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PCR简介及污染的处理

PCR技术简介 前言 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的一例。 何谓PCR 简单的说,PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内 (In Vitro) 的大量合成。基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制.目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。 PCR的要素基本的PCR须具备1.要被复制的DNA模板 (Template) 2.界定复制范围两端的引物(Primers). 3.DNA聚合酶 (Taq. Polymearse) 4.合成的原料及水。PCR的反应包括......阅读全文

PCR实验室整体解决方案

PCR实验室简介Pcr实验室又叫基因扩增实验室、DNA实验室,基因检测实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者

告别繁琐紧张的移液工作

告别繁琐紧张的移液工作-eppendorf高通量PCR自动移液工作站简介  PCR反应样品的准备和加样过程在整个PCR反应中是非常重要的操作。手工加样操作很难保证每孔加样的准确性和精确性。只有自动化的加样工作站才能确保微量加样的可靠性。  20年前,Kary Mullis 发明了聚合酶链反应(PCR

数字PCR市场年增长近12% 国内企业数已反超进口

数字PCR作为第三代PCR技术,它是将分子生物学与现代微机电、微纳制造等工程技术相结合的典范。数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础,结合现代微机电和光学检测技术,实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR的核心思想是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元,然后对众

荧光实时定量PCR引物设计

靶的选择和试验设计1.针对目的基因序列选择合适的扩增片断查看以下三个网站是否有合适的已经证实的QRT-PCR的扩增引物,探针以及反应条件.RTPrimerDB (http://medgen.ugent.be/rtprimerdb), 相对物种较多PrimerBank (http://pga.mgh.

荧光实时定量PCR引物设计

  靶的选择和试验设计   1.针对目的基因序列选择合适的扩增片断   查看以下三个网站是否有合适的已经证实的QRT-PCR的扩增引物,探针以及反应条件.   RTPrimerDB (http://medgen.ugent.be/rtprimerdb), 相对物种较多   PrimerBa

荧光实时定量PCR引物设计

   靶的选择和试验设计   1.针对目的基因序列选择合适的扩增片断   查看以下三个网站是否有合适的已经证实的QRT-PCR的扩增引物,探针以及反应条件.   RTPrimerDB (http://medgen.ugent.be/rtprimerdb), 相对物种较多   PrimerB

干货丨新冠病毒Nanopore测序标准操作流程

2019新型冠状病毒Nanopore测序标准操作流程-PCR扩增测序版简介  新近在武汉出现的新型冠状病毒引发的肺炎疫情引起了社会各界的极大关注。对新型冠状病毒进行测序不仅能够为病原鉴定、病毒溯源与变异、传播力和传播机理等研究提供切实可靠的基因组信息,还能够为识别病毒传播方式和确定暴发范围提供重要的

MAGNA 96核酸提取操作流程

  简介  目的:本文用于实时逆转录-聚合酶链反应(real-time RTPCR, rRT-PCR)试剂盒体外定性检测呼吸道和血清标本中2019新型冠状病毒(2019-nCoV)。针对2019新型冠状病毒设计引物和探针组合,用于SARS样冠状病毒的通用检测和2019新型冠状病毒的特异检测。  方案

美国CDC:rRT-PCR检测2019新型冠状病毒操作说明

简介  目的:本文用于实时逆转录-聚合酶链反应(real-time RTPCR, rRT-PCR)试剂盒体外定性检测呼吸道和血清标本中2019新型冠状病毒(2019-nCoV)。针对2019新型冠状病毒设计引物和探针组合,用于SARS样冠状病毒的通用检测和2019新型冠状病毒的特异检测。  方案应用

pcr实用技巧-2

1.简介寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用设计粗糙

整理的PCR资料.供大家分享.2

引物设计简介1.寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用

实时定量PCR技术简介

 技术方法简介      所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行,PC

血液DNA提取试剂盒-血液DNAout

  产品索引   5859   中文名称:   血液DNA提取试剂盒   英文名称:   血液DNAout   产品编号:   3671   产品类别:   分子生物学   生产厂家:   国产   产品价格:   90元   产品规格:   10 次(简装)   产

寡聚核苷酸引物的选择

1.简介    寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设

蜀科生物安全离心机为新冠检测筑起安全屏障

   3月3日,国家卫健发布了新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第七版),明确了在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在新冠病毒经气溶胶传播的可能。   什么是气溶胶传播?    气溶胶是指悬浮在气体(如空气)中的所有固体和液体颗粒(直径0.001~100微米)。医疗操作时产生

食品微生物检验新技术

  摘要:食品安全是全球面临的难题和巨大挑战,不仅影响着人们的健康与生活,还关系着社会的稳定。本文初步介绍了几种食品检测中微生物检验的新技术,希望为从事食品检验工作的人员提供帮助。   《中华人民共和国食品安全法》中定义食品安全是指食品无毒、无害,符合应当有的营养要求,对人体健康不造成任何

流式细胞仪实验方法(二)

第二部分 细胞因子 细胞内细胞因子的流式细胞仪检测 一、简介随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

流式细胞仪实验方法-1

流式细胞仪实验方法 一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.C

什么是PCR阴性?

