日本科学家找到大幅提高克隆鼠出生率方法
这项技术将来有望应用于畜产领域 日本研究人员在最新一期美国《科学》杂志网络版上发表论文说，如果X染色体上的一个基因异常发挥作用，体细胞克隆小鼠的出生率就会降低，而如果使这个基因不发挥作用，则可大幅提高克隆小鼠出生率。 体细胞克隆即从个体的皮肤等体细胞中取出细胞核，植入去除了细胞核的卵细胞，然后将生成的胚胎移植到代孕母亲的子宫内，最终诞生与提供体细胞的动物拥有同样遗传信息的克隆动物。虽然人类1996年就培育出了第一只体细胞克隆的哺乳动物绵羊多利，但此后克隆动物的出生率一直非常低。 日本理化研究所生物资源中心研究员小仓淳郎率领的研究小组，在分析利用克隆技术培育出的小鼠胚胎的基因时，发现在性染色体之一的Ｘ染色体上，基因“Xist”异常发挥作用。“Xist”基因能够抑制其他基因的功能。 研究人员使小鼠的“Xist”基因不再发挥作用，然后再用它们的体细胞培育克隆胚胎，结果克隆小鼠的出生率大幅提高，相当于以前水平的八九倍。 研究人......阅读全文
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。
小鼠精原干细胞移植
实验概要小鼠精原干细胞移植主要试剂75%乙醇、台盼蓝、白消安、水合氯醛主要设备外科手术刀、外科手术剪、玻璃针（内径约40μm）、显微镊、实体解剖镜、相差显微镜、显微操作仪实验步骤（1）白消安处理受体鼠取6～8周龄的小鼠，按照40～60 mg/kg腹腔注射白消安，小鼠在注射白消安4～6周后，可以用来移
小鼠肝细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基
小鼠破骨细胞分化方案
破骨细胞是高度分化的多核巨细胞，主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系，是一种具有骨吸收功能，在骨代谢方面起着关键性作用的细胞，因而机体对于破骨细胞的调控非常严格，在破骨细胞分化成熟的过程中，RANK /RANKL/OPG系统起着分化调控枢纽的作用，是调节破骨细胞分化成熟的关键信号途径。核因子κB
小鼠腹腔巨噬细胞培养
实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板，37 ℃，5% CO2 培养箱中孵育后，荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一
小鼠肝细胞原代培养
实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验
小鼠白细胞分化抗原
大多数白细胞分化抗原在生物进化过程中具有保守性，这是不同种的动物执行相同或相似生物学功能的需要。小鼠是免疫学常用的实验动物，而且对某些人白细胞分化抗原的结构和功能的了解首先是从小鼠或小鼠源性的细胞实验模型得知的，表1-3列举了部分与人CD抗原类同的小鼠造血细胞表面抗原，以供参考。表1-3 与人CD抗
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 通过光镜观察细胞形态、电镜观察超微结构及检测培养上清白蛋白水平证实培养细胞为肝细胞，持续培养结果显示原代培养第6～12 d 左右为肝细胞功能最佳观察和实验阶段。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6 孔
如何测小鼠白细胞总数
动物细胞培养的原理是细胞增殖，即有丝分裂．在有丝分裂过程中DNA含量变化（以2N为例）：（1）间期DNA复制，数目加倍（2N→4N）；（2）前期、中期和后期，DNA含量不变（4N）；（3）末期细胞分裂，DNA平均分配给两个子细胞，数目还原（2N）．本题考查动物细胞和有丝分裂过程中DNA含量变化规律，
单克隆抗体细胞选择脾细胞
1．材料(1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。单克隆抗体制备流程(2)1640培养液(3)2.5%FCS－1640营养液2．操作方法(1)拉颈或用CO2处死小白鼠。(2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒，取出固定于板上，在无菌条件下取脾。(3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中，冰
单克隆抗体细胞选择饲养细胞
在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞称之为饲养细胞（Feedercell）。在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞，如
科学家首用成人皮肤细胞克隆干细胞－引克隆人讨论
国际权威刊物《细胞》杂志的子刊《细胞—干细胞》网络版近日发表了一项有争议的研究成果：一个国际研究小组在实验室中首次利用成人皮肤细胞克隆出干细胞，朝着培养患者特异性细胞系用以治疗从心脏病到失明的各类疾病迈进了一步，但这项进展也可能重启有关克隆人的伦理讨论。 据报道，由先进细胞技术公司的罗伯特
免疫球蛋白纯化技术——纯化小鼠腹水中单克隆抗体
实验方法原理根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含McAbγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。实验材料PBS试剂、试剂盒缓冲液仪器、耗材层析柱高效液相色谱仪实验步骤1. 腹水10000 g离心10 min，除去细胞和杂质，在4 ℃条件下逐滴加入饱和硫酸铵溶液，使
