单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA，如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA，如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。实验材料大肠杆菌 F' 菌株M13 噬菌体原液试剂、试剂盒乙醇NaCl酚氯仿聚乙二醇乙酸钠STETETris-HCl仪器、耗材琼脂糖凝胶LB 或 YT 培养基Sorvall GSA 转头或相同的转头Sorvall SS-34 转头或相同的转头Corex 离心管硅橡皮圈无菌试管实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙......阅读全文
λ噬菌体的局限性λ噬菌体
实验方法原理 本实验以含原λ噬菌体和缺陷噬菌体λdg的双重溶原菌gal+作为供体,经紫外线诱导后,获取能转导半乳糖发酵基因的高频转导噬菌体裂解液,然后让这些转导噬菌体将gal+基因转移到受体菌gal-中去。实验材料 供体菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (带有原噬菌
Lambda噬菌体
· Lambda DNA Preparation (Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes· Isolati
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆
经过3～4轮的筛选后，应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言，在后几轮的筛选中，每次获得的噬菌体总量都会增加，但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是最灵敏的鉴定所获取
烈性噬菌体（virulent－phage）和温和噬菌体（temperate－phage）
噬菌体(bacteriaphage or phage)是病毒的一类，结构很简单，基本上由一个蛋白质外壳包裹着一些核酸组成的。噬菌体的多样性来自于组成其外壳的蛋白质的种类，以及其染色体的类型和结构的不同。（一）烈性噬菌体（ virulent phage）遗传学上应用最广泛的烈性噬菌体是大肠杆菌（ E.
噬菌体的概述
噬菌体(bacteriophage, phage)是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。作为病毒的一种，噬菌体具有病毒的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。可视为一种“捕食”
噬菌体的生长
Preparing Lawn Cells for M13 Cloning (Life Technologies)Lawn cells require the F' episome for M13 infection and may be prepared Streaking Lambda
什么是噬菌体
噬菌体是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。作为病毒的一种，噬菌体具有病毒的一些特性：个体微小、不具有完整细胞结构、只含有单一核酸。可视为一种“捕食”细菌的生物。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已
噬菌体的介绍
噬菌体(bacteriophage, phage)是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。作为病毒的一种，噬菌体具有病毒的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。可视为一种“捕食”
λ噬菌体DNA提取
λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径，其一是裂解生长，环状DNA分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次感染；其二是溶源性生长，即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体D
噬菌体如何培养
用大肠杆菌来培养。先制备培养大肠杆菌的培养基，培养大肠杆菌。然后用噬菌体再感染大肠杆菌。噬菌体就是细菌病毒，他是严格的活细胞寄生生物，所以要用活细胞来培养。
什么是噬菌体
噬菌体是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。作为病毒的一种，噬菌体具有病毒的一些特性：个体微小、不具有完整细胞结构、只含有单一核酸。可视为一种“捕食”细菌的生物。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已
噬菌体抗体ELISA
实验概要噬菌体ELISA是一种快速而便捷的方法，尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。主要试剂1. 2％MPBS2. PBS/Tween3. 辣根过氧化物酶(HRP)标记的小鼠抗噬菌体单克隆抗体(mAb)(Amer Sham BiOSCiences)4. 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺(TMB)
噬菌体是什么
在微生物界，存在类似动植物界一样的食物链关系。而能“捕食”细菌的生物，就是“噬菌体”。噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物细菌病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。噬菌体一旦离开了宿主细胞，既不能生长，也不能复制。噬菌体分布极广，凡是有细菌的场所，就可能有相应噬菌体的存在。在
噬菌体抗体ELISA
实验概要噬菌体ELISA是一种快速而便捷的方法，尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。主要试剂1. 2％MPBS2. PBS/Tween3. 辣根过氧化物酶(HRP)标记的小鼠抗噬菌体单克隆抗体(mAb)(Amer Sham BiOSCiences)4. 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺(TMB)
噬菌体检查
