转录因子能够激活靶启动子，则荧光素酶基因就会表达，从而对基因的表达起抑制或增强的作用，通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性：（1）构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒，荧光素酶与底物反应，如pGL3-basic等。（3）
启动子与转录因子/基因表达调控蛋白
目的基因的表达调控生命活动丰富多彩、千变万化。但是万变不离其宗，不管如何变化都围绕着中心法则展开。核酸作为遗传物质指导蛋白质的表达，表达产生的一些特殊蛋白（如转录因子、调控蛋白）反过来又对DNA指导合成蛋白质的过程进行调控。对基因表达调控的研究一直是生物学研究热点，涉及到生命活动的各个过程，也是各类
tDEG（转录组差异表达基因深度分析）
本公司采用自主研发与成熟开源软件相结合的方式构建了专业高效的生物信息分析流程，对您获得的海量RNA-seq序列的质量、特征等重要信息进行图形可视化；对两个以上生物学样本之间的差异表达基因进行可信分析；对差异表达所揭示出的重要科学问题进行中肯分析；让您快速“发现”所关注生物学问题，医学问题和农业问题
CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较
CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统，为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识，特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较，从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1．CHO细胞表达系统 （1）优点 CHO细胞属于成纤维细胞，既可以贴壁生
真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体
原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河，这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此，体外蛋白表达开始为科学界所关注，不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差，使其未能得到进一步发展。 到80年代中期Sp
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河，这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此，体外蛋白表达开始为科学界所关注，不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差，使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进
嗅鞘细胞的细胞表达介绍
OECs表达胶质纤维酸性蛋白（GFAP），在血管壁形成终足，以及参与形成胶质界膜，此界膜大致勾勒出了嗅神经轴突与嗅球颗粒层嗅小球的交界线，OECs在免疫细胞化学超微结构特征以及与轴突的功能联系方面与星形胶质细胞存在明显不同。OECs对神经生长因子受体（P75NGR）Laminin细胞粘附分子L1
真核细胞表达系统3
由于腺病毒易于培养、纯化，宿主范围广，故采用该类病毒构建的载体被广泛应用腺病毒载体的构建依赖于腺病毒穿梭质粒和包装载体之间的同源重组。但是哺乳动物细胞内的这种同源重组效率很低，利用细菌内同源重组法构建重组体效率会大大提高，即将外源基因插入到腺病毒穿梭质粒中，形成转移质粒，将其线性化后与腺病毒包装质粒
真核细胞表达系统1
自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成，越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基
真核细胞表达系统2
在病毒感染晚期，由于大量外源蛋白的表达引起昆虫细胞的裂解，胞质内的物质释放出来，与 目的蛋白混在一起，从而使蛋白的纯化工作变得很困难，另外水解酶的释放会降解重组蛋白。为了克服以上这些困难，科学工作者先后尝试用丝蛾肌动蛋白基因启动子或杆状病毒ie-1基因启动子表达外源蛋白，但效果都不明显。Farr
连接非编码突变和肿瘤基因表达的转录组全网络
肿瘤基因组中充满了非编码突变，这些突变对肿瘤的影响研究还不是很清晰。加州大学圣地亚戈分校的科学家Wei Zhang and Ana Bojorquez-Gomez，Trey Ideker，在最近国际顶级期刊Nature Genetics发表文章 A global transcriptiona
体内无细胞DNA的表达
对于一些由缺乏三种特定蛋白质的基因突变引起的疾病（如Leber先天性黑蒙和血友病），直接的想法是将能够表达相关蛋白质的基因“播种”到体内，而不是“种”到基因组中，但在细胞质中自由表达。最典型的例子是几种批准的病毒转染基因疗法（如FDA批准的用于治疗遗传性眼病的基因药物“Luxturna”）。这种方法
造血干细胞的表达
荧光标记单参数检测造血干细胞（CD34-FITC）实验步骤展开荧光标记双参数检测造血干细胞实验步骤展开荧光标记三参数检测造血干细胞（ProCOUNT法）实验步骤展开
造血干细胞的表达
荧光标记单参数检测造血干细胞（CD34-FITC） 荧光标记双参数检测造血干细胞 荧光标记三参数检测造血干细胞（ProCOUNT法） 实验步骤
CHO细胞表达体系及其特点
子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中，最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary，CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就 CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。C