科学家称过低发育效率阻碍哺乳动物克隆
距离第一个克隆生命——“多莉”羊诞生已有15年，克隆人一直是伦理学划定的禁区，但与此同时，人们总能不断听到来自科学界的种种关于克隆人将会实现的声音。近日，美国哈佛大学医学院的遗传学家乔治·丘奇表示，自己能够利用克隆技术“复活”早在3.3万年前就已灭绝的尼安德特人。面对人类克隆，你是否也这般乐观。 近日，一部改编自大卫·米切尔同名小说的电影《云图》在国内热映，其中一个故事描述了基因改造的克隆人面对被机械化利用的时代的恐惧，这样的警世令影片备受关注。 然而，有意思的是，据英国《每日邮报》网站1月20日报道，美国哈佛大学医学院的遗传学家乔治·丘奇发布了一个大胆的想法，他坚信自己能够利用克隆技术“复活”早在3.3万年前就已灭绝的尼安德特人。 自第一个克隆生命——“多莉”羊诞生后的十几年间，克隆人一直是伦理学划定的禁区，但与此同时，人们总能不断听到来自科学界的种种关于克隆人可以实现的声音。 即使就技术而言，我们......阅读全文
科学家称过低发育效率阻碍哺乳动物克隆
距离第一个克隆生命——“多莉”羊诞生已有15年，克隆人一直是伦理学划定的禁区，但与此同时，人们总能不断听到来自科学界的种种关于克隆人将会实现的声音。近日，美国哈佛大学医学院的遗传学家乔治·丘奇表示，自己能够利用克隆技术“复活”早在3.3万年前就已灭绝的尼安德特人。面对人类克隆，你
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理 将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 硅油仪器、耗材 克隆培养环巴氏吸管生长培养基多孔板无菌镊移液器粗头笔实验步骤 1. 观察细胞克隆，用毡制粗头笔
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。实验材料胰蛋白酶试剂、试剂盒硅油仪器、耗材克隆培养环巴氏吸管生长培养基多孔板无菌镊移液器粗头笔实验步骤1. 观察细胞克隆，用毡制粗头笔或 Nik
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。实验材料胰蛋白酶 试剂、试剂盒
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理 将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。 实验材料
单克隆与克隆的区别
无性增殖（分裂、生殖）叫做克隆，克隆是一个很大的范围，单克隆是指的单克隆抗体，它由融合的细胞得来。是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。“单”和“克隆”要分开看，克隆是因为它是无性增殖来的，通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的无性生殖方式（如植物）。是原来细胞的基因的
简述分子克隆化克隆的选择
①直接筛选：有些载体带有可辨认的遗传标记，能有效地将重组分子与本底区分。例如：有些λ噬菌体携带外源基因后形成的噬菌斑就会从原来的混浊变为清亮；还有些载体分子携带外源基因后，形成的菌落或噬菌斑的颜色有明显变化，如蓝色变为无色；有些λ噬菌体能侵染甲菌而不能侵染乙菌，携带外源DNA片段后便能侵染乙菌，
单克隆抗体的克隆方法
经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过
DNA克隆
DNA克隆（主要内容如下）· General Procedure· PCR Cloning· Subcloning· ET Cloning· Vector Preparation· Ligation Re
基因克隆
外源DNA和质粒载体的连接反应 外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交
概述单克隆抗体的克隆方法
经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞，
单克隆抗体的克隆化方法
克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细
单克隆抗体的克隆化方法
实验原理经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细
单克隆抗体的克隆化方法
实验原理经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细
单克隆抗体的克隆化方法
克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细
单克隆抗体的克隆化方法
实验概要本文介绍了单克隆抗体的克隆化方法，包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。实验原理经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细
单克隆抗体技术：克隆化(有限稀释法、软琼脂克隆化、...
经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞，经
航运激增威胁北极哺乳动物
研究人员希望，他们的发现将促成破坏性更小的航线。图片来源：PNAS 对于鲸和北极熊来说，融化的海冰绝不仅仅意味着简单的栖息地丧失。一项最新研究表明，开放水域季节变长导致的北极航运量剧增，可能使在北极栖息的众多海洋哺乳动物处于危险境地。 随着夏季海冰覆盖量减少，诸如西北航道等航线在较温
哺乳动物可通过肠道吸氧
近日，美国辛辛那提儿童医院研究人员证明，通过直肠提供氧气或含氧液体，能够帮助小鼠等实验动物在低氧条件下存活。研究人员认为，该方法可能提供一个挽救呼吸衰竭的危重患者的新范式。相关研究结果发表于5月14日《医学》。 未参与该研究的美国科罗拉多大学胃肠病学家Sean Colgan表示：“这看起来
哺乳动物－DNA－的快速分离
根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb，适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化，或者是 5~15 μg/300μl 全血。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 k
哺乳动物－DNA－的快速分离
实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb，适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化，或者是 5~15 μg/300μl 全血。实验材料 无 DNase 的 RNase蛋白酶 K哺乳动物组织或全血试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液乙
哺乳动物－DNA－的快速分离
实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb，适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化，或者是 5~15 μg/300μl 全血。
哺乳动物组织的匀浆实验
实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析，重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织，使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中，而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶
哺乳动物组织的匀浆实验
基本方案 附加方案：从组织匀浆液中去除黏蛋白 实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析，重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织，使蛋白迅速地
克隆经验—帮助新手快速做出克隆3
酶切 直接在回收PCR产物的试管中配置酶切体系： PCR产物酶切－制作插入片断 公用Buffer 6μL 酶 I 3μL 酶 II 3μL PCR产物 —— 双蒸水 48μL 合计 60μL 要将PCR产物接入的质粒载体A，取A质粒3μL进行酶切。 A质粒酶切－制作载体片断
关于单克隆抗体的克隆方法介绍
1．配2.5%的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。 2．将117ml完全DMEM液和3ml10倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。 3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5%琼脂糖的完全DMEM液，并加75×108脾细胞。 4．每块平皿加10ml，于室温中凝固。 5．
克隆心得：帮助新手快速做出克隆2
酶切直接在回收PCR产物的试管中配置酶切体系：PCR产物酶切－制作插入片断公用Buffer 6μl酶 I 3μl酶 II 3μlPCR产物 ——双蒸水 48μl合计 60μl要将PCR产物接入的质粒载体A，取A质粒3μl进行酶切。A质粒酶切－制作载体片断公用Buffer 3μl酶 I 1μl酶 II
单克隆抗体(monoclonal－antibody)克隆化技术
经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞，经
克隆心得：帮助新手快速做出克隆1
本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创，我在其基础上进行了一些改动，主要是DNA回收上采取了更简单的方法。（本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆的情况。对于分步酶切制作片断，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）一、片断平移的克隆（也适用于多片断连接）简介：将用作载
克隆经验:帮助新手快速做出克隆1
本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创，我在其基础上进行了一些改动，主要是DNA回收上采取了更简单的方法。（本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆 的情况。对于分步酶切制作片断，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）一、片断平移的克隆 （也适用于多片断连接）简介：将用