SA处理制备远交系小鼠体细胞核移植胚胎技术
实验概要虽然体细胞克隆技术已经在不同物种的基因重编程基础研究中广泛应用,但是近十年来利用该技术成功制备胚胎的效率特别低。特别是在小鼠上,可克隆的小鼠系主要限于仔一代,如B6D2F1。最近,我们将TSA引进克隆技术中,使B6D2F1 小鼠卵丘细胞为供体细胞的核移植胚胎成功制备率提高了2-5倍。为了进一步验证TSA克隆技术的有效性,我们设计试验:利用TSA处理制备远交系ICR成鼠。实验步骤1. 供体细胞与受体卵母细胞的收集常规超排雌鼠(eCG 5IU,48h后hCG 5IU)获得卵丘卵母细胞。注射hCG后,13-15h从小鼠输卵管中冲出卵丘卵母细胞,放在0.1%透明质酸酶的Hepes-CZB中37℃ 10min。取ICR雄鼠尾尖,将尾部皮肤取下剪碎,放在35mm培养皿中加5ml 10%胎牛血清的DMEM培养液。10-14d,待细胞长满培养皿时,将细胞传代。2. TSA处理核移植后的胚胎并制备克隆后代利用成鼠卵丘细......阅读全文
SA处理制备远交系小鼠体细胞核移植胚胎技术
实验概要虽然体细胞克隆技术已经在不同物种的基因重编程基础研究中广泛应用,但是近十年来利用该技术成功制备胚胎的效率特别低。特别是在小鼠上,可克隆的小鼠系主要限于仔一代,如B6D2F1。最近,我们将TSA引进克隆技术中,使B6D2F1 小鼠卵丘细胞为供体细胞的核移植胚胎成功制备率提高了2-5倍。
体细胞核移植技术简介
体细胞核移植(Somatic Cell nuclear transfer):又称体细胞克隆,作为动物细胞工程技术的常用技术手段,即把体细胞核移入去核卵母细胞中,使其发生再程序化并发育为新的胚胎,这个胚胎最终发育为动物个体。用核移植方法获得的动物称为克隆动物。由于体细胞高度分化,恢复全能性困难,体细胞
人胚胎干细胞系:衍生与培养—小鼠胚胎饲养细胞的制备
实验步骤2.3 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备最广泛地用于支持 h E S 的伺养层细胞来自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,, 1998;Reu-binoffetal. , 2000],如小鼠胚胎饲养细胞(MEFs) ,尽管它们可能是最原始的间叶细胞的前体细胞
体细胞核移植技术的应用介绍
1. 加速家畜的遗传改良进程,促进优良种群繁育。2. 转基因克隆动物做生物反应器,生产珍贵的医用蛋白。3. 克隆动物的组织、器官做移植的供体。4.研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。5.在保护濒危物种方面,渴望利用该技术增加这些动物的存活数量。
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Insti
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
用CRISPR/cas9编辑精原细胞基因
利用CRISPR/Cas9 系统对胚胎进行基因编辑,可有效地产生具有靶向基因组修饰的生物体。三月十二日在Cell子刊《Cell Reports》发表的一项研究中,来自德克萨斯大学西南医学中心、芝加哥大学和犹他大学等处的研究人员,用CRISPR / cas9技术对大鼠的精原细胞进行基因编辑,为在大
胚胎显微操作-细胞核移植
(一)概况 哺乳动物核移植是指将胚胎单个卵裂球或体细胞核(核供体)移入去核的成熟卵母细胞或受精卵(核受体)中,采用一定的方法激活卵母细胞,使核供体和核受体融合为重构胚,经移植后发育成新个体的技术。通过核移植,可以不经过有性繁殖过程,连续不断地复制遗传上相同的胚胎,再借用胚胎移植技术,生产大量基因
北京生科院最新文章解析体细胞核移植关键过程
来自北京生命科学研究所的研究人员报道了小鼠体细胞核移植胚胎第一个细胞周期中,体细胞组蛋白乙酰化和甲基化修饰经历动态重编程的过程。这一研究成果公布在《Biology of Reproduction》杂志上。 领导这一研究的是高绍荣博士为,第一作者为王凤超,论文的其他作者还有寇朝辉,张郁。这一项研究
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
体细胞核移植技术的操作过程
细胞核的采集和卵母细胞的准备从供体身体的某一部位上取体细胞,并通过体细胞培养技术对该体细胞进行增殖。采集卵母细胞,体外培养到减数第二次分裂中期,通过显微操作去除卵母细胞中的核,由于减二中期细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管可以一并吸出细胞核和第一极体。细胞促融将供体细胞注入去核卵母细胞通过电刺激使
体细胞核移植的概念
体细胞核移植又称体细胞克隆,原理即细胞核的全能性,是动物细胞工程技术的常用技术手段。
核移植的具体方法
哺乳动物核移植技术研究进展哺乳动物核移植是将外源的一个细胞核与一个去核卵母细胞结合,产生遗传上同质的动物的技术。它在动物育种、制备转基因动物、基因治疗及器官移植等方面具有重大的作用。1、供体核的获得供体核可以是早期胚胎细胞、胚胎千细胞和体细胞。早期都采用合子核到64细胞期的胚胎细胞核质体分裂球作供体
哺乳动物核移植技术的具体方法
哺乳动物核移植技术研究进展哺乳动物核移植是将外源的一个细胞核与一个去核卵母细胞结合,产生遗传上同质的动物的技术。它在动物育种、制备转基因动物、基因治疗及器官移植等方面具有重大的作用。1、供体核的获得供体核可以是早期胚胎细胞、胚胎千细胞和体细胞。早期都采用合子核到64细胞期的胚胎细胞核质体分裂球作供体
Cell:科学家首次利用核移植生成人类胚胎干细胞
体细胞核转移(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)是一种将供体细胞的细胞核移植到已去除细胞核的卵细胞中去的重要技术,利用这种技术,科学家们能获得与供体细胞遗传相匹配的胚胎。 5月来自美国俄勒冈健康与科学大学的研究人员第一次利用核移植技术生成了人类胚胎干
