发布时间:2019-03-28 11:57 原文链接: DNA污染的柱上去除实验

该方案可用于使用硅基 RNA 结合柱的 RNA 分离策略,例如方案 6。然而,可能不会 实现 100% 除去 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

试剂、试剂盒

DNA 酶 I 缓冲液DNA 酶 I

仪器、耗材

细胞裂解液

实验步骤

一、材料

1. 酶和酶缓冲液

DNA 酶 I,扩增级(无 RNA 酶)

DNA 酶 I 缓冲液,10X

2. 细胞和组织

利用总 RNA 纯化试剂盒(例如 Madigen 总 RNA 快速纯化系统)获得的细胞裂解液。

二、方法

1. 将裂解液上到总 RNA 纯化试剂盒(例如 Marligen 总 RNA 快速纯化系统)所带的离心套柱上。

2. 将裂解液上到 RNA 纯化膜上之后,将 50ul 含 5UDNA 酶 I、在 1XDNA 酶 I 缓冲液中的 DNA 酶 I 溶液加到每个离心套柱中。

3. 室温下温育 15 min。

4. 于方案 6 中二、方法中步骤 6 继续进行 Marligen 纯化方案。方案后面的洗涤步骤将移弃 DNA 酶 I。


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