关于细胞克隆的取材过程介绍
在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成
体细胞克隆变异的定义
中文名称体细胞克隆变异英文名称somaclonal variation定 义一个体细胞克隆中个体之间的差异现象。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
单克隆抗体的杂交细胞
克隆化的细胞可以在体外进行大量培养，收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限，其不能超过特定的细胞浓度，且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小
体细胞克隆变异的定义
中文名称体细胞克隆变异英文名称somaclonal variation定 义一个体细胞克隆中个体之间的差异现象。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
关于细胞克隆的所需环境介绍
1．无菌环境 无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂
贴壁细胞的克隆形成实验
实验方法原理用不同浓度的实验试剂将细胞处理24h 。经胰蛋白酶消化后，以低细胞密度接种，温育1～3 周，染色后（见彩图6a,e) 计集落数（图22.1)。实验步骤材料无菌生长液D-PBSA0.25%粗制胰蛋白酶待测化合物配制成最大使用浓度的10倍，溶于无血清生长液中；检査试验溶液的pH 和渗透压，若
人－T－细胞的克隆和扩增
实验步骤基 本 方案 精编免疫学实验指南, 第章材 料用可溶性抗原诱导特异性自体 T 细胞克隆时：外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)，来自抗原致敏的个体，作为反应细胞待 测 抗 原（抗原或抗原肽）照射灭活的自体或 H L A 匹配的同种异体 P B M C ，用作抗原
杂交瘤细胞的克隆化
融合后的细胞在孔里生长时，一般并不是一个单纯的克隆（一般是两个或者多个克隆，就算肉眼看到的是形成一个完整的克隆，但事实上可能是由两个或者多个原始的杂交瘤形成的），如果直接将其扩大培养将会产生两个问题：一是如果有两个或两个以上的克隆或一个克隆实际上是由两个克隆长在一起形成的，并且都分泌抗体，那么就有可
国家重点实验室揭ZGAregulator在体细胞重编程中作用机制
内蒙古省部共建国家重点实验室取得新成果：揭示ZGA-regulator在体细胞重编程中作用机制 近日，省部共建草原家畜生殖调控与繁育国家重点实验室的“瞬时Dux表达促进核转移和诱导多能干细胞重编程”（Transient Dux expression facilitates nuclear tr
单细胞分离系统 OR 传统单细胞克隆方法对比
随着监管机构对细胞株开发的要求愈加严格，研究人员被要求开展单细胞克隆并提供细胞株源于单个细胞的证据（ 即单克隆性的证据 ）。 有限稀释是一个普遍接受的建立单克隆性的方法，它基于统计概率因此只有很少一部分（ 10-30% ）的微孔能被接种单个细胞。流式细胞分选是另一种传统的克隆方法，它可以高效地接种单
关于细胞克隆的动物细胞培养介绍
在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 ⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 ⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
CloneSelect 单细胞分离系统 OR 传统单细胞克隆方法
CloneSelect™ Single-Cell Printer™ f.sight™ （ f.sight ）被开发用于满足这些需求， 它可以柔和地接种单个细胞至微孔，同时记录整个细胞接种过程，提供单克隆性的图像证据以及优异的接种后细胞生长用于细胞株开发在这个研究中，我们开展了六组实验，用无血清培养基
日本成功地利用一滴血克隆出小白鼠
日本理化学研究所生物资源中心遗传工学基础技术所的小仓敦郎所长领导的研究小组开发出了从血液中高效提取白血球细胞，并利用提取后的白血球细胞进行核移植，成功地克隆出了小白鼠。与目前从脏器中提取移植细胞的方法相比，该方法能更高效地克隆出小白鼠，并且不会对克隆母体产生损伤。相关研究成果发表于美国科学期刊《
小鼠多能ES细胞的增殖实验
试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生
小鼠单个核细胞的分离实验
基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19 G 针
小鼠多能ES细胞的增殖实验
试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生
小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验
目的要求1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式，在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成，当病原微生物或其他异物侵入机体时，巨