膜片钳技术的应用进展(三)

4 膜片钳技术的主要用途 膜片钳技术广泛用于研究细胞离子通道,已经成为研究细胞水平生理功能的常用技术。归纳其主要用途包括[4] :1)可分辨单通道电流,直接观察通道开启和关 闭的全过程。通过测得的单通道特征参数可鉴别通道类型,同时可验证和研究通道的开关动力学模型。2)单通道记录可以解释某些药物的作用机制,以研究特定药 物对电压和递质依赖通道的影响。3)膜片钳的空间分辨率高,在中枢神经系统中可分离细胞体与轴突和树突的电流;在周围神经系统中可深入了解受体的分布区域,绘制细胞表面的特定离子通道的分布图。4)“内面向外”和“外面向内”膜片记录允许任意改变膜片内外溶液成分,分别研究单一组分对通道特征的影响,避免了其他成分的干扰。而全膜片记录可用来研究常规电压钳无法研究的小型细胞,在控制细胞内一定离子浓度的同时监测整个细胞膜的电活动。这种方法已被用于采 用......阅读全文

膜片钳技术的应用进展(三)

4  膜片钳技术的主要用途     膜片钳技术广泛用于研究细胞离子通道,已经成为研究细胞水平生理功能的常用技术。归纳其主要用途包括[4] :1)可分辨单通道电流,直接观察通道开启和关 闭的全过程。通过测得的单通道特征参数可鉴别通道类型,同时可验证和研究通道的开关动力学模型。2)单通道记录可以解释

膜片钳技术的应用进展(一)

【摘要】  膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”,应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在,并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。 【关键词】  膜片钳技术 离子通道 进展    1976年由德国马普生物物理化学研究所的Neher和Sakamann首次报道了应用膜片钳技术在蛙胸

膜片钳技术的应用进展(二)

2.3  实验的一般操作步骤     ①拉制微电极和充灌微电极;②将预先处理的实验标本置于显微镜载物台上的灌流槽内;③于显微镜低倍镜下,用微操纵器将电极移动到浴液上方,换用高倍镜按一 定标准选择合适的细胞,然后接近靶细胞或组织,完成电极与标本的封接;④给予钳位电压或电流等指令条件并分别记

关于膜片钳技术的应用介绍

  (1)与药物作用有关的心肌离子通道  心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。近年来,国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。  (2)对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究  通过对各种生理

膜片钳技术的应用学科相关介绍

  膜片钳技术发展至今,已经成为现代细胞电生理的常规方法,它不仅可以作为基础生物医学研究的工具,而且直接或间接为临床医学研究服务,  目前膜片钳技术广泛应用于神经(脑)科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。  随着全自动膜片钳技术(Au

电生理专题——膜片钳技术的应用

  膜片钳技术发展至今,已经成为现代细胞电生理的常规方法,它不仅可以作为基础生物医学研究的工具,而且直接或间接为临床医学研究服务。  目前膜片钳技术广泛应用于神经(脑)科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。  随着全自动膜片钳技术(Au

RNAi干扰技术及应用进展研究(三)

3.2 基因治疗及药物筛选探索由于RNAi是针对转录后阶段的基因沉默,相对于传统基因治疗对基因水平上的敲除,整个流程设计更简便,且作用迅速,效果明显,为基因治疗开辟了新的途径。 其总体思路是通过加强关键基因的RNAi机制,控制疾病中出现异常的蛋白合成进程或外源致病核酸的复制及表达。尤其针对引起一

膜片钳的应用举例

  (1).膜片钳技术在通道研究中的重要作用  应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流

膜片钳的在离子通道技术中的应用

应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分

膜片钳技术的技术原理简介

  膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来,由于电极尖端与细胞膜的高阻封接,在电极尖端笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离,因此,此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管,用一个极为敏感的电流监视器(膜片钳放大器)测量此电流强度,就代

膜片钳记录技术

中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定  义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住(钳住)细胞膜片表面,然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

膜片钳技术简介

  膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。  传统膜片钳技术每次只能记录

膜片钳技术原理

可兴奋膜的电学模型      细胞膜由脂类双分子层和和蛋白质构成。脂质层的电导很低,由于双分子层的结构特点,形成了细胞的膜电容,通道蛋白的开闭状况主要决定了膜电导的数值。在细胞膜的电学模型中,膜电容和膜电导构成了一个并联回路。在细胞膜的电兴奋过程中,脂质层膜电容的反应是被动的,其电流电压曲线是线

膜片钳技术在神经药理方面的应用(2)

  二 操作步骤  1. 膜片钳微电极制作  (1) 玻璃毛细管的选择:有二种玻璃类型,一是软质的苏打玻璃,另一是硬质的硼硅酸盐玻璃。软质玻璃在拉制和抛光成弹头形尖端时锥度陡直,可降低电极的串联电阻,对膜片钳的全细胞记录模式很有利;硬质玻璃的噪声低,在单通道记录时多选用。玻璃毛细管的直径应符合电极支

膜片钳技术在神经药理方面的应用(3)

