避免RNA降解的方法有哪些?

(1)在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA。(2)运用良好无污染的技术分离RNA(3)将组织提取后立刻提取RNA,并将提取好的RNA反转录为cDNA进行低温保存。......阅读全文

避免RNA降解的方法有哪些?

(1)在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA。(2)运用良好无污染的技术分离RNA(3)将组织提取后立刻提取RNA,并将提取好的RNA反转录为cDNA进行低温保存。

避免RNA酶污染的方法

RNase酶非常稳定,是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活,但限制因素去除后又迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的RNase完全失活。为了获得高质量的真核细胞mRNA,必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度

避免过滤器回流的方法有哪些?

  过滤器在使用中会出现回流的现象,那么如何避免这一现象的发生呢?下文我们来简单的了解一下。  1、过滤器应串联安装在管路系统中,为保证在停机检修时系统不间断供水,建议系统中设置旁路,过滤器进出口及旁路均应设置切断用球阀。在有可能发生回流的地方,应在过滤器出口安装止回阀。  2、过滤器规格的选用应与

RNA降解

新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如  果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。 2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是:在液氮条件下将组织

信使RNA的降解

同一细胞内的不同mRNA具有不同的寿命(稳定性)。在细菌细胞中,单个mRNA可以存活数秒至超过一小时,但平均寿命为1至3分钟,因此,细菌mRNA的稳定性远低于真核mRNA。哺乳动物细胞mRNA的寿命从几分钟到几天不等。mRNA的稳定性越高,从该mRNA产生的蛋白质越多。 mRNA的有限寿命使细胞能够

分离DNA和RNA主要方法有哪些

盐析法 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小 在DNA溶解度最低时 DNA从溶液中析出 而其他杂质还留在溶液中 达到粗提取的目的酶水解法 采

RNA提取时RNA降解原因

1 ) 新鲜细胞: 裂解液的量不足,使得裂解不充分。 2 ) 新鲜组织: 某些含有内源性核酸酶的样品,很难避免RNA酶的降解,建议采用的方法为在液氮条件下将组织研碎,并且,匀浆时采用更多的裂解液。 3 ) 冷冻样品: 样品取材后应该迅速置于液氮中冷冻存放,然后转移到-70℃冰箱存

生物可降解塑料有哪些

  生物降解塑料又可分为完全生物降解塑料和破坏性生物降解塑料两种。  破坏性生物降解塑料当前主要包括淀粉改性(或填充)聚乙烯PE、聚丙烯PP、聚氯乙烯PVC、聚苯乙烯PS等。  完全生物降解塑料主要是由天然高分子(如淀粉、纤维素、甲壳质)或农副产品经微生物发酵或合成具有生物降解性的高分子制得,如热塑

样本抽提中RNA降解的解决方法

从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常……降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不准确。遇到R

样本抽提中RNA降解的解决方法

  从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常……   降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不

Nature揭秘RNA降解机制

  就好像我们利用碎纸机来销毁不再有用或包含有潜在破坏性信息的文件一样,细胞利用一些分子机器来降解不必要或有缺陷的大分子。来自马克斯普朗克生物化学研究所(MPIB)的科学家们,现在揭示出了细胞核区室利用一种特异的RNA外来体(exosome)的机制——这一大分子机器负责了核糖核酸(RNAs)的降解和

RNA-酚污染-怎么避免

如果是酚污染:加200氯仿抽提离心得到上清后再加等体积的氯仿(400-500)抽提一次。 问题是不知道是不是酚污染而造成在270吸光值.....西瓜(站内联系TA)加了氯仿抽提之后,吸上清不要贪多。RNA要的是纯度,浓度一般不成问题。碰到下层就会有酚的污染。 再有就是用酒精漂洗的时候,尽量让沉淀块整

RNA提取裂解液有哪些

CTAB ,异硫氰酸胍

RNA-和-DNA-提取的降解问题

降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在 RNA 提取过程中,样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于 DNA 提取,降解不是一个大问题,因为对于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有较多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。

核糖体RNA有哪些特点?

  核糖体RNA在各种生物中都有其特性,因此可以从不同生物的rRNA的对比中得出关于生物进化历程的结论。  rRNA为肽酰转移酶(peptidyl transferase)时,催化使肽键形成,不需要额外的能量。  过去认为,大亚基的蛋白质具有酶的活性,促使肽键形成,故称为转肽酶。20世纪90年代初,

核糖体RNA有哪些功能?

