研究发现报春花属自然杂交或致耐寒基因转移
记者从中科院昆明植物研究所获悉，该所孙卫邦研究组的博士马永鹏日前与丽江高山植物园的博士吴之坤合作，发现报春花属植物自然杂交或致耐寒基因转移。相关研究成果日前在线发表于《植物学纪事》。 据马永鹏介绍，报春花属约有500种，是报春花科中观赏价值极高的一个大属，主要分布于北半球温带和高山地区，仅有极少数种类分布于南半球。我国有报春花属300多种，主要分布于东喜马拉雅—横断山区域，该区域被认为是报春花属植物的起源与分布中心。 “我们研究了分布于丽江玉龙雪山的橘红灯台报春、霞红灯台报春及其自然杂交形成的杂交后代，通过野外实验确定了两种亲本的繁殖生物学特征和传粉者。同时，通过实施大量野外实验排列与室内的分子生物学手段，揭示了该杂交过程和杂交方向。”马永鹏说，研究显示，该杂交过程是一个单向杂交，总是以橘红灯台报春为母本，所有检测到的杂交后代都是一些和橘红灯台报春的回交后代。同时，野外的杂交后代存在较高的坐果率和结实率。 ......阅读全文
Western杂交
实验概要本实验介绍了Western杂交的基本流程。主要试剂液氮，提取缓冲液(1 x PBS，10ug/mL Leupeptin，1 mM PMSF，5 mMBenzamidine. 2mM EDTA)，转移缓冲液(39mM Glycine，48mM Tris，0.037% SDS，20%甲醇)，
细胞杂交
实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH
Northern杂交
实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育，而后广泛洗
“华南珍稀濒危植物的野外回归研究与应用”通过鉴定
近日，由中科院华南植物园负责完成的“华南珍稀濒危植物的野外回归研究与应用”项目通过广东省科技厅成果鉴定。有关专家认为：该成果在珍稀濒危植物野外回归机理、集成生物技术与生态恢复技术进行珍稀濒危植物回归方面，均达到国际领先水平。 该项目由华南植物园研究员任海、邢福武、段俊、马国华、张奠湘
分子杂交技术Southern杂交的操作步骤
(1) 约50μl体积中酶切10pg-10μg的DNA, 然后在琼脂糖凝胶中电泳12-24小时(包括DNA分子量标准物)。 (2) 500ml水中加入25μl 10mg/ml溴化乙锭,将凝胶放置其中染色30分钟, 然后照相。 (3) 依次用下列溶液处理凝胶,并轻微摇动: 500ml 0.2m
分子杂交技术Northern杂交的操作步骤
(1)RNA经变性电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA转移至硝酸纤维素滤膜上。转移方法与转移DNA的方法相似。 (2)转移完毕后 ,以6×SSC溶液于室温浸泡此膜5分钟,以除去琼脂糖碎片。 (3)将该杂交膜夹于两张滤纸中间,用真空烤箱于80℃干燥0.5-2小时。 (4) 用下列两种溶液之一进行
概述分子杂交技术常见的杂交分类
分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上，然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交，经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象，分子杂交基本可分为以下几大类： (1) Southern杂交:DNA片段经电泳分离后,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,然后与探
关于Southern杂交的预杂交的介绍
将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须先进行一个预杂交的过程。因为能结合DNA片段的膜同样能够结合探针DNA，在进行杂交前，必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭，这就是预杂交的目的。预杂交是将转印后的滤膜置于一个浸泡在水浴摇床的封闭塑料袋中进行，袋中装有预杂交液，使预杂交液不断在
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应
分子杂交技术Southern杂交的相关介绍
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤: (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。 (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。 (3)预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。
杂交育种的杂交过程介绍
选择父母本父母本的选择取决于育种的目标和目的。亲本植物必须从当地挑选，并被认为是最适合当地条件的。去雄这是植物杂交的第二个步骤。自交系材料在正常条件下生长的，需要去雄。去雄就是将雌亲本的雄蕊在其开裂并散落花粉之前去除。单性生殖的植物不需要去雄，但双性生殖或自花授粉植物需要去雄 。套袋套袋是植物杂交的
分子杂交技术的几种常见的杂交
分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上，然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交，经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象，分子杂交基本可分为以下几大类：(1) Southern杂交:DNA片段经电泳分离后,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,然后与探针杂交。
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...（一）
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段实验实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材 载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤 原位杂交的基本操作方法（图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交：标底是玻片上的染色体和细胞核，探针是带标记的待测
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...
