上海交大研究组揭示细菌DNA新型限制修饰机制

细菌DNA新型限制修饰机制 近日,上海交通大学生命科学技术学院、微生物代谢国家重点实验室在DNA磷硫酰化修饰研究方面取得新进展,由德林教授研究小组与美国麻省理工学院Peter C. Dedon教授课题组合作,以博士生曹博为第一作者,在微生物领域顶级期刊《Molecular Microbiology》发表了题为“Pathological phenotypes and in vivo DNA cleavage by unrestrained activity of a phosphorothioate-based restriction system in Salmonella”的研究论文。 DNA磷硫酰化修饰是由硫原子取代了DNA磷酸骨架上非桥联氧原子,进而形成具有序列特异性和空间构象专一性的DNA大分子结构。这是表观遗传学领域近年发现的一种新型生理修饰现象,它突破了现有的DNA骨架由碳、氢、氧、氮、磷五种......阅读全文

质粒DNA导入细菌细胞实验

CaCl2转化法 一步法制备和转化感受态细菌实验 电转化法             实验材料 菌落 质粒DNA

修改DNA诱骗细菌产蛛丝

  蜘蛛纺出了工程师梦想的东西。它们的丝和钢铁一样坚固,同时具有弹性、无毒且能生物降解。但蜘蛛不容易养殖。每只仅能产生少量的丝,有时还会自相残杀。几十年来,科学家一直试图仿造这种银色的线,以用于手术缝线、运动装备和防弹背心。不过,他们合成的纤维始终有所欠缺。如今,一个团队“诱骗”细菌产生了和天然蛛丝

细菌质粒-DNA-的小量制备

实验方法原理 由于大肠杆菌染色体 DNA 比通常用作载体的质粒 DNA 分子大得多,因此在提取过程中,染色体 DNA 易断裂成线型 DNA 分子,而大多数质粒 DNA 则是共价闭环型,根据这一差异便可以设计出各种分离、提纯质粒 DNA 的方法。碱裂解法就是基于线型的大分子染色体 DNA 与小

DNA测序抑制超级细菌传播

  超级细菌的暴发困扰着英国剑桥市新生儿特殊护理病房的医护人员。在基因测序的帮助下,去年以来持续数月的困境终于结束了。刊登在近期出版的《柳叶刀―传染病》上的一份研究报告称,科学家首次测序了病原体基因,以便积极控制进行中的超级细菌暴发。   英国剑桥大学的临床微生物学家Sharon Peacoc

质粒DNA导入细菌细胞实验

实验材料 菌落质粒DNA试剂、试剂盒 CaCl2仪器、耗材 培养基平板实验步骤 1.  接种一个单菌落于50 ml LB培养液中,于37°C中速摇床培养过夜(250 r/min)。2.  往一个2 L的烧瓶中加人400 ml LB培养液,再加入4 ml过夜培养液,于37°C摇床(250 r/min)

细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数

需要知道DNA浓度、DNA片段长度。即可换算成拷贝数1A260 吸光度值=ds DNA 50 ug/ml=ss DNA 33 ug/ml=ss RNA 40 ug/ml核酸浓度=(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]= ng/ulMW 代表 克/摩尔,单位

细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数

需要知道DNA浓度、DNA片段长度。即可换算成拷贝数1A260 吸光度值=ds DNA 50 ug/ml=ss DNA 33 ug/ml=ss RNA 40 ug/ml核酸浓度=(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]= ng/ulMW 代表 克/摩尔,单位

与DNA白修饰相关因子介绍DICER1

该基因编码一种蛋白质,其氨基端含有一个dexh盒,羧基端含有一个RNA基序。编码蛋白作为一种核糖核酸酶发挥作用,由RNA干扰和小时态RNA(strna)途径产生抑制基因表达的活性小RNA成分。选择性剪接导致多个转录变体。This gene encodes a protein possessing a

与DNA白修饰相关因子介绍SMARCA4

该基因编码的蛋白是Swi/SNF蛋白家族的一员,与果蝇的布拉马蛋白相似。这个家族的成员有螺旋酶和ATP酶活性,被认为通过改变这些基因周围的染色质结构来调节某些基因的转录。编码蛋白是大型ATP依赖染色质重塑复合物snf/swi的一部分,这是染色质抑制的基因转录激活所必需的。此外,该蛋白能结合BRCA1