  在核糖体中,rRNA是起主要作用的结构成分,是结构和功能核心,主要功能是:  (1)具有肽酰转移酶的活性。  (2)为tRNA提供结合位点。  (3)为多种蛋白质合成因子提供结合位点。  (4)在蛋白质合成起始时,参与同mRNA选择性的结合以及在肽链的延伸中与mRNA结合。  (5)此外,核糖体

除了加湿机,避免静电伤害有何方法

冬天空气干燥,静电不断出现,静电不止是影响工业生产,对人体伤害也很大,据统计,在冬季,大约三分之一的心血管疾病都与静电有关。体内静电会引起脑神经细胞膜电流传导异常,影响人的中枢神经,从而导致人的血液酸碱度和肌体氧特性的改变,使人感到疲劳、烦躁、失眠、头痛,严重者可能导致精神病变。静电对人的伤害远不止

Cell新文章解析RNA降解机制

  如同我们利用碎纸机来销毁不再有用或是包含潜在破坏性信息的文件一样,细胞利用分子机器来降解不需要或有缺陷的大分子。来自马克思普朗克生物化学研究所的科学家们现在解码了在降解核糖核酸(RNA)过程中起至关重要作用的一个蛋白质复合物(Ski复合物)的结构。这项研究发表在8月15日的《细胞》(Cell)杂

细胞内蛋白质降解的主要途径有哪些

真核细胞内蛋白质的降解途径主要有三种,溶酶体途径、泛素化途径和胱天蛋白酶(caspase)途径。1、溶酶体途径:蛋白质在同酶体的酸性环境中被相应的酶降解,然后通过溶酶体膜的载体蛋白运送至细胞液,补充胞液代谢库。胞内蛋白:胞液中有些蛋白质的N端含有KFERQ信号,可以被HSC70识别结合,HSC70帮

科学家发现新的RNA降解机制

  在任何时候,一个生物体中的全部RNA分子,都是一段微妙的舞蹈所产生的产物。基因必须是“打开”或表达的,以便于把DNA转化为RNA,然后RNA被转化成蛋白质,才能完成一个生物体的生理需求。但是,同样重要的是,那些RNA转录本一旦不再需要就必须被清除。  最近,宾夕法尼亚大学的研究人员对于后面这个过

提纯的方法有哪些

  常见提纯方法  过滤  利用物质的溶解性差距,将液体和不溶于液体的固体分离开来的方法。  结晶  利用溶剂对被提纯物质及杂质的溶解度不同,可以使被提纯物质从过饱和溶液中析出,而让杂质全部或大部分仍留在溶液中,从而达到提纯的目的。  蒸馏  利用互溶的液体混合物中各组分的沸点不同,给液体混合物加热

Science发现RNA全新结构,可抵抗酶降解

  美国科罗拉多大学医学院的研究人员在黄病毒(flavivirus)中发现了一种全新的RNA结构,该结构允许RNA抵抗宿主核酸外切酶的降解。这一发现可以帮助人们开发治疗药物或疫苗,对抗那些致病性的黄病毒,例如登革热病毒、西尼罗病毒、黄热病病毒和乙型脑炎病毒等等。   据介绍,世界上约有40%的人面

理想的RNA标记方法应符合哪些要求?

1. 操作简单,灵敏度高2. 不影响碱基配对的特异性3. 不影响RNA活性4. 对酶促反应活性无影响或影响不大5. 检测方法具有高度灵敏性和高度特异性6. 标记物对人体无害

采血方法有哪些?

1.静脉采血法:成年人静脉采血常选肘部静脉(压脉带捆绑不超过1分钟)。2.真空采血法:真空采血法是一种新的静脉采血法,又称负压采血法。真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。3.皮肤采血法:通常选择耳垂或手指部位。WHO推荐血常规检查采集左手无名指指端内侧血液,婴幼儿可选择大拇趾或足跟内外侧缘血液,严

污水废水中COD含量高,都有哪些方法降解COD

污水、河流等水质COD含量降解方法主要有:吸附法(物理吸附、化学吸附和离子交换吸附)、水质混凝法分离法、电化学法(稳定性不好)、臭氧氧化法、生物法等。1.吸附法:吸附法是利用吸附剂表面积大的特点,将废水中的COD吸附去除的方法。吸附的结果就是使COD组分聚集在吸附剂表面,彻底脱离水体。根据吸附剂吸附

腰腿痛的检查方法有哪些

  腰腿痛的检查方法有:询问病史,即通过病史判断疼痛种类;体格检查,即通过叩诊了解其疼痛部位及诱因,如腰部叩痛明显,且有放射,则可判断是由于椎间盘突出压迫了神经导致。若腰部叩痛不明显,则可能是筋膜炎或慢性盆腔炎等引起的疼痛;患者亦可通过咳嗽自行检查,如患者咳嗽时疼痛,则是神经受到压迫,若咳嗽时疼痛不

测厚的方法有哪些

测厚的方法有接触式测量、超声波测量、放射源测量、激光测量。

Elisa有哪些常用的方法

1. 直接法测定抗原 2.间接法测定抗体 3.双抗体夹心法测定抗原 4. 竞争法测定抗原

甲醛的检测方法有哪些

1、AHMT 分光光度法分光光度法测定的主要方法有乙 酰丙酮法、铬变酸法、MBTH法、副品红法、AHMT法等几种。2、乙酰丙酮法乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶后 ,412nm下进行分光光度测定。此法最大的优点是操作简便 ,性能稳定,误差小,不受乙醛的干扰,有色

常用的浓缩方法有哪些

常用的浓缩方法就是加热蒸发法,使水分蒸发,使溶液浓缩