胰岛素测定实验

实验材料 胰岛素标准品125 I-胰岛素试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机实验步骤 一、材料及试剂 1. 胰岛素标准品(不同浓度的) 2、125 I-胰岛素 3、抗血清 4、第二抗体 5、分析试剂 为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。 6、计数仪 7、试管、加样器、离心机等 二、操作方法 1. 按表进行。2. 测定和计算反应完毕后,将各管于室温3 000 r/ min离心30 min,仔细吸取上清液,收集于放射性废液贮存容器内。用-计数仪分别测量各管沉淀物(B)的放射性强度(cpm),以两管的cpm均值表示。再以第1,2管的cpm值为Bo,分别计算结合率(B%,即B/Bo×100%),用B%为纵坐标,不同浓度胰岛素标......阅读全文

胰岛素测定实验

实验材料 胰岛素标准品125 I-胰岛素试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机实验步骤 一、材料及试剂 1.  胰岛素标准品(不同浓度的) 2、125 I-胰岛素 3、抗血清 4、第二抗体 5、分析试剂  为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常

胰岛素测定的简介

  胰岛素的分子量5700,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个 氨基酸,B链有30个氨基酸。A-B链之间有两处二硫键相连。胰岛B细胞中储备胰岛素约200U,每天分泌约40U。空腹时,血浆胰岛素浓度是5~15μU/mL。进餐后血浆胰岛素水平可增加5~10倍。胰岛素的生物合成速度受血浆葡萄糖浓度的影响,

胰岛素的测定原理

RIA法:采用非平衡分析法。先将胰岛素抗抗体与未标记胰岛素(即被测样品或标准品)充分反应,形成胰岛素和胰岛素抗抗体复合物。剩余未结合的胰岛素抗抗体再与I-胰岛素反应,形成I-胰岛素和胰岛素抗抗体复合物。用第二抗体将游离和结合部分分开,测定沉淀部分(B)放射性。依据胰岛素标准曲线,可查得血清样品中胰岛

胰岛素测定标准

  ① 空腹时正常值为5~15mU/L,胰岛素依赖型则低于正常的下限或测不出,非胰岛素依赖型在正常范围或高于正常人。② 胰岛素释放试验:胰岛素依赖型无高峰出现,呈低平曲线;非胰岛素依赖型高峰较正常为低,或高峰延迟。  胰岛素在胰岛B细胞中合成。胰岛素合成的控制基因在第11对染色体短臂上。基因正常则生

胰岛素的含量测定方法

照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制,或2~4℃保存,48小时内使用供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含40单位的溶液。对照品溶液取胰岛素对照品适量,精密称定,加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1m中约含40单位的溶液系

胰岛素(Ins)测定的介绍

  胰岛素(Ins):由胰岛内的胰岛β细胞分泌。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素,也是唯一同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素。作用机理属于受体酪氨酸激酶机制。胰岛素能促进全身组织细胞对葡萄糖的摄取和利用,并抑制糖原的分解和糖原异生,因此,胰岛素有降低血糖的作用。胰岛素分泌过多时,血糖下降迅速,脑组

胰岛素测定实验——放射免疫测定

放射免疫测定胰岛素可以用于:(1)以放射性同位素作为示踪物进行免疫标记检测技术;(2)用同位素标记的抗原和样品中待测的未标记抗原与固定量的特异性抗体竞争结合,或进行竞争性一致反应,以判定待测抗原含量。实验方法原理胰岛素的分子量5700,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个 氨基酸,B链有30个氨基酸。

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

试剂、试剂盒 牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤 材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见“试剂的配制”,P

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

本实验介绍胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I350

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见 试剂的配制  PP.234~240)操作程序1)于

放射免疫测定胰岛素

一、材料及试剂1、胰岛素标准品(不同浓度的)2、125 I-胰岛素3、抗血清4、第二抗体5、分析试剂  为0.05 Mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。6、计数仪7、试管、加样器、离心机等二、操作方法1、按表进行。2、测定和计算反应完毕后,将各管于室温3 000 r/ min离心30m

胰岛素测定的临床意义

  (1)血浆胰岛素正常:见于糖代谢正常者和某些2型糖尿病及低血糖症者,如肝源性低血糖、乙醇性低血糖等。  (2)血浆胰岛素升高:见于肥胖的2型糖尿病、胰岛ß细胞瘤、自身免疫性低血糖症等。  (3)血浆胰岛素降低:见于1型糖尿病。

血清胰岛素测定有什么意义

  血清胰岛素(INS)是由胰岛b细胞分泌的一种唯一能使血糖降低的激素,它的最重要的生理功能就是调控血糖浓度,无论是餐后还是饥饿状态都能使血糖稳定在一定水平,用以维持人体正常生理功能所需。  因此测定胰岛素有助于了解血糖升高与降低的原因,还可用于糖尿病I型与II型的鉴别诊断等。  升高:  胰岛b细

胰岛素测定的临床意义

测定胰岛素可了解胰岛功能,判断糖尿病类型。血胰岛素检测主要适合于没有使用胰岛素治疗的患者,可在空腹及餐后2小时抽血进行测定,正常情况下空腹胰岛素水平应该为10-25mU/dL,而餐后水平应比空腹高出4-5倍。如果胰岛素水平明显降低,就称之为绝对缺乏,可见于1型糖尿病;如果并没有明显减少就称为相对缺乏

