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肺泡上皮细胞的分离方法步骤

1、取得完全无血液残留的肺脏:实验前将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏。2、消化肺组织:常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定,有效作用时间短暂,容易自我降解等问题。Dobbs L G等认为弹性蛋白酶能更有选择性的消化分离上皮细胞[9]。胰蛋白酶消化没有选择性,会带来像内皮细胞和间质细胞等一些不能在后面的分离步骤中去除的杂质细胞,因此弹性蛋白酶更有助于提高上皮细胞的纯度和产量。与此相反,Cunningham A C等发现,与弹性蛋白酶相比,用胰蛋白酶可以获得更大产量的Ⅱ型上皮细胞[10]。胶原酶可以用来辅助消化细胞间质。用几种酶混合的方法比单一酶消化效果更好,但目前还没有文献定量描述最优化的酶消化方法。Finkelstein J N等发现可以通过支气管把酶灌注到完整的肺中消化......阅读全文

肺泡上皮细胞的分离步骤

一、取得完全无血液残留的肺脏:实验前j将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏二、消化肺组织:常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定,有效作用时间短暂,容易自我降解等问题。D

原代肺泡上皮细胞的体外分离培养

1、完全无血液残留肺脏组织:2、消化肺组织:常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞:原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同

日本从人类iPS细胞中分离肺泡上皮细胞

  据2014年8月22日《日刊工业新闻》报道,日本京都大学大学院医学研究科三岛理晃教授的研究小组与京都大学iPS细胞研究所的长船健二副教授、京都大学的小川诚司教授等共同从人类iPS细胞(人工多能性干细胞)中成功分离出肺泡上皮细胞。这一研究成果对于肺的再生研究、呼吸器官疑难病症的治疗以及相关新药研发

强!中国学者用最短时间突破100篇CNS生命科学领域成果

  截止2020月7月27日,中国学者在Cell,Nature 及Science 发表了共计102项生命科学的研究成果,其中新冠肺炎领域占了近一半(共43篇)。iNature系统总结了这些研究成果:   按杂志来划分:Cell 发表了30篇,Nature 发表了45篇,

Cell同期两篇论文:利用多种测序技术发现肺细胞的奥秘

  9月7日Cell杂志同期公布了波士顿儿童医院,宾州大学,宾州儿童医院的两个研究组针对间充质细胞的新研究成果。   我们人体的肺部为了保持健康,需要维持两个重要的细胞群:一种是肺泡上皮细胞,租出肺部气体交换必需的小气囊;另外一种是在平滑肌中的细支气管上皮细胞(也称为气道细胞)。“我们对此产生了疑

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

ACE2的主要功能以及在新型冠状病毒中作用

  2019年12月以来,武汉新型冠状病毒感染引起的肺炎传播迅速,疫情紧急,基础研究也一直在推进中。中科院巴斯德所郝沛等学者及武汉病毒研究所石正丽团队研究发现新型冠状病毒的受体蛋白为血管紧张素转化酶2(ACE2)。在这项研究基础上,上海同济大学医学院研究团队连日利用高通量单细胞测序分析技术,研究了共

ACE2的主要功能以及在新型冠状病毒中作用

2019年12月以来,武汉新型冠状病毒感染引起的肺炎传播迅速,疫情紧急,基础研究也一直在推进中。中科院巴斯德所郝沛等学者及武汉病毒研究所石正丽团队研究发现新型冠状病毒的受体蛋白为血管紧张素转化酶2(ACE2)。在这项研究基础上,上海同济大学医学院研究团队连日利用高通量单细胞测序分析技术,研究了共计四

常用抗体的应用范围及选用(二)

2.单克隆小鼠抗人上皮细胞膜抗原 (Monoclonal mose anti human epithelial memberance antigen,EMA)上皮细胞膜抗原是上皮细胞表面大分子糖蛋白物质,它不仅存在于各种上皮,以及各种上皮来源的肿瘤,也可存在于部分非上皮及其来源的肿瘤,如浆细胞,组织

培养细胞的细胞生物学(体内外细胞差异与体外培...1

一、体内、外细胞的差异和分化1、差异:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此,培养中的细胞可视为一种

九问新冠病毒:比SARS狡猾哪儿?抗生素为啥不管用?

  这个春节,一场始料未及的新冠肺炎疫情,打乱了人们对于鼠年的憧憬,不断滚动的疫情播报牵动着每个人的心。  在这场战“疫”中,中华预防医学会感染性疾病防控分会常务委员兼秘书长、中山大学附属三院感染科副主任林炳亮除了参与医务工作,还不断通过互联网做科普。他向中青报·中青网记者透露,这些天面对的线上咨询

冠状病毒17问:2019-ncov疫苗有多重要?

什么是冠状病毒?  冠状病毒(Coronavirus)是一种有包膜(或囊膜)的正链线性RNA病毒,也是一种最大的RNA病毒。冠状病毒属于网巢病毒目。我们通常说的冠状病毒是冠状病毒科的两个亚科之一。该亚科包括甲、乙、丙、丁(α,β,γ和δ )四个属。  冠状病毒的包膜是由双层脂质和跨膜蛋白组成。病毒的

八大常见癌症肿瘤标志物的检查

一、肺癌的肿瘤标志物检查原发性支气管肺癌(简称肺癌),系指原发于支气管粘膜和肺泡的癌肿,是常见的恶性肿癌之一。本病的发生主要是受化学致癌物质影响,吸烟是主要原因之一。此外,工业废气和大气污染,产生大量多环芳香烃等有害气体亦可诱发肺癌。绝大多数肺癌好发于35/75岁之间。男性多于女性。肺癌的肿瘤标志物

