Antpedia LOGO WIKI资讯

监控细胞状态,你有很多选择

如果你在真核系统上开展生物学研究,那么你有很大的机会要培养细胞。作为实验的原材料,细胞的状态很重要。不过,如今的实验室中有无数的细胞系,每一种都有其独特的生长特性,研究人员如何才能确定细胞培养物是健康的? 各大厂商已开发出一系列工具来监控细胞培养物。一些是专门的检测,来监控药物筛选等应用中的细胞变化。当然,更多的是用于日常的细胞培养。在此,我们就来看看你有哪些选择。 流式检测 细胞健康并没有一个定义。MilliporeSigma流式细胞应用的研发主管Kamala Tyagarajan认为,这个词涵盖了细胞的一切,包括细胞密度、倍增时间以及氧化应激和凋亡状态。不过,最直接的指标是细胞活力。 之前,细胞活力是利用血球计数器和台盼蓝来评估的。台盼蓝是一种无法透过细胞膜的染料,这意味着它会被健康细胞排斥,而只能进入细胞膜受损的细胞。研究人员将染料与细胞混合,并移液至血球计数器,在获得细胞计数的同时评估多少是活的。这个过程可以......阅读全文

肿瘤标志物“分列式”

癌细胞静悄悄、无休止、无秩序地增生、转移,大量消耗体内营养物质,导致身体免疫机制下降,直到出现身体症状或健康体查时才会注意到它。癌细胞发生、增殖和转移等过程中在患者身体内留下一些踪迹。捕捉到隐藏到这些悄无声息的癌症信号——肿瘤标志物,可以帮助医生癌症诊疗过程中做出更加精准的判断。返祖信号癌细胞被认为

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

《干细胞制剂制备质量管理自律规范》正式发布

  10月25日,中国医药生物技术协会发布了《干细胞制剂制备质量管理自律规范》的公告,公告显示,《规范》是参照《药品生产质量管理规范》(GMP)、《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则(试行)》和《干细胞临床研究管理办法(试行)》等规定,经业内骨干企业及专家的研讨,为规范我国干细胞制剂制备,加强质

癌症治疗史上最大的一次革命正在发生

  克莉丝汀•克雷恩霍费尔(Kristin Kleinhofer)的抗癌故事始于七年前。最初,她的头顶上悄悄长出一个针尖样小凸点,她以为那是一个囊肿,没有在意。但它不是。后来,克莉丝汀被确诊为急性淋巴母细胞性白血病。  走运的是,她在2014年11月参加了美国弗雷德•哈钦森癌症研究中心(Fred H

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

细胞色素c活力测定方法概况

  细胞色素c氧化晦 (Cytochrome e oxidase,COX)亦称细胞色素氧化酶,存在于真核生物细胞的线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量,是线粒体电子传递链末端氧化。COX单体为2-亚铁血红素,23)铜蛋白,相对分子质量为150~200kuKD)COX的每个单体由至少13条不同的

细胞培养注意事项

科研同学养细胞,都把细胞当成自己的娃,娃生活地怎么样,心情好不好,快不快乐,是每天都要关注的事情。因为担心一不留神,细胞娃就生存地不好,甚至于受到污染,细胞 over 了!如何让细胞快乐,我们一起往下看! 1. 确保所有实验室材料都无菌交叉污染是细胞培养的大敌。即使是最轻微的污染,也可能毁

细胞培养设备选型指南

细胞培养之热身运动做起来~ 细节决定成败!正式进行大规模细胞培养之前的准备工作是十分重要的。1)   培养环境检查和文件准备2)   XDR反应器状态,以及配套设施,如TCU,混合罐,灭菌锅状态的检查及准备3)   种子细胞、培养

细胞冻存技术介绍

细胞冻存技术实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置温度计;2、超低温冰

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

要想人不老 血管保护好

  人体从20岁开始,血液垃圾便开始在血管中沉淀,久而久之,血管变得又脆又硬。一些脱落的斑块形成血栓,像不定时炸弹一样飘荡在血管中,给健康埋下隐患。  北京医院心血管内科主任医师汪芳为大家送来血管的保养秘笈,教大家认清什么样的血管是好血管,如何养护好血管。  血管不好 从头伤到脚  如果把人体比作一

MTT实验的一些细节问题

一、细胞: 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。

MTT实验的一些细节问题

一、细胞: 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样

二氧化碳培养箱的选购与使用

  在过去的数十年间,细胞生物学、分子生物学、药理学等的研究领域都有了惊人的长足进步,同时,这些领域中的技术应用也不得不跟上“脚步”。虽然典型的生命科学实验室设备有了很大的改变,但二氧化碳培养箱依然是实验室中的主要组成部分,其使用的最终目的都是维持和促使细胞和组织更好地生长。然而,随着技术

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎

多位专家指导:如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白

  血液是唯一与所有器官都有接触的组织,携带着有关机体的大量宝贵信息。在理论上,检测血液携带的 DNA、RNA、囊泡和细胞残骸可以帮助人们诊断和监控各种疾病。  产前基因筛查是血液检测的一个重要应用,通过分析孕妇血液中的胎儿DNA来鉴定染色体异常(比如唐氏综合症)。此外,越来越多的研究者开始关注血液