与DNA白修饰相关因子介绍SMARCD1

该基因编码的蛋白质是SWI / SNF蛋白质家族的成员,其成员具有解旋酶和ATPase活性,被认为可以通过改变那些基因周围的染色质结构来调节某些基因的转录。 编码的蛋白质是大型ATP依赖的染色质重塑复合体SNF / SWI的一部分,并且与酵母Swp73蛋白具有序列相似性。 已经发现该基因的两个编码不

与DNA白修饰相关因子介绍DNMT3A

CpG甲基化是一种表观遗传修饰,对胚胎发育、印记和X染色体失活具有重要意义。对小鼠的研究表明,DNA甲基化是哺乳动物发育所必需的。这个基因编码一种DNA甲基转移酶,被认为在从头甲基化中起作用,而不是维持甲基化。该蛋白定位于细胞质和细胞核,其表达受发育调节。CpG methylation is an

与DNA白修饰相关因子介绍MEN1

这个基因编码脑膜,一种与多发性内分泌肿瘤1型综合征相关的假定的肿瘤抑制因子。体外研究表明,脑膜定位于细胞核,具有两种功能性核定位信号,并通过JUND抑制转录激活,但这种蛋白的功能尚不清楚。在Northern blots上检测到两条信息,但未对较大的信息进行描述。选择性剪接导致多个转录变体。This

与DNA白修饰相关因子介绍CHD2

CHD家族蛋白的特征是存在染色质(染色质组织修饰剂)结构域和SNF2相关解旋酶/ ATPase结构域。 CHD基因可能通过修饰染色质结构来改变基因表达,从而改变转录设备对其染色体DNA模板的访问。 已经发现该基因的编码不同同工型的剪接的转录变体。 [由RefSeq提供,2008年7月]The CHD

与DNA白修饰相关因子介绍ARID1A

该基因编码Swi/Snf家族的一个成员,其成员具有螺旋酶和ATP酶活性,并被认为通过改变这些基因周围的染色质结构来调节某些基因的转录。编码蛋白是大型ATP依赖染色质重塑复合物snf/swi的一部分,这是染色质抑制的基因转录激活所必需的。它至少有两个保守域,对其功能可能很重要。首先,它有一个DNA结合

与DNA白修饰相关因子介绍TAF1

rna聚合酶ii启动转录需要70多种多肽的活性。协调这些活动的蛋白质是基础转录因子tfiid,它与核心启动子结合以正确定位聚合酶,充当组装其余转录复合物的支架,并充当调控信号的通道。tfiid由tata结合蛋白(tbp)和一组进化上保守的蛋白质(tbp相关因子或taf)组成。tafs可能参与基础转录

与DNA白修饰相关因子介绍SMARCB1

SMARCB1基因编码的蛋白是ATP依赖性染色质调节复合物SWI/SNF的核心亚基,参与基因的表观修饰和转录调控。SMARCB1基因突变与神经鞘瘤的发生相关,其作为抑癌基因可以诱导细胞G1停滞、抑制染色体非整倍性等,发挥肿瘤抑制的作用。

与DNA白修饰相关因子介绍MED12

转录的启动部分受称为预启动复合物的大型蛋白质装配的控制。 这种预启动复合体的一个组成部分是一个称为Mediator的1.2 MDa蛋白聚集体。 该介体组分与包含该基因编码的蛋白质,介体复合物亚基12(MED12)以及MED13,CDK8激酶和细胞周期蛋白C的CDK8亚复合体结合。 和重新激发率。 M

PacBio推出首款检测DNA碱基修饰的软件

  美国第三代测序公司Pacific Biosciences近日宣布推出一个独特的解决方案,可利用PacBio® RS测序仪检测与表观遗传学调控和DNA损伤相关的DNA碱基修饰。   DNA碱基修饰(如甲基化)在多个生物进程中扮演了重要角色,包括生长和衰老、免疫、细菌致病性以及疾病发展。Pac