养细胞的细胞生物学

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2012国家自然科学基金评审结果名单之复旦大学(生物类)

  来自国家自然科学基金委员会的消息,国家自然科学基金委员会公布了2012年度面上项目、重点项目、重大国际(地区)合作研究项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、海外及港澳学者合作研究基金项目、科学仪器基础研究专款项目等方面的评审结果。有关评审结果将通知相关依托单位,其科研管理人员可登录

一文了解外泌体在肺癌中的研究进展

  肺癌是全世界发病率和病死率最高的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌类型的85%以上,死亡率高达80%~90%。由于缺乏有效的早期诊断筛查方法,70%肺癌患者确诊时已是晚期,5年生存率仅为16%~18%。因此,寻找新的生物标志物和靶向治疗的新靶点对肺癌的早期诊断和临床治疗至关重要。

哮喘致敏小鼠模型的建立及脾脏CD4+T细胞的分离(二)

1.4.2  肺组织标本留取   打开未经支气管肺泡灌洗的各组各 6 只小鼠胸腔 ,观察肺脏的大体改变 ,剪取部分肺组织 ,经10 %甲醛固定后切片 ,行 HE染色。1.5  CD4+T细胞

全景组织细胞定量分析系统技术在新冠肺炎相关研究 2

根据肺部肿瘤、炎性细胞等组织的颜色及形态学特性,对无特殊染色标记的组织病灶及结构进行识别,并用不同颜色标记以便进行后续的定量分析。TissueFAXS Cytometry技术支持超大组织样本切片全景扫描和定量分析,协助科研工作者们突破从分子水平、细胞水平、组织水平直至器官水平的数据瓶颈,分析

多篇文章解读组织/细胞再生领域研究进展

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2020非典又来了吗?新型冠状病毒有什么临床表现?

  非典,学名SARS,当初主要是在广东顺德第一次出现。随着其强烈的传播性,迅速传播到整个中国乃至全球。直到03年中期,疫情才被渐渐控制。  但在非典发生期间,引起了巨大的社会恐慌和众多医护人员的伤亡,是一起非常重大的医疗卫生事件。2003年,突如其来的非典打乱了人们原有的生活节奏,不论是上学还是上

2019年中国学者发表CNS统计,谁是CNS发表之王?

  【51/52】2019年4月4日,清华大学柴继杰课题组、中科院遗传发育所周俭民课题组和清华大学王宏伟课题联合同期背靠背发表两篇重量级Science文章,完成了植物NLR蛋白复合物的组装、结构和功能分析,揭示了NLR作用的关键分子机制,是植物免疫研究的里程碑事件。两篇文章分别是: "Li

腺病毒载体综述

腺病毒的一般特性    腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。

2015国家自然科学基金:表观遗传学什么是重点

  来自国家自然科学基金委员会的消息,8月18日国家自然科学基金委员会公布了2015年国家自然科学基金申请项目评审结果,其中面上项目16709项、重点项目624项、创新研究群体项目38项、优秀青年科学基金项目400项、青年科学基金项目16155项、地区科学基金项目2829项、海外及港澳学者合作研究基

人类疾病的动物模型-2

三、呼吸系统疾病动物模型的复制    急性呼吸窘迫综合征(RDS)    关于该模型复制方法,除国内外多数采用的油酸法外,尚有静脉注射致死量大肠杆菌内毒素、出血性休克、高浓度氧吸入等等。但目前认为用油酸法制备RDS 模型比较理想,因为这种模

深部真菌感染主要病原真菌的致病机理研究进展

上海第二军医大学长征医院 廖万清 李秀丽现在机会性深部真菌感染的发病率急剧上升,你知道主要有哪些因素吗?自80年代以来,深部真菌感染的发病率在逐年上升,尤其是免疫抑制等高危患者的增加,以及耐药真菌和新出现真菌的日益普遍,显著改变了深部真菌感染的流行情况,如曲霉菌及其他霉菌的感染不断增加,非白念珠菌成

微流控技术已经涉及这么多领域了?码一下进展

微流控芯片技术是生物芯片的基石,它通过多学科交叉将化学、生物学、医学等领域所涉及的样品预处理、生化反应、分选及检测等过程集成到几平方厘米的芯片上,从而实现从样品前处理到后续分析的微型化、自动化、集成化和便携化的技术。早在2003年,微流控技术就被福布斯(Forbes)杂志评为影响人类未来15件最重要

7月25日 Nature 杂志生物学精选

  未培养微生物的基因组   现有基因组序列只能让我们对微生物引人注目的多样性有一个很有限的认识,因为它们中绝大部分从未被培养出纯培养物。在这项研究中,Tanja Woyke 及其同事利用单细胞基因组学方法来研究和测序来自九个多样化生境的 201 种未培养的古生菌和细菌细胞。该信息显示了无

原子力显微镜在生命科学与材料研究中的重要价值

  原子力显微镜以其操作方便,对样品处理要求不高,原子级分率低,样本可在空气中成者液体中直接观察,可检测的样品范围广等优点,赢得了越越广阔的应用,利用AFM可以观察生物制品的形态结构、检测生物力、观察品体的三结构及插体的生长等,这势必会进一步推动生命科学,材料科学的一步发展。   一、生命科学中的

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NLRP3 在博来霉素致大鼠肺纤维化中的作用

NLRP3 在博来霉素致大鼠肺纤维化中的作用孙云晖,王一新,马雪梅,章 婷,赵艳景( 佳木斯大学 临床医学院,黑龙江 佳木斯 154003)摘要: 目的: 探讨 NLRP3 在博来霉素致大鼠肺纤维化中的作用及意义。方法: 将 60 只清洁级大鼠随机分为对照组( N 组) 、博来霉素组( B 组)