国家药品监督管理局发布《除菌过滤技术及应用指南》

  为加强药品生产监管,进一步指导和规范药品生产企业科学系统地开展除菌过滤技术及应用、无菌工艺模拟试验,国家药品监督管理局组织制定了《除菌过滤技术及应用指南》,作为实施《药品生产质量管理规范(2010年修订)》的指导性文件,现予发布,自2018年10月1日起施行。  特此通告。  附件:除菌过滤技术

流式细胞仪实验方法-2

六、流式检测细胞染色基本过程(以全血为例)1、   收获细胞:肝素钠抗凝的静脉血,按1:1与培养基混匀,加刺激剂,同时加蛋白转运抑制剂(参照说明书), 混匀后,37℃,5%二氧化碳培养4-6小时2、   阻断Fc受体:用于消除非特异性的结合

皮下荷瘤实验的介绍及应用(二)

第二部分:裸鼠皮下荷瘤步骤一般更多的时候是选择人源肿瘤细胞系,然而由于存在免疫排斥,需选择裸鼠荷瘤。下面以裸鼠为例,为大家详细介绍皮下荷瘤的实验过程⑴ 肿瘤细胞的传代扩增取冻存于液氮的肿瘤细胞复苏并扩增,确保肿瘤细胞的活力和良好的生长状态⑵ 计算细胞接种量根据经验,一般鼠源肿瘤细

肿瘤细胞培养

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正

微生物菌种的扩大培养技术(二)

②温度控制 培养基灭菌后,冷却至培养温度进行种子培养,由于随着微生物的生长和繁殖会产生热量,搅拌也会产生热量,所以要维持温度恒定,需在夹套中或盘管中通冷却水循环。③通气、搅拌 空气进入种子罐前先经过空气过滤器除去杂菌,制成无菌空气,而后由罐底部进入,再通过搅拌将空气分散成微小气泡。为了延长气泡滞留时

如何治疗不孕不育?

  不孕不育是现代社会年轻夫妇经常会遇到的问题。引发不孕不育的原因有很多,其中既包括遗传性的因素,也包括环境因素。生活习惯的改变也会导致不孕不育的发生。为了解决这一问题,研究者们也进行了大量的工作。针对近期不孕不育相关领域的研究进展,进行简要盘点,希望读者朋友们能够喜欢。  1. Science:新

国家药监局:《除菌过滤技术及应用指南》等3个指南的通告

国家药品监督管理局2018年第85号通告附件3无菌工艺模拟试验指南(无菌制剂)1.目的为指导和规范无菌制剂生产企业开展无菌工艺模拟试验,充分评价无菌制剂产品生产过程的无菌保障水平,确保无菌制剂的安全性,依据《药品生产质量管理规范(2010年修订)》及附录,制定本指南。2.定义本指南所述的无菌工艺模拟

MTT实验的一些细节问题

一、细胞:1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,

试管婴儿的前世今生(上)

  在大多数发达国家,夫妇结婚年龄越来越晚,生育年龄更不断延后,这一趋势在中国各大城市也越来越明显。有研究指出由于种种因素,中国的不孕不育患者已超过5000万,并且这一数据还在不断增长。   目前也有不少辅助生育的医疗方式,包括激素治疗增加女性排卵期所释放的卵子等等,但当这些方式不适用或者失败时,

悬浮细胞培养经验

  6 细胞培养基的选择  6.1根据细胞特点、蛋白表达及病毒特点和培养方式选择细胞培养基  商售工业用细胞培养基主要是干粉培养基,常用的培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等系列,根据细胞的特性及工业化的生产需求,开发或生产的同一系列的细胞培养基在成份上也有

“实践十号”:中国打造的太空“超级实验室”

  实践十号卫星模拟图  中国科学院国家微重力实验室试验装置  微重力环境下盛开的花  人类未来能否能穿越星际,在宇宙中长期生存?人类能否到太空中去繁衍后代?宇宙飞船或者空间站着火了怎么办?如今困扰各大城市的雾霾如何治理?……对于这些问题,现在我们或许还没办法全面回答,不过中国科学家未来两周将在太空

生物反应器悬浮培养关键技术有哪些

 一、生物反应器在生物制药中的应用及现状  21世纪初,随着流加培养、灌流培养、基因工程等技术的发展,作为大规模培养主要设备的生物反应器规模也趋向大型化和自动化。当前生物制药的主流技术是在大型机械搅拌式反应器中,用无血清培养基和灌流工艺悬浮培养细胞进行生产。   生物反应器大规模培养在生物

蛋白质提取与制备

1蛋白质提取与制备蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的,大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中,少数与脂类结合

FDA和NIST对细胞治疗中的细胞计数

近年来,由于细胞治疗方法的兴起,人们日益需求能够高质量、稳健、有效进行细胞表征测定的方法。细胞计数,作为细胞疗法中最基础的检测项目,现今需要更高的检测可信度。2017年4月,美国国家标准与技术研究院(NIST)&食品与药物管理局(FDA)共同举办了一场专注于细胞计数的研讨会,聚焦于选择、设计