WIKI资讯
WIKI资讯
噬菌体抗体ELISA 噬菌体ELISA快速而便捷，尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。不过，后续的抗体检测总是要以其可溶性形式进行。 [器材和试剂] ● 96孔ELISA板，例如Nunc maxisorb442404(可自VWR购得) ● 2％M ● /Tween ● 辣根过氧化物酶(HRP)标记的小鼠抗噬菌体单克隆抗体(mAb)(Amer Sham BiOSCiences) ● 3，3’，5，5’—四甲基联苯胺(TMB)液体底物系统(SigmaT—8665) ● 终止液(1mol/L H2SO4) ● 噬菌体样品 [方法] 1．按每孔100ul蛋白抗原包被微量滴定板，4℃过夜。中10ug/m1的浓度是包被抗原的标准浓度。但有时需要更高的浓度或者不同的包被缓冲液(比如碳酸盐缓冲液)。 2．弃去抗原液并用洗涤板孔2次。 ......阅读全文
在抗体研究的漫长过程中,相继发展了三代不同水平的抗体制备技术｡其中以抗原免疫高等脊椎动物制备的多克隆抗体,称为第一代抗体;通过杂交瘤技术生产的只针对某一种特定抗原决定簇的单克隆抗体,称为第二代抗体;应用重组DNA技术或是基因突变的方法改造某种抗体基因的编码序列,使之产生出自然界中原本存在的抗体蛋白质
进化的力量通过生命的多样性得以展现。2018年诺贝尔化学奖被授予弗朗西丝·阿诺德、乔治·史密斯和格雷戈里·温特，理由是3人在掌控进化的方式及利用其为人类带来最大福祉方面作出了重要贡献。通过定向进化开发出来的酶如今被用于生产生物燃料、药物和其他事物。同时，利用一种被称为噬菌体展示技术的方法进化出来
免疫PCR技术（Immuno-PCR） 免疫PCR方法（Immuno-PCR）是Takeshi等1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术，具有抗原、抗体反应的特异性和PCR技术的高效性。它运用PCR的高度敏感性来放大抗原抗体反应的特异性，使实验中只需数百个抗原分子即
Part 1杂交瘤、单细胞克隆和噬菌体展示技术是抗体发现的三种主流技术，其中噬菌体展示技术作为诺奖级别的技术，在生物创新医药研发过程中有着十分重要的作用，极大的加快了抗体类药物研发的进程。噬菌体展示技术不仅在新的抗体和多肽的发现及优化过程中有着核心的作用，还能和传统的动物免疫技术相结合，与纳米抗体、
Part 1杂交瘤、单细胞克隆和噬菌体展示技术是抗体发现的三种主流技术，其中噬菌体展示技术作为诺奖级别的技术，在生物创新医药研发过程中有着十分重要的作用，极大的加快了抗体类药物研发的进程。噬菌体展示技术不仅在新的抗体和多肽的发现及优化过程中有着核心的作用，还能和传统的动物免疫技术相结合，与纳米抗体、
2018年即将过去，年末为大家献上本年度生物领域获奖专题盘点，希望读者朋友们能够喜欢。1. “诺奖风向标”榜单揭晓 4名科学家荣获2018拉斯克奖 拉斯克奖是全球最为著名的医学类奖项之一，也有“诺贝尔风向标”之称。这是因为在诸多拉斯克奖得主中，已有87人获得了诺贝尔奖。2015年诺贝尔生理学或
近年来，生物药的市场需求逐年扩容，其中抗体药物因其靶向性好，治疗效果显著，在生物药中占据着举足轻重的地位，目前已经进入了抗体药物发展的黄金时代。随着抗体药的需求越来越大，抗体筛选技术的发展也是日新月异，目前应用较普遍的有杂交瘤技术、抗体文库筛选技术、纳米抗体技术和转基因小鼠抗体筛选技术。其中抗体
Part 1前言ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法，其实质是亲和力测定方法的一种变种，其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法，用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点，1.待测
ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是最为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法，其实质是亲和力测定方法的一种变种，其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法，用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点：待测样本极具多样性，且
抗体制备是免疫学研究的基础。制备一个合适的抗体将会决定着免疫实验的成败。抗体制备过程涉及到很多个方面，比如免疫原如何设计、免疫过程的优化、目的抗体筛选、抗体纯化、应用鉴定等。接下来我们将会对一些关键的技术难点进行解答。 1. 免疫原是如何设计的？有什么原则？ 解答：免疫原可以是天然蛋
一、抗体的定义和第一代单克隆抗体（经杂交瘤细胞生产） 抗体是在对抗原刺激的免疫应答中，B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。它是能与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应（生理效应）的球蛋白。国际卫生组织将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的一类蛋白统一命名为免疫球蛋白，它与抗体都是指同一类蛋白质。70
霍华德·休斯医学研究所（HHMI）的科学家们开发了一种突破性技术（VirScan），可以通过一滴血揭示你的病毒感染史。这一成果发表在六月五日的Science杂志上，文章的通讯作者是著名科学家Stephen Elledge。 目前的诊断方法只能一次检测一种特定病毒，而VirScan只需要一滴血就
成纤维细胞生长因子(FGF)是最大的一类中胚层和上皮细胞生长分化多肽因子家族。FGFs在许多生物学过程中发挥重要作用，比如胚胎发育，伤口愈合，血细胞生成及血管发生等。此外，已有研究表明FGFs可以增加多种肿瘤细胞的浸润性，如前列腺、膀胱、肾脏、乳房、胰腺等部位肿瘤。目前，共发现20多种FGFs，对不
