GPC高效净化食品中的油脂

图1.  标准样品色谱图。

食品中塑化剂的检测过程中，由于很多食品中含有大量油脂，干扰了塑化剂的测定，还会对检测仪器造成损害。本文使用GPC Cleanup系列凝胶净化系统进行样品处理，可有效去除样品中的大分子基质、小分子干扰物质，从而提高后续分析的灵敏度与准确性，延长分析仪器的使用寿命。

近期中国台湾爆出多种食品含有有毒塑化剂的案件，台检测机构在饮料、食品中检测出塑化剂（邻苯二甲酸酯类）。由于很多食品中含有大量油脂，在检测中严重干扰塑化剂的测定，而且对检测仪器造成损害。而样品的前处理过程对目标化合物最终的分析结果起到非常重要的作用，依据《GB-T 21911-2008 食品中邻苯二甲酸酯的测定》，前处理中使用GPC净化可以解决上述问题。本文采用GPC Cleanup 系列凝胶净化系统进行样品的净化处理，可有效去除样品中的大分子基质、小分子干扰物质，收集目标馏分，从而提高后续分析的灵敏度与准确性，延长分析仪器的使用寿命。

图2.  样品与标准品色谱图叠加。

仪器开发与应用

LabTech 公司应市场需求推出GPC Cleanup 800 凝胶净化解决方案。使用该系统只需将萃取好的样品加入到全自动液体处理器的瓶中，便可以自动完成样品GPC凝胶净化过程，最终目标物被收集到收集瓶中，直接浓缩后进行后续分析。该套系统的使用可以极大简化样品前处理的繁琐步骤，减少人为因素对实验结果的影响，有利于保证样品的平行性和准确性，同时整套系统完全密闭，具有溶剂回收功能，是一套绿色环保型样品前处理系统。

试剂与仪器

凝胶净化系统（GPC800，北京莱伯泰科仪器有限公司）；气质联用仪；乙酸乙酯、环己烷、正己烷（农残级）；邻苯二甲酸酯类标准品。

图3.  净化前的样品。

实验操作

1、 配制100ppm邻苯二甲酸甲酯和邻苯二甲酸癸酯混标溶液取样品0.5g于5ml容量瓶，用乙酸乙酯:环己烷 1:1（V/V）定容至刻度，涡旋混匀，转入 GPC 进样瓶。

2、编辑方法和批表，将标液进到 GPC 仪器中，观察出峰时间。

3、根据标样出峰谱图确定样品方法中的收集时间，编辑批表批次运行。

4、将净化后的馏分浓缩至近干用正己烷定容至2ml。

5、将处理好的样品进到GC-MS检测。

图4.  净化后的样品。

结果与讨论

GPC方法的确定

样品中需测量目标分析物为邻苯二甲酸酯类物质，选择分子量最大和最小的邻苯二甲酸癸酯和邻苯二甲酸甲酯两种标准物质，根据GPC分离原理分子量相对较大的先出峰，分子量相对较小的后出峰，故 17 种目标分析物出峰时间都在两峰之间，根据谱图确定馏分收集时间为 8~18.5min（如图2）。分析样品为辣椒精油（编号为 466）和辣椒酱（编号为 065）。

净化效果

图2粉色曲线为辣椒精油的色谱图，蓝色曲线为标准物质色谱图，白色曲线为辣椒酱色谱图。图中对比粉色和蓝色曲线可看出大分子油脂类大部分在３~８min出峰，而目标物在 8min 以后出峰，故 GPC 能除去大部分油脂类物质。从图中对比白色和蓝色曲线可看出辣椒酱中一些色素类与大分子的邻苯二甲酸酯类物质分子量接近，可与 14min 以后的小分子邻苯二甲酸酯类物质良好分离。从净化前后样品与收集液实物图可明显看出，GPC 净化效果比较满意。

图5.  样品的GC-MS谱图及数据。

实验数据

由于塑化制品随处可见，稍有不慎就会引入邻苯二甲酸酯类物质，包括溶剂中自带的邻苯二甲酸酯类物质。所以针对不同批次的试剂做了一些本底实验，结果发现即使是农残级的试剂也会含有一定量的邻苯二甲酸酯类物质，如 DBP、DIBP、DEHP含量稍高在 20~40ppb左右。且不同批次最大浓度目标物各不相同。

结语

GPC 凝胶净化依靠分子尺寸排阻大分子油脂类物质的效果很理想。非常适合净化油类样品中的大分子油脂类物质。莱伯泰科自动凝胶净化装置包括了自动上样、净化和自动收集功能，能够实现无人值守并且明显节省样品处理时间。