胰岛素测定实验

实验材料 胰岛素标准品125 I－胰岛素

试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清

仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机

实验步骤

一、材料及试剂

1.  胰岛素标准品(不同浓度的)

2、125 I－胰岛素

3、抗血清

4、第二抗体

5、分析试剂  为0.05 mol/L pH7.4 PBS液＋1%正常兔血清。

6、计数仪

7、试管、加样器、离心机等

二、操作方法

1.  按表进行。

2.  测定和计算反应完毕后，将各管于室温3 000 r/ min离心30 min，仔细吸取上清液，收集于放射性废液贮存容器内。用－计数仪分别测量各管沉淀物（B）的放射性强度（cpm），以两管的cpm均值表示。再以第1，2管的cpm值为Bo，分别计算结合率（B%，即B/Bo×100%），用B%为纵坐标，不同浓度胰岛素标准品为横坐标，绘制标准曲线。然后根据待检管的B%，从标准曲线中即可查得胰岛素的相应含量。