实验材料核苷酸 试剂、试剂盒冰水 8-羟基喹啉
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验
实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法（图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交：标底是玻片上的染色体和细胞核，探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照，图 14.3(a)
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...（三）
3.5 杂交混合变性和杂交( 1 ) 离心管中准备杂交液，见表14. 1，充分混合。 ( 2 ) 在离心管中加入 34 μl 杂交液、2 μl 转基因探针、1 μl 指示探针或对照探针，蒸馏水补齐至 40 μl，作为探针混合液。( 3 ) 探针变性，放入 70°C 水浴锅 10 min , 然后置冰
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...（二）
3.2 染色体制备无论是荧光染色还是 FISH，分裂期和分裂间期的染色体制备均于载物片上进行。建议使用蛋白水解酶对材料进行预处理，以去除细胞壁和细胞质，再将样品置于载玻片上，滴上乙酸，然后盖上玻片压片。所有操作均于室温下进行，除非是特殊说明。在洗涤和材料准备时使用小培养皿，方法见 2. 2 节。(
华南植物园二型花柱进化研究取得进展
从异花授粉向自花授粉的转变是植物交配系统的进化中最显著的一种。异花授粉为主的二型花柱多态性向自花授粉为主的同型花柱的进化是该转变的代表。这种交配系统的转变对种群的繁殖生态、谱系地理、群体遗传和进化产生了显著的影响。报春花属植物以中国西南山地为现代分布中心，历来是研究二型花柱进化的模式植物。其中，
土壤温湿度速测仪测量土壤温度与净光合速率关系
不同温度和湿度对于植物的生长以及光合作用等会产生不一样的影响，在不一样的气温下，随着土壤温度的变化植物的蒸腾和光合速率随之变化，同时胞间CO2浓度也会有所波动;彼此之间的相关性也不相同，通过土壤温湿度速测仪测定不同的温度和湿度下植物的各个生理机制的变化和原理有什么差异。试验主要以生长于高山的紫花雪山
原位杂交仪—原位杂交实验（二）
原位杂交第二天 1. 1）将探针回收，放于－20C保存（通常探针可重复使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。 3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。 4）置换0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。
分子杂交技术斑点杂交的操作步骤
(1) 10μl样品与20μl 100%甲酰胺、 7μl 37%甲醛、2μl 20×SSC混合。混合置于68℃，15分钟后置冰浴中。 (2) 用0.1mol/L NaOH清洗点样器,再用无菌水充分冲洗。将一张经20×SSC浸润的滤纸铺在点样器上,上面再铺上一张经20×SSC浸润1小时的硝酸纤维
原位杂交仪—原位杂交试验（一）
收集斑马鱼的胚胎，在Holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小时后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然后换成甲醇，在-20C 保存，待用（两天和两天以上的胚胎需要用双氧水处理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成）
分子杂交技术斑点杂交的实验简介
斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交，以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于
原位杂交仪—原位杂交实验（三）
原位杂交第三天 1） 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlMABT置换，25分钟，再用1mlMABT溶液置换，一小时以上，最后用1mlMABT溶液置换，25分钟。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
分子杂交技术Northern杂交的注意事项
(1)如果琼脂糖浓度高于1%，或凝胶厚度大于0.5cm，或待分析的RNA大于2.5kb,需用0.05mol/LNaOH浸泡凝胶20分钟,部分水解RNA并提高转移效率。浸泡后用经DEPC处理的水淋洗凝胶,并用20×SSC浸泡凝胶45分钟。然后再转移到滤膜上。 (2)在步骤(3)的操作中，如果滤膜
斑点杂交的DNA斑点杂交方法
①先将膜在水中浸湿，再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE，煮沸5min，冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干，密封保存备用。
分子杂交技术菌落原位杂交的介绍
(1) 盛有2×SSC的塑料盘同，将干烤的滤膜飘浮在液面上,彻底浸湿5分钟。 (2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放到位于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。 (3
荧光原位杂交的荧光原位杂交
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子（reporter molecule）结