  2. 溶液的组成  (1) 电极液:根据记录的电流不同电极液的成分也不同。基本要求是等张的KCI 溶液,Ca2+ 浓度为10~100nmol (pCa 7~8),pH 值7~7.4。这里介绍一个在全细胞记录模式时,通过改变保持电位,能分别记录到Na+、K+、Ca2+ 电流的电极液成分(mmol/

膜片钳技术在神经药理方面的应用(1)

  1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片钳技术(Patch clamp technique),这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或多数的离子通道分子活动的技术。1981 年Hamill, Neher 等人又对膜片钳实验方法和电子线路进行了改进,形成了当今广泛应用

膜片钳的相关应用举例

  1、与药物作用有关的心肌离子通道  心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。  2、对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究  通过对各种生理或病理情况下

全自动膜片钳技术及其在药物筛选中的应用

一:全自动膜片钳技术介绍:膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。传统

PCR技术应用进展

   PCR技术自1985年建立以来,发展之迅速、应用之广泛,表明其具有强大的生命力.近些年来,基于PCR的基本原理,许多学者充分发挥创造性思维,对PCR技术进行研究和改进,使PCR技术得到了进上步地完善,并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术  原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应

膜片钳技术的操作步骤

  (1)膜片微电极的制作  拉制  膜片微电极是将玻璃毛细管用拉管仪拉制而成。  涂硅酮树酯  将硅酮树酯涂于微电极的最尖端以外的部分,然后将其通过加热镍铬电阻线圈而烘干变固。  热刨光  在显微镜下,将微电极尖端接近热源进行热刨光处理可提高巨阻抗封接的成功率。  充灌微电极液  用于灌充微电极的

膜片钳技术的基本介绍

  1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术(patch clamp recording technique)。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的或多个的离子通道分子活动的技术。它和基因克隆技术(gene cloning)并架齐驱,给生命科学研究

实验离心技术进展(三)

转头:突出的改进表现在经计算机计算优化后的轻型转头;碳纤维材料制造的超速和大容量超轻转头;适用于生物大分子(DNA,RNA,蛋白等)离心分离用的小倾角转头(固定倾角 7°~10°);超高速,特大离心力转头等等。 铝合金制造的轻型大容量转头:以往的6×500ml 角转头自重24kg 以上,经过计算 机

膜片钳技术(patch-clamp)

Instruments For ElectrophysiologyProducts include microelectrode, voltage and current clamp amplifiers, perfusion chambers, perfusion heating systems,

光谱界专家分享光谱技术的新进展、新应用(三)

——第十九届全国分子光谱学学术会议暨2016年光谱年会大会报告(三)  分析测试百科网讯 2016年10月28日,第十九届全国分子光谱学学术会议暨2016年光谱年会在福州盛大开幕(详见本网报道:光谱领域专家汇聚福州 共同探讨光谱学发展),会议由中国光学学会和中国化学会主办,中国科学院福建物质结构研究

体内荧光成像技术的进展(三)

成像新策略的出现改进探针亲和性的多种途径探针同靶点的紧密和特异性结合通常是成像成功的关键。因为许多成像靶点都位于细胞表面之外,所以多途径原则可以用来改善探针的结合亲和性。最近有两篇文献报道了用于异种移植肿瘤αvβ3 整合素(integrin)体内成像的RGD(Arg-Gly-Asp )寡肽的

膜片钳及其原理和应用

  膜片钳是一种可以直接观察单一的离子通道蛋白质分子对相应离子通透难易程度等特性的一种实验技术。其基本原理是用一个尖端光洁,直径约为0.5~3um 的玻璃微电极同神经或肌细胞的膜接触而不刺入,然后在微电极另一端开口处施加适当的负压,将与电极尖端接触的那一小片膜轻度吸入电极尖端的纤细开口,这样在这一小

脑片膜片钳实验方法(三)

4、突触反应的判断及其波幅稳定性的评价突触信号的判断   突触信号样的假象波有三个来源。第一、邻近纤维的活动使静止细胞产生电压波动;第二、如果恒流刺激强度过大,电流就可被注入突触后神经元,使其产生失活时间类似EPSP或EPSC的信号,其信号幅度随刺激强度的变化而变化;第三、直接刺激突触后神经元诱导

膜片钳记录技术的方法介绍

中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定  义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住(钳住)细胞膜片表面,然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

关于膜片钳技术的发展历史

  该技术是由电压钳(voltageclamp)发展而来的,电压钳技术由Cole和Marment设计,后经Hodgkin和Huxley改进并成功地应用于神经纤维动作电位的研究 [2] 。其设计原理是根据离子作跨膜移动时形成了跨膜离子电流(I),而通透性即离子通过膜的难易程度,其膜电阻(R)的倒数,也

PCR技术(六):PCR技术应用进展

PCR技术自1985年建立以来,发展之迅速、应用之广泛,表明其具有强大的生命力.近些年来,基于PCR的基本原理,许多学者充分发挥创造性思维,对PCR技术进行研究和改进,使PCR技术得到了进上步地完善,并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术  原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结