关于体细胞核移植的简介
体细胞核移植(Somatic Cell nuclear transfer): 又称体细胞克隆,作为动物细胞工程技术的常用技术手段,即把体细胞核移入去核卵母细胞中,使其发生再程序化并发育为新的胚胎,这个胚胎最终发育为动物个体。用核移植方法获得的动物称为克隆动物。 由于体细胞高度分化,恢复全能性
体细胞核移植的应用特点
细胞核移植技术,就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中,使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体,使得核供体的基因得到完全复制。1996年世界上第一个使用该技术克隆的动物多利羊诞生。
关于孤雄单倍体胚胎干细胞的建立的介绍
2012年,中国科学院上海生物所的Yang等在Cell杂志上发文报道源自小鼠的孤雄单倍体细胞(androgenetic haploid embryonic stem cells, AG-haESCs)的成功建立。Yang等 [4]采用了两种方式来建立AG-haESCs。 第一种方式通过核移植(
石英晶体微天平和传统QCM的区别
一、克隆的早期研讨 克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁衍系。同一克隆内一切成员的遗传构成是完整相同的,例外仅见于有突变发作时。自然界早已存在自然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实践上就是一种克隆。但是,自然的哺乳动物克隆的发作率极低,成员数
关于目前克隆技术研讨现状分析
一、克隆的早期研讨 克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁衍系。同一克隆内一切成员的遗传构成是完整相同的,例外仅见于有突变发作时。自然界早已存在自然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实践上就是一种克隆。但是,自然的哺乳动物克隆的发作率极低,成员数
关于目前克隆技术研讨现状分析
一、克隆的早期研讨 克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁衍系。同一克隆内一切成员的遗传构成是完整相同的,例外仅见于有突变发作时。自然界早已存在自然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实践上就是一种克隆。但是,自然的哺乳动物克隆的发
简述体细胞核移植的应用前景
1、加速家畜的遗传改良进程,促进优良种群繁育。 2、转基因克隆动物做生物反应器,生产珍贵的医用蛋白。 3、克隆动物的组织、器官做移植的供体。 4、研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。 5、在保护濒危物种方面,渴望利用该技术增加这些动物的存活数量。
体细胞核移植的定义及应用
体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,简称:SCNT),又称体细胞克隆,是遗传学及发育生物学实验之中一种使用体细胞和卵细胞培育胚胎的常用技术手段。该技术提取去核卵母细胞,并把供体体细胞核移入卵母细胞中。体细胞核移植技术被应用于临床治疗及克隆技术中。世界上第一只克隆
简述克隆的早期研究
克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,clone通常被意译为无性繁殖系。同一克隆的所有成员的遗传构成是完全相同的,例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而,天然的哺乳 动物克隆的发生率极低,成员数目太少(一般为两个),且
小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立
中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中,首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系,而这些细胞保持了一定水平的雄性印记,并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》(Cell)
克隆技术研究现状
一、克隆的早期研究 克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的,例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而,天然的哺乳动物克隆的发生率极低,成员数
细胞工程的发展简史
细胞的发现 1665年,英国人胡克(Hooke)利用自己设计的显微镜第一次观察到了细胞。 细胞理论的提出 1838年,施莱登(Schleiden)发表“植物发生论”,认为无论怎样复杂的植物都由细胞构成。 1839年,施旺(Schwann)发表 “关于动植物结构和生长一致性的显微研究”。提
科学家称过低发育效率阻碍哺乳动物克隆
距离第一个克隆生命——“多莉”羊诞生已有15年,克隆人一直是伦理学划定的禁区,但与此同时,人们总能不断听到来自科学界的种种关于克隆人将会实现的声音。近日,美国哈佛大学医学院的遗传学家乔治·丘奇表示,自己能够利用克隆技术“复活”早在3.3万年前就已灭绝的尼安德特人。面对人类克隆,你
全球首例灵长类自体胚胎干细胞成功构建
记者3日从昆明理工大学灵长类转化医学研究院获悉,该院牛昱宇、代绍兴、季维智团队首次通过胚胎分割技术,从单个灵长类胚胎培育出健康活体猴及遗传背景完全匹配的自体胚胎干细胞,并首次获得遗传背景一致的灵长类胚胎干细胞、诱导多能干细胞和体细胞核移植胚胎干细胞,为人类再生医学开辟新路径。相关研究成果发表在《自然