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细胞表面标记的检测技术

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP(Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique)技术的基本原理为:抗鼠IgG抗体作为桥梁,将鼠源性识别细胞抗原的第一抗体与鼠源性的抗碱性磷酸酶单克隆抗体-碱性磷酸酶复合物相连接,使之成为Ag,-Ab1-Ab2-anti AP-AP的复合物。还可通过二抗将APAAP 复合物重复叠加起来,从而使多个碱性磷酸酶标记于组织细胞上第一抗体所识别的抗原部位,提高了敏感性。 ......阅读全文

量子点活细胞成像应用的实验方案建议

   量子点(Quantum dot, QD)是一种新型荧光纳米材料,又称半导体纳米晶,呈近似球形,三维尺寸在2-10nm,具有明显的量子效应,其物理、光学、电学特性优于传统有机荧光染料,是新一代荧光标记探针的优质选择。    Chan等将量子点与传统有机荧光染料进行了光学特性的比较,发现量子点的

量子点活细胞成像应用的实验方案

量子点(Quantum dot, QD)是一种新型荧光纳米材料,又称半导体纳米晶,呈近似球形,三维尺寸在2-10nm,具有明显的量子效应,其物理、光学、电学特性优于传统有机荧光染料,是新一代荧光标记探针的优质选择。Chan等将量子点与传统有机荧光染料进行了光学特性的比较,发现量子点的荧光亮度是传统荧

流式细胞仪的原理及应用举例

简介免疫细胞是一组不均一的细胞群体。各种特定的细胞群其细胞表面表达有各自特异的表面标志分子,利用这些特异的表面标志,可以鉴定、分离和纯化相应的细胞群。随着单克隆抗体技术的诞生和免疫标记技术(特别是荧光标记技术)的发展,以及计算机科学的应用,使利用仪器的方法检测特异的细胞膜表面分子成为可能。本章介绍的

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

  第一节  免疫细胞的分离  一、外周血单个核细胞的分离  将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。  主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释

流式细胞术在血液学中的应用

  DNA倍体分析及细胞周期分析    在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞

免疫细胞化学在神经科学中的应用-2

七、个体和种族发育的研究  神经系统是一个历史发展的产物,有种族发育和个体发育的历史。在种系发生方面,有不同的发育规律,如一些神经肽自腔肠动物已经发生,而VIP自鱼类才开始发生。免疫反应的强弱和神经肽的含量亦因种属不同而异,如笔者对输精管的神经支配的研究表明,在大鼠、豚鼠和猫等动物,输精管管壁内有丰

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

如何根据实验目的选择流式细胞仪

相关专题 自七十年代出现第一代流式细胞仪以来,随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光 素合成技术的不断发展,现代流式细胞仪已今非昔比,制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。流式细胞仪 生产厂商推出各种不同型号的流式细胞仪来满足用户的不同需要。现生产流式细胞的厂商全球

流式细胞技术基本原理应用和发展趋势

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成

流式细胞仪在生物学中的应用

流式细胞仪在生物学中的应用 耿慧霞 ,王 来 ,王 强 (河南大学生命科学学院 ,河南开封 475001) 摘 要 :简要论述了流式细胞仪(flow cytometry ,FCM) 的工作原理 ,并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述 ,包括 对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研

采用细胞内荧光染料CFSE检测淋巴细胞的迁移和增殖

基 本 方 案 淋 巴 细 胞 的 CFSE 标记材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)实验动物,人外周血或者培养的淋巴细胞VPBS, pH7. 4H a n k s 平 衡 盐 溶 液(H B S S ) p H 7. 4含 5 % (V /V ) 热 灭 活 F B S 的 P B S5m m

角膜缘干细胞的量子点标记及体外移植示踪

体外培养的人角膜缘上皮细胞(Human Limbal Epithelial Cells, HLEC)在治疗角膜缘干细胞缺陷性疾病方面显示良好的应用前景。但是,对于其移植后的存活状态、行为方式以及长期效应等尚不明确。伦敦大学眼科研究所及莫菲尔眼科医院Alex J. Shortt课题组,应用

细胞周期的四种检测方法

细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。细胞周期是一个重要的检测参数,研究细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。细胞周期内有两个阶段最为重要:G1 到

周细胞作为胶质瘤潜在治疗靶点研究进展

  胶质瘤是中枢神经系统(central nervous system,CNS)最常见的恶性肿瘤,约占原发性脑肿瘤的30%~40%,其中绝大多数为胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)。世界卫生组织(World Heath Organization,WHO)按照病理分

采用细胞内荧光染料CFSE检测淋巴细胞的迁移和增殖

实验步骤基 本 方 案 淋 巴 细 胞 的 CFSE 标记材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)实验动物,人外周血或者培养的淋巴细胞VPBS, pH7. 4H a n k s 平 衡 盐 溶 液(H B S S ) p H 7. 4含 5 % (V /V ) 热 灭 活 F B S 的 P B S

