北京大学CellRes获染色质免疫沉淀测序技术突破

生物动态光学成像中心黄岩谊课题组与汤富酬课题组合作,发展了一种基于微流控芯片的微量细胞样品处理与核酸俘获方法,成功实现了针对1000个细胞的染色质免疫沉淀测序(ChIP-Seq),大幅减少了这类实验中对样品起始量的要求,并利用这一方法研究了组蛋白H3第4位赖氨酸的3甲基化修饰(H3K4me3)在小鼠胚胎发育过程中的修饰模式,发现与小鼠胚胎干细胞相比,小鼠表皮干细胞与小鼠胚胎发育至6.5天的外胚层细胞在该修饰模式上更为相似,表明小鼠表皮干细胞是体内植入后外胚层细胞的一个可靠的体外模型。该研究结果于2014年9月2日在线发表在Cell Research上。 ChIP-Seq方法是现代测序技术用于阐述转录调控和表观遗传学研究的重要手段。通过有针对性地俘获和富集特定蛋白,可以获取与这些蛋白结合的DNA片段,将其进行纯化后可以用于高通量测序,获取特定DNA-蛋白相互作用和结合位点的完整信息。 利用微流控技术,将实验操作中关键的......阅读全文

小鼠胚胎的长时间、6D活细胞观察

哺乳动物细胞胚胎植入发育和时间空间的变化协调是密不可分的,因此,对于这些发育过程的分析也必须是实时,动态而且3D的。我们过去经常使用的荧光蛋白表达技术,mRNA显微注射以及时相荧光显微观察使得活细胞成像成为了可能,但传统的荧光显微镜得到的数据却不能用来构建三维构象,这是由于荧光显微镜不能透过胚胎的厚

揭示小鼠胚胎的发育时钟和从头细胞极化机制

在植入前发育的过程中,顶-底细胞极性(apicobasal cell polarity)的建立是从全能性向多能性过渡的关键,从而诱导细胞向滋养外胚层(trophectoderm)分化。在小鼠胚胎中,这一事件被设定在8个细胞阶段发生,这一时间遵循一种内在的发育时钟,与胚胎大小或细胞周期进展无关。尽管顶

关于胚胎干细胞的研究进展—小鼠ES细胞的介绍

  小鼠ES细胞的分离方法基本成熟,且已广泛应用于生命科学研究的各个领域。1981年Evans首次分离得到小鼠ES细胞,他以手术切除受精后2.5 d小鼠卵巢并结合激素注射干扰子宫环境,从而使胚胎延迟着床,再回收胚胎,将其体外培养于STO细胞饲养层上,结果得到了小鼠ES细胞系。Martin G R以免

日本用小鼠胚胎干细胞高效培育小脑神经细胞

  日本理化学研究所9月13日发布新闻公报称,该所研究人员成功诱导小鼠胚胎干细胞,有选择性地分化成小脑神经细胞,且实现了较高的分化效率。  公报说,小脑皮质中层内的浦肯雅细胞是掌管精确运动和学习的主要神经细胞,在医学方面具有相当重要的作用,以往诱导胚胎干细胞有选择性地分化成浦肯雅细胞的方法

小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化

实验概要小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化主要试剂无菌水、0.1%明胶、DPBS、0.05%Tripsin、fibronection、Laminin、细胞基础培养液、N2B27培养液、mES培养液C、小鼠EB培养基、神经干细胞培养液(NSC培养液)主要设备35 mm、100 mm培养皿、12孔

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠                                                          试剂、试剂盒胎牛血清                                                          

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

方法:神经干细胞的培养①原代细胞的培养:取孕13.5天昆明种二级孕小鼠,引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜,取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜,暴露胎鼠,剪开颅骨,取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中,体视显微镜下剥离脑膜,分离胎

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清

小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立

  中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中,首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系,而这些细胞保持了一定水平的雄性印记,并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》(Cell)

小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结2

网友观点是:1、关于如何确底胚胎期12.5d~13d的小鼠?希望大家能够介绍一下自己所采用的方法,集思广益。我所采用的方法是选择同一天出生的三对小鼠,到成熟(8~10 w)后,分三周合笼,(每周合笼一对),然后待最早合笼的小鼠产崽后,再取另两个雌鼠的胚胎。不知道这样行不行,也没注意别人是怎样做的。另

科学家利用干细胞首次开发出“人工小鼠胚胎”

  近日,来自剑桥大学的科学家利用两种类型的干细胞以及3D支架,成功在培养基中制造出了一种类似小鼠胚胎的结构,相关研究刊登于国际杂志Science上。理解胚胎发育的早期阶段一直是科学家们非常感兴趣的领域,因为其能够帮助解释为何有超过三分之二的人类妊娠会发生失败。  一旦哺乳动物的卵细胞同精子结合受精

由最初期胚胎育成小鼠新型全能干细胞问世

  英国研究团队在近日《自然》杂志上撰文指出,他们借助一种全新方法,利用小鼠发育最初期的4—8个细胞胚胎,培育出了一种全能干细胞系——扩展潜能干细胞(EPSCs)。新细胞不仅能发育成任何类型的细胞,且发育潜力超过胚胎干细胞等,对人类的再生医学意义重大,有望为研究治疗流产和发育紊乱问题开辟新方向。  

挑战教条-用非卵细胞制备胚胎并诞健康小鼠

  最近,科学家们首次用非卵细胞制备出了动物胚胎,这一发现对于过去两个世纪的教条观念提出了挑战。  卵子可以被“诱骗”发展成一个胚胎,无需受精,但由此产生的胚胎——称为孤雌囊胚,在几天后会死亡,因为没有发生关键的发育过程,而这些过程需要来自精子的信息。  然而,来自英国巴斯大学生物与生物化学系的科学

