Antpedia LOGO WIKI资讯

方案7位点特异性蛋白质DNA光交联法实验

实验材料DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切酶A 和 B单链 DNA 结合蛋白单链 DNA 模板T4 DNA 连接酶T4 DNA 聚合酶T4 多聚核苷酸激酶T7 DNA 聚合酶上游引物试剂、试剂盒10 X 退火缓冲液ATP对叠氮化苯甲酰甲溴生物素-11-dATP生物素-11-dCTP生物素-16-dUTPC18HPLC 溶剂氯仿调控毛细孔玻璃板(CPG)-寡核苷酸合成的支持物dAdCdGTβ-氰乙酸亚磷酸铵dNTPs变性上样缓冲液DNA 聚合反应混合物EDTA洗脱液乙醇仪器、耗材放射自显影标准物放射自显影增感屏烧杯台式离心机CHROMA SPIN+TE-10 和 SPIN+TE-100 旋转柱DNA RNA合成仪固定角度的小离心管灭菌灯(254nm)HPLC 系统增感屏小离心管寡聚核苷酸纯化试剂盒(OPC)磷屏仪多聚丙烯圆底管解剖刀Spin-X离心滤器紫外分光光度计真空干燥器水浴或加热器实验步骤一、位点特异性生物素标......阅读全文

方案7 位点特异性蛋白质-DNA 光交联法实验

实验材料DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切酶A 和 B单链 DNA 结合蛋白单链 DNA 模板T4 DNA 连接酶T4 DNA 聚合酶T4 多聚核苷酸激酶T7 DNA 聚合酶上游引物试剂、试剂盒10 X 退火缓冲液ATP对叠氮化苯甲酰甲溴生物素-11-dATP生物素-11-dCTP生物

DNA 酶 I 足迹法对 DNA 上的蛋白质结合位点作图实验

DNA 酶 I 足迹法对 DNA 上的蛋白质结合位点作图实验             实验材料 新鲜组织、培养的细胞、来自细胞或组织的蛋白成分

DNA 酶 I 足迹法对 DNA 上的蛋白质结合位点作图实验

实验材料 新鲜组织、培养的细胞、来自细胞或组织的蛋白成分试剂、试剂盒 细胞匀浆缓冲液细胞重悬缓冲液细胞淋洗缓冲液乙醇Ficoll 400甲酰胺染色液MgCl2 CaCl2 溶液NaClNonidetP-40酚:氯仿磷酸盐缓冲液聚乙烯醇终止液组织匀浆液组织重悬缓冲液台盼蓝染料DNA 酶 I

DNA 酶 I 足迹法对 DNA 上的蛋白质结合位点作图实验

本方案介绍在放射性标记的 DNA 片段上确定蛋白质结合位点的作图方法。本方案使用 DNA 酶 I 切割 DNA, 而在替代方案中是用羟自由基断裂 DNA。如果希望得到优化足迹法反应的建议,请参见本方案最后部分的疑难解析以及优化 DNA 酶 I 足迹法反应的栏目。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)

蛋白质复合体性质的研究

方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀 方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化 方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验 方案4 BN-PAGE 蛋白质分析法 方案5 采用交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程             实验材料 pMQ402 试剂、试剂盒

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验

实验材料pMQ402试剂、试剂盒阿拉伯糖苯甲基磺酰氟Ni-NTA 琼脂糖结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液透析缓冲液仪器、耗材超声破碎器冷冻离心机实验步骤3. 方法此处列出的方法概括了为定点突变而做的氨基酸位点选择(见 3.1)、为在细菌细胞中表达而做的 MutH 蛋白突变 ( 见 3.2 ) 和 Mu

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验

实验材料 pMQ402试剂、试剂盒 阿拉伯糖苯甲基磺酰氟Ni-NTA 琼脂糖结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 超声破碎器冷冻离心机实验步骤 3. 方法此处列出的方法概括了为定点突变而做的氨基酸位点选择(见 3.1)、为在细菌细胞中表达而做的 MutH 蛋白突变 ( 见 3.2 )

特异性位点的DNA甲基化的检测方法

相关专题1 甲基化敏感性限制性内切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法这种方法利用甲基化敏感性限制性内切酶 对甲基化区的不切割的特性,将DNA消化为不同大小的片段后再进行分析。常使用的甲基化敏感的

位点特异性重组的简介

  位点特异性重组(site-specific recombination)是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会,重组也只发生在同源的短序列的范围之内,需要位点特异性的蛋白质分子参与催化,重组的蛋白不是rec 系统而是int 等,如噬菌体l 的定点插入。重组时发生精确的切割、连接反应