与DNA白修饰相关因子介绍EWSR1

该基因编码一种多功能蛋白,参与多种细胞过程,包括基因表达、细胞信号传导、RNA加工和转运。该蛋白包括一个N末端转录激活域和一个C末端RNA结合域。该基因与编码转录因子的各种基因之间的染色体易位导致参与肿瘤发生的嵌合蛋白的产生。这些嵌合蛋白通常由该蛋白的N末端转录激活域与转录因子蛋白的C末端DNA结合

与DNA白修饰相关因子介绍EP300

该基因编码腺病毒E1A相关的细胞p300转录辅激活蛋白。作为组蛋白乙酰转移酶,通过染色质重塑调节转录,在细胞增殖和分化过程中起重要作用。通过与磷酸化CREB蛋白特异性结合来介导cAMP基因调控。该基因也被鉴定为HIF1A(缺氧诱导因子1α)的共激活物,因此在缺氧诱导基因如VEGF的刺激中起到作用。这

与DNA白修饰相关因子介绍ARID2

该基因编码一个富含AT的相互作用域(ARID)的DNA结合蛋白家族成员。 ARID家族的成员在胚胎模式,细胞谱系基因调控,细胞周期控制,转录调控和染色质结构修饰中发挥作用。 该蛋白作为多溴和BRG1相关因子或PBAF(SWI / SNF-B)染色质重塑复合物的亚基,通过核受体促进配体依赖性转录激活。

与DNA白修饰相关因子介绍ERCC2

核苷酸切除修复途径是修复DNA损伤的机制。该基因编码的蛋白参与转录偶联核苷酸切除修复,是基础转录因子btf2/tfiih复合物的一个不可分割的成员。该基因产物具有ATP依赖性DNA解旋酶活性,属于解旋酶的RAD3/XPD亚家族。这种基因的缺陷可导致三种不同的疾病,即癌症易发综合征着色性干皮病互补组D

与DNA白修饰相关因子介绍TOP2A

这个基因编码一种DNA拓扑异构酶,这种酶在转录过程中控制和改变DNA的拓扑状态。这种核酶参与诸如染色体凝聚、染色单体分离以及DNA转录和复制过程中发生的扭转应力的减轻等过程。它催化双链DNA的两条链的瞬间断裂和重新结合,使双链彼此穿过,从而改变DNA的拓扑结构。这种酶有两种形式,可能是基因复制事件的

细菌基因组DNA提取实验

细菌基因组DNA提取可应用于:(1)获得细菌基因组DNA;(2)作为PCR模板;(3)用于测序、遗传信息分析等。实验方法原理本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DN

细菌质粒-DNA-的小量制备实验

细菌质粒的发现是微生物学对现代分子生物学发展的重要贡献之一。特别是自 70 年代末以来,根据质粒分子生物学特性而构建的一系列克隆和表达载体更是现代分子生物学发展、改良生物品种和获得基因工程产品不可缺少的分子载体,发展十分迅速,而质粒的分离和提取则是最常用和最基本的实验技术,其方法很多。仅大肠杆菌质粒

细菌dna四度能放多久

根据半保留复制原则,15N标记细菌的DNA分子在14N的培养基上培养,子代不存在只含有15N的DNA分子,既a为0,(根据此项可直接选出B答案),因为连续复制4次共获得16个DNA分子,有2个DNA分子同时含有15N和14N,既b为2,剩下的14个DNA分子只含有14N,既c为14.

细菌总DNA的提取和鉴定

【目的和要求】1.学会CTAB法提取细菌总DNA。2.掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳法。【实验原理】DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核蛋白复合物后,必须将其中蛋白质去除。CTAB(溴代十六烷基三甲胺)是一种去污剂,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中可溶并且稳定存在,若

细菌基因组DNA提取实验

            实验方法原理 本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD

细菌基因组DNA提取实验

实验方法原理 本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0×109 细菌中获得多至20 μg 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。实验材料 细菌培养物

DNA修饰-C8orf34基因信号通路介绍

该基因编码与环状AMP依赖性蛋白激酶调节剂有关的蛋白。 在接受化学治疗的患者中,该基因的天然突变与发生严重毒性反应的风险增加有关,例如腹泻和中性粒细胞减少。