SA处理制备远交系小鼠体细胞核移植胚胎技术

实验概要虽然体细胞克隆技术已经在不同物种的基因重编程基础研究中广泛应用,但是近十年来利用该技术成功制备胚胎的效率特别低。特别是在小鼠上,可克隆的小鼠系主要限于仔一代,如B6D2F1。最近,我们将TSA引进克隆技术中,使B6D2F1 小鼠卵丘细胞为供体细胞的核移植胚胎成功制备率提高了2-5倍。

小鼠胚胎首次在太空中生长

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/10/511300.shtm近日,日本山梨大学的研究人员首次在国际空间站(ISS)上成功培养了小鼠胚胎,以探索人类在太空怀孕是否安全。相关研究结果发表于《交叉科学》。   ?小鼠胚胎从国际空间站返回后的

STO小鼠胚胎成纤维细胞不贴壁的一些原因

细胞不贴壁的一些原因1. 胰酶消化时间把控不当:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。2. 缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。3

亚太唯一突变小鼠胚胎干细胞库落户苏大

  目前,英国剑桥大学威康信托桑格研究所赠送的41万株突变小鼠胚胎干细胞,越过重洋,成功落户苏州大学剑桥—苏大基因组资源中心,该中心由此成为亚太地区仅有的一个突变小鼠胚胎干细胞资源库。  突变小鼠胚胎干细胞是由桑格研究所领导的欧美联盟共同研发,全球仅有4份,其中3份分别在英国桑格研究所、德国和美国,

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3E1)怎么养?

MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 Catalogue No. C1047 Product Format a T25 flask Culture Properties 贴壁

以色列研究人员用小鼠干细胞培育出鼠胚胎模型

以色列研究人员在新一期美国《细胞》杂志上发表论文说,已使用小鼠干细胞培育出具有早期大脑和跳动心脏的小鼠胚胎模型,这一过程无需精卵结合。 以色列魏茨曼科学研究所就此发表的声明说,研究人员使用在培养皿中培育多年的小鼠干细胞,在没有精子、卵子及子宫的情况下,培育出了小鼠早期胚胎模型。胚胎模型存活

protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤2

体外向心肌细胞方向分化胚胎干细胞在体外去除LIF情况下会自然向心肌细胞方向分化,小鼠的R1系一般在第7-8天自然出现搏动的心肌细胞,与胚胎发育时间线是完全一致的。培养基:EB 配制一20×不含DMEM,FBS,LIF的溶液(该溶液也能用于ES培养基--见前述)。分装在50ml 离心管中,(稀释为

胚胎小鼠纹状体神经干细胞分离培养鉴定_原代传代培养

实验材料孕13d的昆明种二级小鼠试剂、试剂盒胎牛血清青霉素链霉素胰酶阻断剂葡萄糖台盼蓝蔗糖酚红磷酸氢二钾磷酸氢二钠FITC 偶联荧光抗小鼠二抗氯化钠氯化钾碘酒乙醇仪器、耗材解剖剪虹膜剪眼科剪离心机自动双重纯水蒸馏器微孔滤膜滤器培养箱体视显微镜无菌超净工作台培养瓶96孔细胞培养板24孔细胞培养板6 孔

protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤3

体外分化方法第1步:ES培养基在LIF存在的条件下维持细胞培养第2步:EB培养基使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。1、分散纯化细胞(参见上面的细胞传代部分)2、纯化 2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中,计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。3、用2ml

protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤1

1、一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2 、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,

炎症对小鼠雄性胚胎的致死率更低?

  根据本周《自然》在线发表的一篇论文Female-biased embryonic death from inflammation induced by genomic instability,睾酮或能预防炎症的有害影响,提高雄性小鼠胚胎的存活率。给怀孕小鼠注射布洛芬能够复制睾酮的这种保护作用,不

着床前小鼠胚胎线粒体功能障碍胚胎与胎盘发育的影响

实验概要本研究利用线粒体功能高度被抑制的体外胚胎模型,直接研究线粒体功能损伤对着床前后胚胎以及胎盘发育的影响。实验步骤1. 胚胎培养基用含4mg/ml BSA的MOPS-G1工作液收集受精卵。胚胎培养液分对照组培养液与试验组培养液(G1.2/G2.2,注:G1.2为对照组培养液;G2.2为试验组

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(含STR)mc3t3-e1细胞怎么养?

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)怎么养细胞中文名称:小鼠胚胎成骨细胞前体细胞细胞形态:成纤维细胞样细胞特性:贴壁培养条件:DMEM+10% FBS规格:T25/ml温度:37°C空气条件:5% CO2,95% AIR培养步骤:1、吸走用于培养基,加入 3-5mL PBS 后轻轻晃动培养瓶

小鼠胚胎干细胞系MESPU30-ELISA试剂盒操作流程

小鼠胚胎干细胞系MESPU30ELISA试剂盒操作流程:1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验_胰酶消化法2

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗相关研究。实验方法原理将小鼠的成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒PB

-亚太地区唯一“突变小鼠胚胎干细胞库”落户苏大

  近日,由英国剑桥大学威康信托桑格研究所赠送的41万株突变小鼠胚胎干细胞,越过重洋,成功落户苏州大学剑桥—苏大基因组资源中心,该中心由此成为亚太地区仅有的一个突变小鼠胚胎干细胞资源库。  突变小鼠胚胎干细胞是由桑格研究所领导的欧美联盟共同研发,全球仅有4份,其中3份分别在英国、德国和美国,最后1份

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验_胰酶消化法1

实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料孕鼠试剂、试剂盒PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离心管手术