20世纪90年代末，治疗药物主要由小分子化药主导。而在近几十年里，人类生命健康领域基于抗体药物疗法的使用呈现了指数级增长，并成为了治疗药物的一大组成部分。抗体已被证明在治疗包括癌症、自身免疫、传染病甚至神经退行性疾病在内的多种疾病方面具有广泛的用途[1]。FDA仅在2018年就批准了59款新药，
单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体展示系统一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒，pIII是病毒的次要外完蛋白（minor coatprotein）、位于病毒颗粒的一端，每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋
一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒，pIII是病毒的次要外完蛋白（minor coatprotein）、位于病毒颗粒的一端，每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白，pIII有两个位点可供外源序列插入，即N端和近N端可伸屈
与杂交瘤技术相比，噬菌体展示技术具有很大的优势。杂交瘤法仅适用于小鼠、大鼠、仓鼠和豚鼠。另一方面，噬菌体展示可用于包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔、鸡、骆驼、骆驼、羊驼、牛、狗、绵羊、猴和鲨鱼在内的所有流行的抗体产生物种产生高亲和力单克隆抗体。基于杂交瘤的单克隆抗体开发一次只能产生少量针对特定免疫原的
2018年诺贝尔化学奖尘埃落定，授予Frances Arnold、George Smith、Gregory Winter三人。其中化学奖一半的奖金授予美国科学家Frances Arnold，奖励她的工作实现了酶的定向进化；另一半的奖金授予英国科学家Gregory Winter以及美国科学家Geo
[器材和试剂] ● 链霉亲和素磁珠（DynabeadsM280,Dynal） ● 磁性1.5ml试管架（Dynal） ● 磷酸盐缓冲液（PBS） ● 2%脱脂奶粉PBS（2%MPBS） ● 生物素化试剂盒 ● 含0.1为Tween-20的P
前几天有“砖家”同学写了两篇《鼠年说鼠》（一）和（二）。为了留作永久的学习材料，小编在经过原作者同意后，现进行转载。本文将两部分内容融在一起，并对（一）和 （二）顺序进行了调换。 抗体药发现的两大矿场 抗体药主要有两个大矿场，一个是依赖于体外展示技术的全合成/半合成/天然抗体
【材料和试剂】 （1）酶标板 （2）酶标仪 （3）0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) （4）1％A （5）HRP标记的抗M13噬菌体多抗 （6）2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10μg
免疫疗法是当下肿瘤治疗领域最具前景的发展方向之一。随着PD-(L)1等免疫检查点抑制剂应用范围逐渐扩大，CAR-T疗法研究不断出现新的进展，CAR-T疗法作为有别于传统药物的“活药”，不仅对复发、难治性肿瘤患者表现出了突破性疗效，其生产体系和使用场景也有别于普通药物。鉴于当下生物技术的更新速度，
1985年，Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ，使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面，从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内，即在噬菌体表面展示特定蛋白质，而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另
4.发展方向 国内生物制药企业应该立足创新，进行创仿结合，才有可能获得长足的发展。可以从以下方面加以突破。 （1）草药有效生物活性成分的发酵生产 中草
10月，2018年度诺贝尔化学奖揭晓。今年该奖项的获得者是美国科学家弗朗西丝·阿诺德（Frances H. Arnoid）、乔治·史密斯（George P. Smith）和英国科学家格雷戈里·温特（Sir Gregory P. Winter）。他们的获奖理由是在酶的定向演化以及用于多肽和抗体的噬
单克隆抗体技术发展日新月异。早期，抗体类药物主要是解决免疫原性问题，上世纪80年代以前的单抗主要是鼠源抗体，包括免疫原性反应在内的安全性问题使其难以得到临床认同。1989年Winter研究所用PCR方法克隆出机体全部基因，这为人类在不依赖鼠抗体的情况下直接制备人抗体奠定了基础。如今，全人源抗体技
经过3～4轮的筛选后，应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言，在后几轮的筛选中，每次获得的噬菌体总量都会增加，但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是最灵敏的鉴定所获取
经过多年发展，中国单抗药物的研发能力基本有所储备，研发靶点紧跟国际研发和市场热点，并颇受资本市场关注。“目前抗体行业很火，但中国主要以仿制为主，且研究靶点较集中。”在李晶看来，国内抗体药物临床研究申请2012年还不足两位数，到了2014年翻了数倍，其中70%的研究都是针对TNFα、HER2、VE
图4. 单克隆抗体结构与类型[7]Rituximab是嵌合mAb，其在临床上用于治疗非霍奇金淋巴瘤。不幸的是，小鼠可变区在许多情况下仍然被认为是外来的，这使得嵌合mAb的应用得到了一定的限制。[6-7] Alemtuzumab是人源化单克隆抗体，一种白血病抗癌新药。人源化单克隆抗体在可变区域内，
抗体是由B细胞转化而来的浆细胞分泌的，每个B细胞株只能产生一种它专有的、针对一种特异性抗原决定簇的抗体。这种从一株单一细胞系产生的抗体就叫单克隆抗体（McAb）,简称单抗。第一代单抗来自于Koehler和Milstein于1975年开发出的杂交瘤（hybridoma）抗体技术：在细胞融合技术的基