胰岛素(Ins)测定的注意事项

  1、标本准备:与血糖同时测定,空腹或糖负荷后静脉血3-5ml,肝素或EDTA抗凝,或用绿帽、钱绿帽或紫帽真空管采血,1h分离血浆,-20°C可稳定6个月,-70°C可稳定一年。  2、运动训练可提高胰岛素的敏感性,是胰岛素水平降低;妊娠中期可见有高胰岛素血症,哺乳期血糖和胰岛素均有所减低;持续禁

胰岛素(Ins)测定的临床意义

  1、胰岛素升高 常见于2型糖尿病,此类患者常较肥胖,其早期、中期均出现高胰岛素血症;胰岛B细胞瘤、胰岛素自身免疫综合征、脑垂体功能减退症、甲状腺功能减退及艾迪生病也有异常升高;此外,妊娠妇女、应激状态下如外伤、烧伤等患者血浆胰岛素水平也会升高。  2、胰岛素下降 常见于Ⅰ型糖尿病及2型糖尿病晚期

胰岛素自身抗体(IAA)测定的介绍

  胰岛素自身抗体(IAA):是指未经胰岛素治疗的糖尿病患者体内结合胰岛素的抗体,区别于绝大多数用外源性胰岛素治疗患者的胰岛素抗体(1A)。虽然内源性胰岛素是人体内在的微弱免疫原,但重组人胰岛素可引起强烈的细胞和体液免疫反应。通过给予含锌或鱼精蛋白的胰岛素制剂,以降低其溶解度,使其在皮下注射的部位凝

胰岛素注射液的含量测定方法

照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制,或2~4℃保存,48小时内使用。供试品溶液精密量取本品适量,每1ml中加9.6mol/L盐酸溶液3μl酸化,用0.01mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中含40单位的溶液对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见胰岛素含量测定项

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

胰岛素受体的溶解及活性测定实验             试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜 牛血清白蛋白 [125I]

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素

膜上胰岛素受体数量的测定实验

试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级) 牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰岛素 (受体级)

胰岛素自身抗体(IAA)测定的结果处理

  血清抗胰岛素抗体为阳性  (1)指导胰岛素依赖性糖尿病病人的治疗:循环中高滴度的胰岛素抗体是产生严重胰岛素抵抗的主要原因检测A-IAb可指导胰岛素的用量为耐药性糖尿病治疗提供了依据抗体滴度高时可适度增加速效胰岛素抗体滴度低时则改用长效胰岛素  (2)判断胰岛素依赖性糖尿病预后:胰岛素释放曲线低下

膜上胰岛素受体数量的测定实验

膜上胰岛素受体数量的测定实验             试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级)

膜上胰岛素受体数量的测定实验

胰岛素可高亲和性地与其受体结合(KD~109mol/L),这一能力使我们能估测出甚至是相当粗制的制备物中的胰岛素受体数。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒结合缓冲液[125I] 胰岛素 (受体级)牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17

胰岛素和C肽测定临床意义

[正常参考值]胰岛素:7-24mU/L。C肋:0.5-3.0ug/L。[临床意义]1.胰岛素和C肽测定主要用于糖尿病的分型。Ⅰ型糖尿病餐前、餐后C肽均低于正常人。其空腹胰岛素水平低于正常或不能测得,口服葡萄糖后无高峰,呈低平坦;Ⅱ型糖尿病患者空腹胰岛素水平正常或稍高,刺激后高峰延迟至2-3小时出现。

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白 [125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 结合缓冲液仪器、耗材 Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤 材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125

胰岛素自身抗体(IAA)测定的注意事项

  1、为了避免胰岛素对抗体测定的影响,受血应选择在早晨注射胰岛素之前。  2、抗胰岛素抗体即因注射外源性胰岛素而产生,即使间断使用,往往也可引起回忆性抗体反应。患者应引起这方面的注意  检查时要求:  (1)判断胰岛素依赖性糖尿病预后:胰岛素释放曲线低下而检测胰岛素抗体滴度偏高,说明患者不是胰岛功

胰岛素自身抗体(IAA)测定的临床意义

  1、诊断 IAA在Ⅰ型糖尿病患者中阳性率较高,是最早出现的自身抗体之一。Ⅰ型糖尿病的免疫学指标之一。新诊断的Ⅰ型糖尿病患者阳性率为40%-50%。  2、预后 判断Ⅰ型糖尿病预后:胰岛素释放曲线低下而检测胰岛素抗体滴度偏高,说明患者不是胰岛功能衰竭,提示病情稳定。  3、指导治疗 ①指导胰岛素依

关于胰岛素c肽测定及其释放试验的简介

  胰岛素-c肽测定及其释放试验是通过测定空腹及餐后血浆胰岛素和C-肽水平能反映胰岛B细胞功能,指导临床治疗一种检查方法。由于胰岛素和C-肽有一个共同的前体——胰岛素原,1分子胰岛素原在特殊作用下分解为1分子胰岛素和1分子C-肽,同时释放入血液中。胰岛素的半衰期为4-5分钟,而C-肽的半衰期为长约1

关于C肽测定方法的血胰岛素检查介绍

  C肽测定方法,适合没有使用胰岛素治疗的患者,在空腹及餐后2 h抽血进行测定,正常情况下空腹胰岛素水平应该为 10~25mU/dL,而餐后水平应比空腹高出 4~5 倍。如果胰岛素水平明显降低,就称之为绝对缺乏,如:1型糖尿病;如果并没有明显减少,而血糖仍高,就称为相对缺乏。胰岛素相对缺乏出现糖尿病