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RNAi两篇热点文章回顾

自从Andrew Fire 和Craig Mello于1998年提出了RNAi概念后,怎样将小RNA插入哺乳动物细胞成为萦绕科学家心头的一道难题。siRNA可以破坏特定基因的信号,为实现精致的以遗传为基础的治疗带来希望。面临的挑战包括寻找不涉及其他途径、绕过免疫反应,且穿过细胞膜的恰当机制。 面对活体生时,研究人员需要从细胞膜着手。Intradigm公司Martin Woodle说:“我们主要关心的是高电量核酸进入细胞到达有靶标活性的蛋白的困难。” 突破障碍 这篇热点文章证明了包装和运载siRNAs到达特异细胞靶标的各种方法。两种方法都可以通过对小鼠静脉注射实现离散的siRNA递送和沉默。2004年,Woodle与同事们设计和构建了一个纳米颗粒“集装箱(shipping container)”,利用吸附在聚乙二醇(PFG)远端的Arg-Gly-Asp (RGD)小肽配体,靶向表达整合素的肿瘤新生血管。这些纳米颗粒传递一组以......阅读全文

构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验

实验材料 E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液 试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶(CIP)限制性内切核酸酶反应缓冲液4dNTPTris·Cl培养基 仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒

肽适配体的亲和力成熟实验

实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒Taq 聚合酶10×缓冲液引物dATPdGTPdCTPdTTPMgCl2MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 制备

肽适配体的亲和力成熟实验

实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 Taq 聚合酶10×缓冲液引物 dATPdGTP dCTPdTTPMgCl2 MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材 PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「

构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验

实验方法原理 实验材料 E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶(CIP)限制性内切核酸酶反应缓冲液 4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合

用肽适配体正向分析细胞过程实验

实验方法原理 实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒 完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛选株(106~107 转化株)。将转化株涂布到

用肽适配体正向分析细胞过程实验1

实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库 试剂、试剂盒 完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板 仪器、耗材 30℃ 培养箱 实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛

用肽适配体正向分析细胞过程实验2

辅助方案 肽适配体靶点的鉴定 实验方法原理 通过配对相互作用或捕获法鉴定的肽适配体的假定靶点应当通过遗传学测试进行验 证,例如: 1. 用免疫沉淀法确定体内适配体的相互作用; 2. 通过上位(显)性分析以确定适配体在与靶蛋白相同的区域发挥功能; 3. 比较由靶蛋白删除或过表

纳米颗粒跟踪分析技术对药物输送纳米颗粒的观察

纳米颗粒在药物输送中的应用持续迅猛发展。 纳米颗粒可提供优良的药代动力学特性、长效和缓释以及特定细胞、组织或器官的靶定。 可利用的能用于疾病治疗的新生物活性化合物的发现速度在不断递减,这推动了人们对纳米颗粒药物输送的关注。 每年进入市场的新药越来越少,利用纳米颗粒的多用途和多功能结构进行药物输送的兴

利用纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术对药物输送纳米颗粒...

利用纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术对药物输送纳米颗粒进行直接观察、测定大小和计数简介 纳米颗粒在药物输送中的应用持续迅猛发展。 纳米颗粒可提供优良的药代动力学特性、长效和缓释以及特定细胞、组织或器官的靶定。 可利用的能用于疾病治疗的新生物活性化合物的发现速度在不断递减,这推动了人们对纳米颗粒

纳米颗粒识别血管斑块

  现行医疗技术中,医生只能识别由于血小板聚集而变窄的血管。方法是从手臂、腹股沟或颈部的血管处开一个切口植入导管,从导管注入染色剂,使X射线显示狭窄部位。日前,由凯斯西储大学科学家率领的一组研究人员开发了一种多功能纳米颗粒,能使磁共振成像(MRI)定位动脉粥样硬化引起的血管斑块。此项技术向无创性