亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大提高ELISA的敏感度。亲和素-生物素系统在ELISA中的应用有多种形式,可用于间接包被,亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素,原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合,通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量,而且使其结合......阅读全文

亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子

简述亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

  亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小

生物素亲和素系统介绍

生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素(biotin,B)

标记亲和素生物素法(BAELISA)实验

实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原

标记亲和素生物素法(BAELISA)实验

检测未知抗原 检测未知抗体             实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。

生物素亲合素系统的生物素与亲和层析介绍

  亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。  生

生物素亲和素系统要注意什么问题

灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

生物素亲和素系统的基本类型及原理

基本类型有两种,一类以游离亲和素为中间物,分别连接包含生物素大分子的待检反应体系和标记生物素,称为BAB法;后来又在此基础上发展了亲和素-生物素化酶复合物技术(ABC)。另一类是直接用标记亲和素连接生物素化大分子反应体系进行检测的BA法,或称标记亲和素-生物素法(LAB)。此外,依据待检反应体系中所

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

亲和素生物素系统:如何减少干扰更好地应用于免疫...

亲和素-生物素系统:如何减少干扰更好地应用于免疫检测-1-什么是亲和素-生物素系统(链霉)亲和素-生物素是免疫检测中常用的信号放大系统。亲和素是蛋清中常见的糖类蛋白,由四个相同的亚基组成。每一个亚基都包含一个生物素结合位点,因此一个理论上正常的亲和素能够结合4个生物素。亲和素与生物素具有非常强烈的亲

生物素亲和素标记缺点

灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异

生物素亲和素酶联免疫吸附试验(BASELISA)

生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotinavidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放

生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(二)

       注意:        Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1)。       FQY = 在水性缓冲液(pH 7.2)中的荧光量子产率。        2.生物素化二抗       我们提供生物素化的二抗,可与基于链霉亲和素的扩增技术

生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(一)

       生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小,它可以与生物活性大分子(例如抗体)广泛结合,而不会对其功能(即抗体的结合位点)产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性,以及后续键的强度,可实现强大的流线型生物测定应用。

标记亲和素生物素法(BAELISA)实验——检测未知抗体

实验方法原理包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释,于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗涤缓冲液洗3次,每次3 min。 加样:加适当稀释的待检样品(未知抗体)于反应孔中,同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1 h,洗涤

标记亲和素生物素法(BAELISA)实验——检测未知抗原

实验方法原理亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原(

亲和素和生物素为什么亲和力最高

生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异性亲和

关于生物素亲合素系统的应用介绍

  BAS-ELISA是在常规ELISA原理的基础上,结合生物素(B)与亲和素(A)间的高度放大作用,而建立的一种检测系统。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达

生物素抗生物素蛋白系统的方法介绍

中文名称生物素-抗生物素蛋白系统英文名称biotinavidin system定  义利用生物素与待检测的示踪分子(如核苷酸、多肽等)或能与待检测物质结合的分子(如抗体等)相连接,再以抗生物素蛋白与易于检测的分子(如荧光素、能催化成色反应的酶等)相连接,分析生物体内微量物质的检测系统。应用学科生物化

生物亲和素-ELISA-知识

生物素亲和素 (又称抗生物素) 系统 (biotinavidinsystem,BAS) 标记抗体的技术是 20 世纪 70 年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使 BAS 标记技

生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(二)

        HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色:将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育,然后与生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)进行孵育,然后加入iFluor™647-链霉亲和素偶联物(Cat# 16966),使用D

生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(一)

       上一期我们给大家介绍了目前在生化实验中被广泛使用的生物素-链霉亲和素结合系统,以及其中的第一个成员——生物素及其衍生物以及他们的一些常规的应用,今天给大家带来了该系统中另外一个重要的成员——链霉亲和素及其衍生物,与生物素类似,链霉亲和素分子本身也较小,同时也可以与生物活性大分子(例

生物素亲和素法化学染色有哪些技术呢

  生物素即维生素H,是一种碱性蛋白。亲和素具有4个与生物素亲和力极高的结合位点。能够彼此牢固结合而不影响彼此的生物学活性。常用的技术类型有:  (一)亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(ABC)  原理:亲和素与酶标生物素结合,形成可溶性亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)。其与生物素化抗

生物素链霉抗生物素蛋白系统的方法介绍

中文名称生物素-链霉抗生物素蛋白系统英文名称biotin streptavidin system定  义利用生物素与链霉抗生物素蛋白有很高亲和结合能力设计的检测分析系统。与生物素-抗生物素蛋白系统相似,但链霉抗生物素蛋白表面所带正电荷少,且不含糖基,在实验中非特异性结合远低于抗生物素蛋白。应用学科生

亲和素的应用特点

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子

生物素的研究与应用

生物素(Biotin)为B族维生素之一,又称维生素H、维生素B7、辅酶R(Coenzyme R)等。是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时,从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。生物素是水溶性维生素B群成员。在肝、肾、酵母、牛乳中含量较

生物素的主要应用介绍

生物素,即人们所熟知的维生素H,它能使身体将食物转化为自身能量。生物素有利于细胞的健康和再生。糖尿病患者可以通过生物素改善血糖的调节。头发和指甲的健康也需要生物素。 保健用途糖尿病。补充生物素,生物素通过改善胰岛素和血糖的使用帮助改善血糖的调节。头发和指甲。补充生物素可以修复薄弱爆裂的脚趾甲和手指甲

关于生物素亲合素系统的简介

  生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。近年大量研究证实,生物素—亲和素系统几乎可与研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放

简述生物素亲合素系统的原理

  生物素(biotin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取,分子量244.31Da.生物素分子有两个环状结构(如图1),其中Ⅰ环为咪唑酮环,是与亲和素结合的主要部位;II环为噻吩环,C2上有一戊酸侧链,其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的唯一结构,经化学修饰后,生物素