病原体是许多疾病的主要诱因，对人类健康构成了严重威胁。近年来，食品、水源和环境中致病微生物已造成世界上许多流行病的爆发。因此，为了控制病原体的传播并减少流行病的发生，检测致病微生物的技术的成熟可行性显得尤为重要。 培养物细菌分离和鉴定是实验室检测病原体的“金标准”方法。该检测方法虽然足够灵敏，
噬菌体培养法
一. 液体培养法1. 将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养，一般培养16~24小时2. 将噬菌体原液100 μl 与寄主细菌悬浮液300 μl均匀混合，静置15分钟使其感染。3. 将混合液接至含10 ml新鲜液体培养基的试管中，于适当温度下振荡培养约8~24小时，培养时间依噬菌体之不同而异。
噬菌体展示技术
1985年，Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ，使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面，从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内，即在噬菌体表面展示特定蛋白质，而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另
怎样培养噬菌体
将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养，一般培养16~24小时。2. 将噬菌体原液100 μl 与寄主细菌悬浮液300 μl均匀混合，静置15分钟使其感染。3. 将混合液接种至含10 ml新鲜液体培养基的试管中，于适当温度下振荡培养约8~24小时，培养时间依噬菌体之不同而异。4. 将培养液移入
噬菌体抗体ELISA
噬菌体抗体ELISA 噬菌体ELISA快速而便捷，尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。不过，后续的抗体检测总是要以其可溶性形式进行。 [器材和试剂] ● 96孔ELISA板，例如Nunc maxisorb442404(可自VWR购得) ● 2％M ● /Tw
噬菌体的特点
噬菌体（phage）是侵袭细菌的病毒，也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体必须在活菌内寄生，有严格的宿主特异性，其取决于噬菌体吸附器官和受体菌表面受体的分子结构和互补性。噬菌体是病毒中最为普遍和分布最广的群体。通常在一些充满细菌群落的地方，如：泥土、动物的肠道里，都可以找到噬菌体。噬菌体(ba
M13噬菌体与其他噬菌体相比的优点
噬菌体展示技术的应用中，M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点？M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体，它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤，只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开。而其他用于噬菌体展
概述λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制
λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制首先由A·坎贝尔所推测，以后经实验证明。 当用λ噬菌体转导发酵乳糖的基因时，大约10^6 被感染的细菌中出现一个转导子。这一事实说明大约10^6 噬菌体中只有一个带有发酵乳糖的基因，这是低频转导。当λ噬菌体整合到寄主细胞后，带有发酵乳糖基因的λ噬菌体也整合到
噬菌体展示技术介绍
噬菌体展示技术(phage display technology)是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下，使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达，融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或
什么是DNA噬菌体？
中文名称DNA噬菌体英文名称DNA phage定 义能感染细菌并在细菌内复制自身的DNA病毒。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
噬菌体生物性状
噬菌体的体积小，其形态有蝌蚪形、微球形和细杆形，以蝌蚪形多见。噬菌体是由核酸和蛋白质构成。蛋白质起着保护核酸的作用，并决定噬菌体的外形和表面特征。其核酸只有一种类型，即DNA或RNA，双链或单链，环状或线状。
噬菌体的临床应用
（1）细菌的鉴定与分型噬菌体的作用具有高度特异性。一种噬菌体只能裂解一种或与该种相近的细菌，故可用于细菌的鉴定和分型。目前已利用噬菌体将金黄色葡萄球菌分为四个群数百个型，这种用噬菌体分型的方法，在流行病学调查上，对追查和分析这些细菌性感染的传染源很有帮助。（2）检测标本中的细菌应用噬菌体效价增长试验
噬菌体展示技术简介
噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白基因与噬菌体特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术。该技术实现了表型与基因型的统一。随着噬菌体展示技术的进一步发展，其优越性被越来越多的实验室所认识，使得该技术的使用范围不断扩展，也使该技术得以不断的完善和发展。
噬菌体的临床应用
（1）细菌的鉴定与分型噬菌体的作用具有高度特异性。一种噬菌体只能裂解一种或与该种相近的细菌，故可用于细菌的鉴定和分型。目前已利用噬菌体将金黄色葡萄球菌分为四个群数百个型，这种用噬菌体分型的方法，在流行病学调查上，对追查和分析这些细菌性感染的传染源很有帮助。（2）检测标本中的细菌应用噬菌体效价增长试验
噬菌体的相关介绍
噬菌体（phage）是侵袭细菌的病毒，也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体必须在活菌内寄生，有严格的宿主特异性，其取决于噬菌体吸附器官和受体菌表面受体的分子结构和互补性。噬菌体是病毒中最为普遍和分布最广的群体。通常在一些充满细菌群落的地方，如：泥土、动物的肠道里，都可以找到噬菌体。 噬菌
温和噬菌体的定义
噬菌体侵入宿主细胞后，噬菌体的DNA只整合在宿主的核染色体上，并可长期随宿主DNA的复制而进行同步复制，一般情况下不进行增殖，不引起宿主细胞裂解的噬菌体，称温和噬菌体或溶源噬菌体。