B淋巴细胞膜表面分子

   B细胞表面有多种膜表面分子,籍以识别抗原、与免疫细胞和免疫分子相互作用,也是分离和鉴别B细胞的重要依据。B细胞表面分子主要有白细胞分化抗原、MHC以及多种膜表面受体(图7-2)。  (一)CD抗原  在B细胞表面重要的CD抗原参见第一章表1-1,与B细胞识别、粘附、活化有关

干细胞的鉴定实验——免 疫 电 镜 胶 体 金 标 记 技 术

实验步骤免 疫 电 镜 胶 体 金 标 记 技 术免疫电镜技术是利用抗原抗体特异性结合的原理,在细胞超微结构水平上定位、定性和定量,原位显示抗原大分子的技术。 1971 年 Faulk 等将胶体金标记抗体技术应用到电镜中,开始了免疫电镜胶体金标记技术。该技术的优点是:胶体金颗粒致密,易于辨认 ;定位

肿瘤免疫治疗成像技术的研究进展

  1. 肿瘤免疫治疗  肿瘤免疫治疗是指通过免疫系统的被动或主动免疫来控制和杀灭肿瘤的一种治疗方法。与传统医疗手段在物理和化学层面上杀灭肿瘤细胞不同,肿瘤免疫疗法通过增强机体免疫系统功能来控制和杀灭肿瘤,具有不良反应小、特异性强等优点。根据治疗原理的不同,免疫疗法主要可分为非特异性免疫刺激、肿瘤疫

肿瘤免疫治疗成像技术的研究进展

  1. 肿瘤免疫治疗  肿瘤免疫治疗是指通过免疫系统的被动或主动免疫来控制和杀灭肿瘤的一种治疗方法。与传统医疗手段在物理和化学层面上杀灭肿瘤细胞不同,肿瘤免疫疗法通过增强机体免疫系统功能来控制和杀灭肿瘤,具有不良反应小、特异性强等优点。根据治疗原理的不同,免疫疗法主要可分为非特异性免疫刺激、肿瘤疫

流式细胞术的工作原理与发展综述

摘要:流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。是一项多学科交叉研究的结晶。流式细胞术及流式细胞仪的出现融合了医学,计算机学,物理学等众多学科背景。。它不仅测量速度快、准确度好、灵敏度高,而且还

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

实时无标记细胞分析技术(RTCA)常见问题解析(一)

身在实验室中的您,RTCA 实验做了很多,操作越来越娴熟,实验曲线也越来越漂亮,当沉浸在实验成功的喜悦中时,是不是也有对 RTCA  技术的些许疑惑和问题?不用担心,下面昊诺斯就马上为您奉上丰盛的 RTCA 技术 FAQ 套餐,将您心中的问题一网打尽!技术原理篇Q: 什么事实时无标记细胞功

干细胞研究鼻祖分享经验:如何分选干细胞

  最早研究人员是在1997年发现了急性髓系白血病(AML)血液样品中的癌症干细胞,但是由于采用表面标记物证明实体肿瘤中癌症干细胞的存在,常常会出现不一致的结果,因此这一理论也引发了激烈的讨论。但是近年来科学家们在所有癌症类型(胶质母细胞瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌和肺癌)中发现了具有自我更新能力,启

检测细胞凋亡的实验方法比较-2

二、细胞凋亡的细胞化学测定细胞凋亡的细胞化学测定包括细胞表面(细胞膜)的结构和通透性改变的测定和细胞核DNA改变的测定。根据应用的范围,又可分为细胞群休和单个细胞测定两种,以下仅介绍其中几种较为常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)检测早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞

循环肿瘤细胞的检测方法

  近年来随着现代医学研究技术的进步和CTC临床应用价值凸显,许多研究机构和研发团队都在推出不同的CTC检测技术。由于血液中CTC的含量极低,目前主流的检测方法是先捕获(富集)后检测,少量方法是不捕获(富集)直接检测。CTC检测技术包括CTC的富集(分离)和CTC的分析鉴定(识别)。本篇文章将介绍C

综述:肺癌免疫时代到来

  来自印度开罗大学的 Don G. Morris 教授等在 Frontieirs in oncology 上近期发表的一篇综述,系统地概括了目前在肺癌免疫治疗领域的进展,以及近期一系列临床试验进行的现状。  摘要  关于炎症 / 感染 / 免疫激活与肿瘤患者预后的相关性,许多研究都从原因和结果的不

区分好脂肪与坏脂肪的标志物

  自从发现“并不是所有的脂肪细胞都一样的”以来,研究人员一直都在寻找一种可靠的方法,来区分所谓的“好”脂肪——代谢活跃的棕色脂肪细胞,和“坏”脂肪——相对惰性的白色脂肪细胞。到目前为止,区分棕色脂肪和白色脂肪的生物标志物,都是细胞内蛋白或分泌性蛋白质,这不利于全组织或活体研究。  最近,研究人员确