举乙肝的例子来说:通过酶免的方法查乙肝两对半和通过荧光定量PCR的方法学查乙肝DNA小明得了肝炎,但他不知道自己得了肝炎,有一天身体不舒服或者正常体检(比如入职体检),他去看医生,临床医生怀疑他得了肝炎(肝炎有很多种比如病毒性肝炎,也就是病毒倾入他体内后由于人体的三道防线没能把病毒消灭掉,导致病毒在

知识分享:维真腺病毒系统产品手册

  产品说明书   本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。   本产品仅供购买方内部研究使用,未经Vigenebio公司书面许可,严禁转售。   产品有限责任担保   Vigenebio保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了Vigenebio更换产品的责任。Vigenebio不提

第二届食品安全科技峰会分会报告

  2015年5月21日-22日,第二届中国(上海)食品安全科技峰会在上海虹桥宾馆举办,本次大会由上海市食品学会、上海市食品安全协会联合会主办,上海海洋大学、上海浩韵文化传播有限公司承办,旨在针对食品安全移动快速检测、法规与标准、质量控制和可追溯体系建设等相关议题进行分享与交流,同时也就在

病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒使用说明

病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒一、简介病毒总核酸提取试剂盒适合于从血清、血浆、组织匀浆等样品中提取病毒总核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀。该产品已经成功地提取了乙肝A/C、丙肝、以及诺如病毒标准品等的核酸。获得的DNA/RNA可直接用于

RT-PCR实验方法

RT-PCR定义:是指对组织或细胞的总RNA进行抽提,把RNA反转录为cDNA,然后设计目的基因引物进行PCR,琼脂糖电泳并数码拍照,分析电泳条带灰度值,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。 RT-PCR流程简介 一、抽提RNA: 1、防止RNA酶污染 180℃的高温下

BioTNT mRNA 引物筛选,引物定制或specific primers的使用说明1

BioTNT mRNA 引物筛选,引物定制或specific primers的使用说明版本号:20100001BioTNT qPCR Primer Assay for specific mRNA genes目录号:SER-PCR –编号(500T);说明书 Part A 一、产品

爱沙尼亚基因组中心生物样本库的自动化解决方案

概述爱沙尼亚生物样本库是收集能够代表整个爱沙尼亚人口的以民族委基础的生物样本库。因为整体工作量、反应时间、样本的完整性和过程的安全性等因素,为研究伙伴人工发放样本变得越来越困难,因此爱沙尼亚生物样本库采用了由一套自动化存储系统,一台自动化液体处理系统和多个小设备(如离心机和开盖机)组成的Hamilt

食品中肉毒杆菌的检验方法浅析

肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的致病菌,全称肉毒梭状杆菌,在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力。它在繁殖过程中所分泌的毒素具有极强的毒性,是氰化钾毒性的一万倍,是毒性最强的毒素之一。纯化结晶的肉毒杆菌毒素 1 mg 能杀死 2 亿只小鼠,对人的半致死量为 40 IU/kg。 肉毒杆菌

固体废物处理与环境安全教育部重点实验室开放课题申请

  清华大学固体废物处理与环境安全教育部重点实验室日前公布了2010年度开放课题研究基金申请指南。内容如下:一、实验室简介  固体废物处理与环境安全教育部重点实验室是国家教育部于2009年1月批准立项,依托清华大学建设的教育部重点实验室。  本实验室拥有国内固体废物处理处置、有毒

食品中肉毒杆菌检测

肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的致病菌,全称肉毒梭状杆菌,在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力。它在繁殖过程中所分泌的毒素具有极强的毒性,是氰化钾毒性的一万倍,是毒性最强的毒素之一。纯化结晶的肉毒杆菌毒素 1 mg 能杀死 2 亿只小鼠,对人

新冠病毒又出新的检测技术?病毒检测专家为你解答!

  检测,对于疾病防控就具有重大意义。美国的新冠检测,从开始每日检测数十人到如今每日检测近100万人!  随着检测量不断增长,检测的技术也在快速进步,截止2020年8月6日,已经有168个分子检测手段被美国FDA批准可以在紧急状态下(emergency use authorization,简称EUA