胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

方法:神经干细胞的培养①原代细胞的培养:取孕13.5天昆明种二级孕小鼠,引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜,取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜,暴露胎鼠,剪开颅骨,取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中,体视显微镜下剥离脑膜,分离胎鼠纹状体,仔细剥离血管及脑膜,将收集到的纹状体在D-hanks液中漂洗两次,置于盛有4℃D-hanks液的器皿中,用虹膜剪将组织剪碎,加入0.125℅的胰酶消化(37℃,15min),期间每隔5min震荡一次。500转离心5min, 弃上清,D-hanks液清洗两次,将沉淀细胞重悬于增殖培养基中,培养基成分:DMEM/F12(1:1),2% B27 supplement,青霉素、链霉素各100U/ml,EGF 20 ng/mL,b-FGF 10ng/mL。用火焰抛光的吸管反复吹打,分散组织制成单细胞悬液,吸取9滴细胞悬液、......阅读全文

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

方法:神经干细胞的培养①原代细胞的培养:取孕13.5天昆明种二级孕小鼠,引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜,取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜,暴露胎鼠,剪开颅骨,取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中,体视显微镜下剥离脑膜,分离胎

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠                                                          试剂、试剂盒胎牛血清                                                          

胚胎小鼠纹状体神经干细胞分离培养鉴定_原代传代培养

实验材料孕13d的昆明种二级小鼠试剂、试剂盒胎牛血清青霉素链霉素胰酶阻断剂葡萄糖台盼蓝蔗糖酚红磷酸氢二钾磷酸氢二钠FITC 偶联荧光抗小鼠二抗氯化钠氯化钾碘酒乙醇仪器、耗材解剖剪虹膜剪眼科剪离心机自动双重纯水蒸馏器微孔滤膜滤器培养箱体视显微镜无菌超净工作台培养瓶96孔细胞培养板24孔细胞培养板6 孔

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

鼠胚原代细胞培养             实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

鼠胚原代细胞培养             实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,

小鼠神经干细胞的分离

实验概要小鼠神经干细胞的分离主要试剂0.05% Trpsin、神经干细胞的分离溶液Ⅰ、神经干细胞的分离溶液II、神经干细胞的分离溶液III、神经干细胞培养液主要设备15 mL、50 mL离心管,10%FBS包被的玻璃巴斯德管,70 μm细胞滤膜,4℃低温离心机实验步骤(1)用10%FBS(vol/v

分离小鼠胚胎实验

实验方法原理 无菌条件下切除孕鼠(已知怀孕时间)子宫,分离胚胎。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 70%乙醇仪器、耗材 培养皿尖镊子尖剪刀超净工作台本生灯实验步骤 1. 交配。将分笼的雄鼠和雌鼠合笼进行交配,雌鼠 3 天后可进入动情期,此时交配的成功率最高。这一过程可以有计划地进行,使胚胎在适宜的时间

分离小鼠胚胎实验

分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神

分离小鼠胚胎实验

            实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经

厌氧菌的分离、培养及鉴定(二)

4.1.3 分离 (1)编号 取五支无菌水试管,分别用记号笔标明10-1、10-2……10-5。 (2)稀释 在无氧无菌的超净厌氧手套箱中的条件下,用无菌注射器吸取1mL混合均匀的液体样品,加入装有预还原生理盐水的厌氧试管中,用震荡器将其混合均匀,制成10-1稀释液。用无菌注射器吸取1mL10-1稀

厌氧菌的分离、培养及鉴定(一)

一 摘要: 1.1 实验内容: 厌氧菌的分离、培养及鉴定; 1.2 目的: 1 掌握厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法。 了解厌氧菌菌鉴定的一般方法。 2 复习并巩固平时所学的微生物知识与技能。 3 培养独立思考、设计和动手实验的能力。 二 介绍: 厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,其生理作

双歧杆菌的分离、培养及鉴定

园友sakuyaandy:我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养,如果没有的话,用厌氧瓶或厌氧缸都可以。培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不过这都是培养用的培养基,如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用,具体文献名称为园友jerrycs:厌氧微

双歧杆菌的分离、培养及鉴定

  我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养,如果没有的话,用厌氧瓶或厌氧缸都可以.培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不过这都是培养用的培养基,如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用,具体文献名称为园友jerrycs:    厌氧微生物在自然

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

小鼠胚胎干细胞的培养

完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1

产甲烷菌的分离、培养及鉴定

实验概要1. 掌握厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法。2. 观察产甲烷菌的形态特征并了解产甲烷菌的生长特性。实验原理1. 产甲烷菌:厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,其生理作用日益受到人们的重视。产甲烷菌是专性厌氧菌,对氧气非常敏感,因此,产甲烷菌的分离、培养及活菌计数的关键是提供无氧和低氧

小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化

实验概要小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化主要试剂无菌水、0.1%明胶、DPBS、0.05%Tripsin、fibronection、Laminin、细胞基础培养液、N2B27培养液、mES培养液C、小鼠EB培养基、神经干细胞培养液(NSC培养液)主要设备35 mm、100 mm培养皿、12孔

支原体的分离培养鉴定

溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,使含有精氨酸肉汤培养

支原体的分离培养鉴定

支原体的分离培养鉴定用于(1)检测支原体不同生化反应特(2)分离鉴定支原体。实验方法原理标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,使含有精氨酸肉汤培养液呈碱性而呈粉红色。实验材料细菌样本试剂、试剂盒支原体分离

支原体的分离培养鉴定

溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,使含有精氨酸肉汤培养

支原体的分离培养鉴定

支原体的分离培养鉴定溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,

分离小鼠室管膜下区

实验概要分离小鼠室管膜下区主要试剂DPBS主要设备6 cm细胞培养皿、医用镊、外科手术剪、不锈钢尖头医用镊、外科手术刀、体视显微镜实验材料小鼠:实验所选取的小鼠年龄大小由实验目的决定。如果需要胎鼠神经干细胞,一般选择E13.5 d或E14.5 d的胎鼠,其细胞增殖能力强,取材可取全脑;如果需要成体神

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进

小鼠角质细胞的分离和培养

实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下,用一把镊子夹住身体,另一把镊子拉开皮肤。4) 将

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